항체 스크리닝

표적 세포주 개발을 위한 스크리닝 결과의 시각화

iQue Forecyt® 소프트웨어를 활용하면 스크리닝 결과를 빠르고 손쉽게 시각화 할 수 있습니다. 먼저, 표적 항원을 인코딩하는 렌티바이러스에 의해 형질도입된 세포를 선택압 하에서 배양, 96-웰 플레이트 각각의 웰에 정렬시킨 후 세포가 충분히 증식하면 그 부분 표본을 분석용 플레이트로 옮기고 iQue 고성능 유세포분석 플랫폼을 활용하여 표면 항원 발현을 확인, 얼마나, 많은 세포가 카운팅 되느냐에 따라 세포 증식도를 파악할 수 있습니다. 단, 이 과정에서 사용되는 항체는 해당 항원에 특이성을 갖는 형광 태그된 항체이어야 합니다.

이렇게 생성된 정보를 바탕으로 표적 항원의 발현 수준이 높고 증식 세포 수가 많은 웰이 어디인지를 시각적으로 매핑하여 보여주는 프로파일 맵이, 상기 예시의 상단부와 같이 생성됩니다.

상기 예시의 하단부인 플레이트 뷰는 세포 포면에 표적 항원이 어느 정도로 발현되었는지를 각 웰 별로 보여주는 시각 데이터로, 형질도입을 시도하지 않은 대조군 세포의 데이터를 오버레이하여 양성 클론 데이터를 직관적으로 식별할 수 있습니다.

마우스 혈청 스크리닝 결과의 시각화

iQue Forecyt® 소프트웨어의 HeatMap 기능으로 마우스 혈청 스크리닝 결과를 손쉽게 시각화할 수 있습니다. 3종의 세포주를 형광염료로 염색 (컬러 코딩) 라벨링 한 후 384-웰 플레이트의 각 웰에 혼합, 분주하고 형광 검출 항체를 첨가한 후 iQue 고성능 유세포분석 플랫폼을 활용하여 플레이트 분석을 시행한 결과이며, 면역된 마우스 및 대조군 마우스 도합 36마리에서 유래한 혈청을 8배 희석하여 시험한 결과를 분석하였습니다.

HeatMap상 보이는 결과는 대조군 세포에 대한 항체 결합, 연관성이 없는 항원을 발현하는 세포에 대한 항체 결합, 표적 항원을 발현하는 세포에 대한 항체 결합을 각각 나타내는 것입니다.

하이브리도마 라이브러리 스크리닝 결과의 시각화

iQue Forecyt® 소프트웨어의 Panorama 기능으로 하이브리도마 라이브러리 스크리닝 결과를 손쉽게 시각화할 수 있습니다. 3종의 세포주를 형광염료로 염색 (컬러 코딩) 라벨링 한 후 384-웰 플레이트의 각 웰에 혼합, 분주하고 각 웰에 하이브리도마 배양 상층액과 형광 검출 항체를 차례로 첨가한 후, 총 9,600개의 하이브리도마를 서로 다른 두 면역된 마우스에서 테스트한 스크리닝 결과를 1일 이내에 도출할 수 있습니다. 이 때, 마우스의 면역은 표적 항원을 발현하는 세포로 시행합니다.

HeatMap상 보이는 결과 (적색)는 대조군 세포에 대한 항체 결합, 연관성이 없는 항원을 발현하는 세포에 대한 항체 결합, 표적 항원을 발현하는 세포에 대한 항체 결합을 각각 나타내는 것입니다.

프로파일 맵은 이들 각 세포에 대한 결합 결과를 조합하여 보여주는 것으로, 연관성이 없는 항원을 발현하는 세포나 음성 대조군 세포가 아닌 표적 항원에만 특이적으로 결합하는 세포 부분이 청색으로 표시되어 있습니다.