고성능 유세포분석을 이용한 항SARS-CoV-2 IgG, IgM, IgA 검출
고처리량 Multiplex 혈청분석으로 포괄적인 항SARS-CoV-2 항체 프로파일을 확보해 코로나19 연구를 진행시켜 보세요.
중증급성호흡기증후군 코로나바이러스2(SARS-CoV-2)는 변이와 회피를 거듭하며 살아남고 있습니다. 바이러스를 방어하는 데 매우 중요한 체액성 면역반응을 개발하려면 SARS-CoV-2에 대한 항체, 특히 SARS-CoV-2 스파이크 단백질 수용체 결합 도메인(RBD)을 표적으로 한 항체 반응의 규모와 기간을 정확하게 분석할 필요가 있습니다. SARS-CoV-2 스파이크 RBD는 안지오텐신 전환효소 2(ACE2)에 결합해 바이러스가 인간 세포에 침입할 수 있도록 하며, 현재 사용되는 많은 코로나19의 주 표적입니다. SARS-CoV-2 스파이크 RBD에 대한 항체는 일반적으로 바이러스 중화 활동을 하며, 바이러스에 대한 방어면역과 관련이 있습니다. 혈청 시험을 통해 SARS-CoV-2 스파이크 RBD에 특이적인 항체의 주요 동형 3개(IgG, IgM, IgA)를 정량화하면 코로나19 환자와 백신 접종자의 항체 반응 기간을 분석 및 모니터링하고, 무증상 감염을 찾아내고, 모집단의 과거 감염을 조사할 수 있습니다.
항SARS-CoV-2 스파이크 RBD IgG, IgM, IgA 항체는 효소결합면역흡착분석(ELISA), 측면흐름 면역분석, 유세포분석 등 여러 방법으로 검출할 수 있습니다. 그러나 이러한 기존 방법에는 다음과 같은 한계가 있습니다.
- 정성적 결과만 제공합니다.
- 민감도와 특이성이 낮습니다.
- 노동력이 많이 필요하고, 처리량이 낮은 경우가 많습니다.
- IgG, IgM, IgA 항체의 Multiplex 분석이 불가능합니다.
- 대량의 시약이 필요합니다.
iQue® SARS-CoV-2(IgG, IgM, IgA) 키트를 사용하면 96웰 또는 384웰 플레이트에서 하나의 웰로도 IgG, IgM, IgA 항SARS-CoV-2 스파이크 RBD 항체를 높은 민감도, 정확도, 속도로 혈청분석하고, pg/mL 단위로 항체를 검출할 수 있습니다. 3개의 항체 동형을 결합해 한 번에 분석하면 귀중한 환자 샘플을 절약하고 시간을 절감할 수 있으며, SARS-CoV-2 자연감염이나 코로나19 백신 접종 후 시간에 따른 체액성 면역반응에 대해 포괄적인 동적 프로파일을 확보할 수 있습니다. iQue® SARS-CoV-2(IgG, IgM, IgA) 키트로 연구 속도를 높여 보세요.
적용분야
분석 개요
iQue® SARS-CoV-2(IgG, IgM, IgA) 키트는 바이러스 감염이나 백신 접종 시 면역체계가 만들어내는 SARS-CoV-2 스파이크 단백질 RBD에 특이적인 인간 IgG, IgM, IgA 항체를 동시에 검출할 수 있는 비드 기반 면역분석 솔루션입니다.
iQue® SARS-CoV-2(IgG, IgM, IgA) 키트는 VBR로 설정한 iQue® 플랫폼에서 높은 정확도로 Multiplex 분석을 수행할 수 있도록 최적화되었습니다. 간소화된 분석과정, 프리셋 템플릿을 사용해 인간 혈액 샘플(혈청 및 혈장)로부터 항SARS-CoV-2 스파이크 RBD 항체를 정성적, 정량적으로 쉽게 분석합니다.
