동결 및 해동으로 세포 보호하기

세포 동결 배지 및 염 기반 용액

세포 동결 및 보호를 통한 고성능 보호 기능

NutriFreez®는 줄기세포, T세포, PBMC를 비롯한 세포의 동결보존 용도로 설계되고 검증된 고품질 동결 솔루션입니다. 무이종, 무동물성 시스템에서 세포를 배양할 때 일관성 유지에 필수적인 동결보존 과정에서 무동물성 조건을 유지해줍니다. 신뢰성과 일관성이 입증된 NutriFreez®는 동결, 보관, 해동 과정에서 고성능 세포 보호 환경을 제공합니다. 

동결보존 솔루션 찾기

NutriFreez® 동결보존 솔루션 

  • -196°C의 초저온에서 일차세포, 림프구, 줄기세포 등 폭넓은 인간 및 동물 세포를 보호할 수 있도록 최적화 

  • 뛰어난 세포 생존성 및 회수율 

  • 완벽하게 규명된 고유의 무혈청 제형 

  • 폭넓은 문헌 레퍼런스 

  • GMP 제조  

  • 임상 용도에 적합 — DMSO 농도가 낮은 염 기반 용액 이용 가능 

  • DMF 이용 가능 

간편해진 배지 구매

간단해진 싸토리우스의 구매 시스템으로 다양한 종류와 장점을 가진 배지를 쉽게 선택해 보시기 바랍니다.

세포별로 최적의 동결 배지 선택하기

NutriFreez® D10 동결보존 배지는 줄기세포, T세포, PBMC, CHO, Vero 세포 등 다양한 세포의 생존성, 부착성, 생체활성도를 효과적으로 유지해줍니다. 

  • 10% DMSO 포함 

  • 무동물성 

  • 무단백질 

  • 즉시 사용 가능한 솔루션, 간편한 프로토콜 

  • GMP 제조 

  • DMF(Drug Master File) 이용 가능 

NutriStem® D10 성능 데이터

정상 형태의 뛰어난 hMSC 확산

NutriFreez® D10 동결보존 배지의 hMSC는 시중의 다른 무혈청 솔루션과 비교해 해동 3일 후 정상적인 형태와 뛰어난 확산성을 나타냅니다. 

장기간 동결 후에도 높은 hMSC 생존률

NutriFreez® D10 동결보존 배지의 생존성은 장기간 동결보존 후에도 91%를 상회합니다.

높은 hPSC 회수율

NutriFreez® D10 동결보존 배지에서 동결보존한 인간 유도만능줄기세포는 높은 단일 세포 회수율과 정상적인 형태 및 부착성을 나타냅니다. 

높은 PBMC 생존성

NutriFreez® D10에서 동결보존한 PBMC는 자체 동결 솔루션과 비교해 91% 이상의 생존성을 나타냅니다.

세포 치료제를 위한 최적의 동결 솔루션 선택하기 

NutriFreez® D5 염 기반 동결보존은 세포 치료제 및 임상 분야를 위한 최적의 세포 동결 및 해동 솔루션입니다. 

  • 5% DMSO 포함 

  • 무동물성 

  • 무단백질 

  • 즉시 사용 가능한 솔루션, 간편한 프로토콜 

  • GMP 제조 

  • 극도로 민감한 세포에서도 높은 생존성, 회수율, 성능 

NutriStem® D5 성능 데이터

다양한 출처에서 유래한 hMSC의 높은 생존성

다양한 출처에서 유래한 hMSC를 NutriFreez® D5로 동결하고 1주일 뒤 해동했습니다.

hMSC의 높은 확산성과 정상적인 형태

다양한 출처에서 유래한 hMSC를 NutriFreez® D5로 동결했습니다. 시딩 3일 후 촬영한 대표 이미지(X100)에서 확산 결과를 볼 수 있습니다. 숫자는 생존성 있는 세포 수를 나타냅니다.

고전적 hMSC 표지자 프로파일 유지

NutriFreez® D5 염 기반 동결보존 용액으로 동결한 후에도 hMSC는 높은 고전적 MSC 표지자 프로파일과 낮은 조혈 오염도를 유지합니다.

hMSC 다능성 유지

NutriFreez® D5 염 기반 용액으로 AT-MSC 세포를 동결보존하고 P2에서 해동한 뒤 패시지 P3/P4에 걸쳐 지방형성, 골형성, 연골형성 MSCgo™ 분화 배지에 시딩하고 성장시켰습니다.

