세포배양배지 - 후보물질을 위한 세포 성장의 동력원

일차 세포주는 조직으로부터 분리한 단일 세포 유형에서 생산되어 최적의 통제된 조건하에 배양됩니다. 

세포 배지의 재료에는 영양물질(유기물 및 무기물), 비타민, 염, O₂ 및 CO₂ 기체상, 정의되거나 정의되지 않은 출처의 단백질, 탄수화물, 사이토카인, 성장인자, 보조인자가 포함됩니다.

배지는 2~3일 간격으로 교환해야 합니다. 그러나 배지는 세포 밀도가 건강한 수준에 도달했을 때 교체하는 것이 가장 좋으므로 이상적인 교환 주기는 세포 배양액의 성장 속도에 따라 달라집니다. 또한, 대부분의 배지에는 pH가 감소하면 색이 변하는 pH 지시약이 포함되어 있습니다. pH 감소는 영양물질 고갈과 노폐물 축적을 나타내는 신호입니다.

1. 혈청 포함 배지 - 혈청이나 세포 추출물 등의 정의되지 않은 생물학적 물질을 첨가한 기초배지
2. 무혈청 동물성 성분 포함 배지 - 동물로부터 유래한 정의된 단백질, 성장인자, 사이토카인을 첨가한 기초배지
3. 무혈청, 무이종 배지 - 오로지 인간으로부터 유래한 정의된 단백질, 성장인자, 사이토카인을 첨가한 기초배지
4. 화학적으로 규명된 무동물성 배지 - 화학적으로 규명된 출처로부터 유래한 물질로 구성된 기초배지

세포배양배지는 세포 확산에 필요한 영양물질과 성장인자를 제공합니다. 일반적인 기초배양배지는 아미노산, 탄수화물, 비타민, 무기염류, 포도당, 미량원소, 그리고 안정적인 pH 유지를 위한 버퍼 시스템으로 구성됩니다. 기존 방식에서는 성장인자로서 동물 유래 혈청을 기초배지에 첨가했습니다. 지금은 화학적으로 규명된 무혈청 제형이 선호됩니다.

무혈청 배지는 동물에서 유래한 혈청 없이 세포를 성장시키는 배지를 말합니다. 무혈청 배지에는 동물성 성분이나 가수분해물이 없는 화학적으로 규명된 배지가 포함됩니다. 

무혈청 배지를 사용하면 지정한 조건에서 세포를 배양해 배치 간 가변성을 줄일 수 있습니다. 정제 및 다운스트림 공정도 간소화할 수 있습니다.

이종(Xeno)은 이질적이라는 뜻의 그리스어, ‘xenos’에서 유래했습니다. 무이종 배지는 소, 돼지 등 다른 종이 아닌 인간에서 유래한 성분만으로 구성된 제형을 가진 배양 배지를 말합니다.

무혈청 배지는 동물종에서 유래한 혈청이 없지만, 다른 동물성 성분(HSA, BSA 등)은 포함할 수 있습니다. 무이종 배지는 인간이 아닌 동물에서 유래한 성분이 없지만, 인간의 혈청은 포함할 수 있습니다.

각 배지는 제조사의 프로토콜 및 권장사항에 따라 보관해야 합니다. 대부분의 기초배지는 구성성분의 분해와 오염을 막을 수 있고 빛이 닿지 않는 2~10°C의 통제된 환경에 보관해야 합니다. 한 번 개봉하여 무균 환경에서 다른 성분을 첨가한 배지는 일반적으로 빛이 닿지 않는 곳에서 2~8°C로 1~4주 동안 보관할 수 있습니다. 

각 배지는 제조사의 프로토콜 및 권장사항에 따라 보관해야 합니다. 일반적인 유효기간은 제조 후 12~18개월입니다. 한 번 개봉하여 무균 환경에서 다른 성분을 첨가한 배지는 일반적으로 빛이 닿지 않는 곳에서 2~8°C로 1~4주 동안 보관할 수 있습니다. 혈청 항생제를 첨가한 클래식 배지는 4°C에서 최대 4주 동안, 무혈청 배지는 최대 2주 동안 보관할 수 있습니다.

사용하지 않는 배지는 10% 이상의 최종 농도로 표백제를 첨가해 미생물을 처리한 뒤 폐기해야 합니다.