기초 분석 과정
- 사전 희석된 환자 샘플을 96웰 또는 384웰 플레이트에 첨가합니다.
- SARS-CoV-2 스파이크 RBD와 결합한 비드를 첨가해 항SARS-CoV-2 스파이크 RBD 항체를 캡처합니다.
- 형광 표지된 항인간 IgG, IgM, IgA 항체가 포함된 SARS-CoV-2 항체 검출 칵테일을 첨가합니다.
- iQue® 플랫폼(VBR 설정)으로 플레이트를 분석합니다.
주요 장점
정확한 면역반응 분석 - 자연 감염이나 백신 접종에 대한 반응으로 생성된 항SARS-CoV-2 스파이크 RBD IgG, IgM, IgA 항체를 높은 민감도로 동시 측정합니다.
생산성 최대화 - 하나의 웰을 사용해 SARS-CoV-2 스파이크 RBD에 특이적인 항체의 주요 동형 3가지(IgG, IgM, IgA)를 고처리량으로 평가하여 체액성 면역반응을 폭넓게 분석할 수 있는 Multiplex 분석을 제공합니다.
귀중한 샘플 절약 - 최소 100배 이상 희석한 샘플 10µL로도 분석을 수행할 수 있는 간소화된 과정으로 귀중한 샘플을 절약할 수 있습니다.
정확한 면역반응 분석
자연 감염이나 백신 접종에 대한 반응으로 생성된 항SARS-CoV-2 스파이크 RBD IgG, IgM, IgA 항체를 높은 민감도로 동시 측정합니다.
그림 1. 회복한 코로나19 환자(P1-4)로부터 채취한 혈청(A)의 항SARS-CoV-2 스파이크 RBD IgG, IgM, IgA 항체 분석. 팬데믹 전 두 명의 피험자로부터 채취한 혈청을 음성 대조군으로 포함시켰습니다(Neg. 1-2). (B) 피험자 2명(VA & VB)을 대상으로 백신 접종 전(VA-0, VB-0)과 1차 접종 후(VA-1, VB-1), 2차 접종 후(VA-2, VB-2) 채취한 혈청을 BNT162b2(Pfizer-BioNTech) 코로나19 백신과 함께 분석했습니다. 혈청 샘플은 Assay Diluent로 100배 희석했고, 이후 다시 5배씩 3회 연속희석해 희석 곡선을 만들었습니다.
생산성 최대화
실시간 데이터 분석과 새로운 시각화 툴로 하나의 웰을 사용해 SARS-CoV-2 스파이크 RBD에 특이적인 항체의 주요 동형 3가지(IgG, IgM, IgA)를 고처리량으로 평가하여 체액성 면역반응을 폭넓게 분석할 수 있는 Multiplex 분석을 제공합니다.
그림 2. 회복한 코로나19 환자, 또는 BNT162b2(Pfizer-BioNTech) 백신을 접종한 개인으로부터 채취한 혈청의 항SARS-CoV-2 스파이크 RBD IgG, IgM, IgA 항체 분석 백신. 혈청 샘플은 Assay Diluent로 100배 희석했고, 이후 다시 3배씩 3회 연속희석했습니다. 2명의 코로나19 음성 피험자로부터 채취한 혈청을 음성 대조군으로 포함시켰습니다(Neg. Ctl). 각 색상은 플레이트의 서로 다른 사분면에서 반복 수행한 3회의 희석 곡선을 나타냅니다. (A) 플레이트 레이아웃. (B) 항SARS-CoV-2 스파이크 RBD의 웰당 IgG 농도 히트 맵(ng/mL).
귀중한 샘플 절약
간소화된 분석과정으로 귀중한 샘플을 절약할 수 있습니다.
그림 3: iQue® SARS-CoV-2(IgG, IgM, IgA) 키트 분석과정. 소량의 샘플로도 쉽게 분석을 수행할 수 있습니다(최소 100배 희석한 혈장/혈청 10µL로도 가능).