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최적화된 효율적 세포 동결보존

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연구 및 세포 치료제용 세포 동결 배지 선택하기

  • 뛰어난 세포 생존성과 회수율을 위해 최적화된 는 일차세포, 림프구, T세포, 줄기세포 등 매우 민감한 세포를 비롯해 폭넓은 세포를 보호합니다.
  • 완벽하게 규명된 고유의 고품질, 무혈청, 무동물성, 무단백질 동결 제형으로 연구, 세포은행, 치료용 분야에 적합합니다.
  • DMSO 농도가 5%에 불과한 염 기반 솔루션은 세포 치료제 분야에 특히 적합합니다.
  • cGMP 가이드라인을 준수하여 제조됩니다.
  • DMF를 이용할 수 있습니다.
  • 300건 이상의 문헌에서 참조되었습니다.
  • 맞춤 구성 및 스케일업 지원을 받을 수 있습니다.

FAQ - 세포 동결 배지

세포는 동결 과정에서 수분을 잃고, 최소 부피 미만으로 크기가 축소되면 빠르게 생존성을 잃습니다. 디메틸술폭시드(DMSO)와 같은 동해방지제를 사용하면 이러한 영향을 줄일 수 있습니다.

배지에는 저속 동결 과정에서 얼음 결정 형성을 방지하고 세포 생존성을 유지할 수 있도록 수분 흡수제가 포함되어 있어야 합니다.

혈청에 포함된 다양한 성분은 동결보존에 필요하지 않으며, 동결 및 해동 과정에서 세포를 손상시킬 수 있습니다. 무동물성 용액은 세포 생존성과 회수율을 높이고 재현성과 일관성을 개선하는 데 도움이 됩니다.

DMSO는 세포독성을 나타냅니다. 따라서 동결보존 시 10% 이하로 희석된 DMSO에만 세포를 둘 수 있습니다.

같은 효과를 가진 무독성 보호제가 있다면 DMSO 없이도 세포를 냉동할 수 있습니다.

대부분의 세포 배양액은 –130°C 아래에서 수년간, 혹은 무기한 보관이 가능합니다. ATCC는 40년 이상 동결보존된 배양액에서도 세포를 회수한 적이 있습니다.  동결보존의 장점은 장비 및 시약에 필요한 투자보다 훨씬 큽니다. 동결보존에는 다음과 같은 이점이 있습니다.

  • 장비 고장이나 미생물/타 세포주 오염으로 인한 배양액 손실을 방지할 수 있도록 안전 보존배양액을 생성합니다.
  • 사용하지 않는 배양액을 유지하는 데 필요한 시간과 에너지 및 자원을 절약할 수 있습니다.
  • 이배화에 한계가 있어 언젠가 노화할 세포를 보존합니다.
  • 유전적 불안정성이나 선택적 압력으로 인한 표현형 편차 발생을 방지합니다.
  • 일련의 시험에 사용할 수 있는 표준 시약을 만듭니다(출처: ATCC 동물세포배양 가이드).
  1. 세포를 300~400 × g으로 4~5분간 원심분리해 세포 펠릿을 획득합니다. 그리고 상층액을 무균 제거합니다.                                                                                        
  2. 2°C~8°C에서 펠릿을 동결보존 용액에 부유시킵니다. 부유액을 잘 혼합하고 냉동바이알로 옮깁니다(예: 1.5mL 냉동바이알에 1.0mL의 부유액).        
  3. 속도를 통제할 수 있는 동결 시스템을 사용해 세포를 단계적으로(분당 1°C~2°C) 냉동하고, 액체질소에 바이알을 보관합니다(기체상). 또는 바이알을 동결 용기에 넣고 하룻밤 동안 -80°C로 옮깁니다. 그리고 다음날 냉동바이알을 액체질소로 옮깁니다. 싸토리우스에서는 기체상 방식을 권장합니다.                     
  4. 액체질소에 보관하고 24시간 뒤 바이알 하나를 해동해 동결보존의 효율을 확인합니다.


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동결보존 가이드 - 연구 & 임상용 세포 동결보존의 기초

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