자주 묻는 질문
BSL-3 실험실에서 작업하는 경우가 아니라면 코로나19 환자 샘플은 BSL-2 실험실에서 취급하기 전에 잠재적인 바이러스 오염을 불활화할 수 있도록 처리해야 합니다. 1시간 동안 56˚C에서 가열하거나, 특정 화학적 계면활성제로 처리하는 등 검증된 여러 바이러스 불활화 방법을 문헌에서 찾아볼 수 있습니다. 어떤 방법을 사용하든 바이러스가 효과적으로 불활화되었는지 반드시 검증해야 합니다. 싸토리우스의 분석에서 사용된 샘플은 실온에서 5~10분 동안 4% 트리톤 X-100을 사용해 불활화했습니다. 샘플 채취 후에는 iQue® 장비가 각 분석이 끝나거나 장비를 종료할 때마다 자동으로 청소를 진행합니다. 다른 유세포분석 시스템과 마찬가지로 분석 과정에서 만들어지는 폐기물은 적절히 오염을 제거한 후 지역 규제에 따라 폐기해야 합니다.
키트는 96웰 플레이트 1개~5개, 384웰 플레이트 1개~5개용으로 구성되어 있습니다. 원하는 포맷을 선택하여 구매 가능합니다. 실제 샘플의 수는 실험에 사용되는 희석 샘플의 수와 배수에 따라 다를 수 있습니다.
이 분석 키트는 보정 기능, 자동으로 농도반응곡선을 생성하는 사전 정의된 분석 템플릿 등이 포함된 iQue® 고성능 유세포분석 플랫폼과 함께 사용하도록 개발되었습니다. 적은 샘플이 필요하다는 점도 고처리량 iQue® 고성능 유세포분석 플랫폼만의 특징입니다. 특히 iQue® 플랫폼은 샘플 필요량이 적어 이 분석에는 사전 희석된 혈청 또는 혈장 샘플이 10µL밖에 필요하지 않고, 최종 세척 후에도 획득 전 10µL의 버퍼만 추가하면 됩니다. 그 밖의 시스템은 샘플을 훨씬 더 많이 사용해야 할 수 있습니다.
RBD는 현재 백신과 마찬가지로 오리지널/WT SARS-CoV-2 바이러스주에서 유래되었습니다.
이 키트는 정성적 또는 정량적 분석이 가능하며, 일반적으로 낮은 피코그램부터 높은 나노그램 단위의 농도까지, 폭넓은 범위를 검출할 수 있습니다. 예를 들어, 많은 수의 샘플을 사용하는 초기 스크리닝 연구의 경우 정성적 분석이 유용할 수 있습니다. 정성적 연구는 검출 수준이 30~60pg/mL으로, 코로나19 음성 혈장 샘플을 바탕으로 한 음성 문턱값보다도 훨씬 낮습니다. 정량적 분석의 최소정량한계(LLOQ)는 이보다 훨씬 높으며, Ab 동형에 따라 다릅니다. 예를 들어, IgG Ab의 정확한 정량을 위한 선형 범위는 키트에 포함된 Ab 표준물질을 사용하고 96웰 플레이트의 한 줄(row)이나 384웰 플레이트의 한 컬럼(column)에 1:3 연속희석 곡선을 준비하는 경우 약 50ng/mL ~ 300pg/mL입니다.
96웰 또는 384웰 플레이트에 샘플을 첨가하면 원하는 만큼 샘플을 반복실험할 수 있습니다. 여러 플레이트로 샘플을 나눈 다음, 같은 표준 항체 곡선을 사용해 모든 테스트 샘플을 보간할 수도 있습니다.
주문 정보
플랫폼: iQue® 3/iQue® Screener Plus - VBR Configuration과 호환 | ||
제품명 | 포맷 | Cat. No. |
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1 x 96웰 | ||
5 x 96웰 | ||
1 x 384웰 | ||
5 x 384웰 | ||
