무표지 생존성이란? 

생리학적으로 관련성 높은 세포 모델이 점차 흔하게 사용되면서 보다 심층적인 생물학적 인사이트를 제공할 수 있는 비교란성 무표지 솔루션의 수요도 증가하고 있습니다. 형광표지법을 사용하면 과정이 길어지고, 연구 결과에 영향을 미칠 수 있는 변수를 초래해 분석이 복잡해집니다. 형광 리포터를 모두 제거하면 표지나 라벨링 과정 자체에 의존하지 않고 관찰을 수행할 수 있습니다. 

무표지 분석의 장점 

  • 희귀한 종류의 세포를 사용하는 등, 형광표지법을 사용할 수 없을 때 비침습, 비교란성 분석으로 세포 군집의 건강을 연구할 수 있습니다. 
  • 지난 수년간 이루어진 실시간 세포분석 기술의 빠른 발전과 연산 능력을 활용해 복잡한 분석을 단순하고 사용자 친화적인 과정으로 수행할 수 있습니다. 또한, 인공지능(AI)이 제공하는 솔루션을 통해 세포 행동과 작용을 실시간 무표지 방식으로 분석할 수 있습니다.  
  • 무표지 세포 건강 분석을 사용하면 암과 기타 질병을 치료할 수 있는 새로운 치료제 후보 물질을 평가할 때 반드시 필요한 세포 연구를 일반적인 생리학적 조건에서 수행할 수 있습니다. 

Incucyte® 실시간 세포분석 시스템을 새로운 Incucyte® AI 세포 건강 분석 소프트웨어 모듈과 함께 사용하면 고처리량, 무표지 분석을 통해 분석 속도를 높이고, 동시에 편향 없이 뛰어난 재현성과 신뢰성을 제공하는 데이터를 생성할 수 있습니다. 


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AI 세포 건강 분석 소개

새로운 Incucyte® AI 세포 건강 분석 소프트웨어 모듈은 세포를 분리하고 생세포와 사멸세포를 구별하는 올인원 분석 툴입니다. 형광표지법을 사용하지 않아 세포 건강 분석의 처리량을 늘릴 수 있으며, 정확하고 객관적인 데이터를 짧은 시간, 낮은 비용으로 생성할 수 있습니다.  
   

Incucyte®️ AI 세포 건강 분석 소프트웨어 모듈은 모든 S 시리즈 장비를 지원하며, 컨트롤러의 GPU 보조 프로세서(BA-04870) 드롭인 하드웨어 업그레이드와 2022B 버전의 소프트웨어를 필요로 합니다. 소프트웨어 모듈과 함께 선택에 따라 무표지 방식이나 형광 매개변수(세포 경계 내 형광 강도)를 바탕으로 한 추가 세포 군집 분류 기능을 구매하실 수 있습니다.

Incucyte® AI 세포 건강 분석과정

분석과정: Incucyte® AI 세포 건강 분석 솔루션을 사용하면 검증된 데이터세트로 사전 훈련된 신경망을 통해 분리 및 분류 알고리즘을 개선하여 생세포/사멸세포 처리 및 정량화를 정확하게 수행할 수 있습니다. AI 기반 분석은 모든 웰과 시점에 적용되며, 확실한 분석 데이터와 생세포 또는 사멸세포 마스킹 시각화를 제공합니다.

주요 장점

Incucyte® AI 세포 건강 분석의 주요 장점 

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무표지 방식의 생세포/사멸세포 식별 및 계수

AI 기반 알고리즘을 사용해 훈련된 신경망을 바탕으로 세포 생존성을 동역학적으로 정량화합니다. 

그림 1: 약물로 처리한 부착성 및 비부착성 세포를 무표지 방식으로 동역학적 모니터링 및 정량화 - HeLa 세포와 Ramos 세포를 96웰 플레이트에 시딩하고, 캄프토테신 또는 Truxima®로 각각 처리했습니다. 2~3일에 걸쳐 고해상도(HD) 위상대조 이미지를 2시간 간격으로 획득했고, Incucyte® AI 세포 건강 분석으로 세포사를 정량화했습니다. 위상 동영상을 보면 시간에 따른 세포사(상단)와 AI 기반 생세포(녹색) 및 사멸세포(적색) 분리 마스킹 외곽선(하단)을 확인할 수 있습니다.


그림 2: 무표지 세포 생존성 분석 - Ramos B세포 림프종 세포를 서로 다른 농도의 항CD20 항체, 리툭시맙과 바이오시밀러 Truxima®로 처리했습니다. 세포사는 Incucyte® AI 세포 건강 분석을 사용해 정량화했습니다. 시간별 데이터를 보면 리툭시맙과 Truxima®로 인해 시간과 농도에 따른 세포사가 유도되었으며 IgG 대조군에 의한 독성은 경미한 수준임을 알 수 있습니다. 이미지는 처리하지 않거나(왼쪽) 2µg/mL의 리툭시맙으로 처리한(오른쪽) Ramos 세포를 48시간 후 촬영한 것입니다. 처리하지 않은 세포는 건강하며 생세포로 분류됩니다(녹색 구획). 그러나 처리한 세포는 부분적인 세포사를 나타내며, 사멸세포로 분류됩니다(적색 구획).


복잡한 생물학적 질문에 대한 객관적 해답 제공

생세포/사멸세포를 분류하고, 군집 내 세포 발달 과정을 모니터링해 풍부한 인사이트를 제공합니다.    


그림 3: 표준 방법과 유사한 AI 세포 건강 분석 결과 - A549 세포를 서로 다른 농도의 캄프토테신으로 처리했습니다.  시간별 데이터는 무표지 Incucyte® AI 세포 건강 분석법을 사용해 정량화한 사멸세포의 비율(왼쪽)과 Incucyte® Annexin V NIR 염료로 인한 NIR 형광 증가(중앙)를 보여줍니다. 농도반응곡선을 보면 72시간 후 데이터 오버레이(오른쪽)와 IC50 값이 유사함을 알 수 있습니다.

그림 4: 생세포 하위 군집 내 세포 주기 표지자 분석 - Incucyte® 세포 주기 Green/Orange 렌티바이러스를 발현하는 HT-1080 세포를 일정 농도 범위의 캄프토테신으로 처리했습니다(4nM~3µM). 그리고 Incucyte® AI 세포 건강 분석을 수행해 생세포와 사멸세포를 식별하고, 생세포 군집 내 형광 분류를 수행했습니다. 이미지는 청색 및 주황색 형광 채널과 겹쳐서 나타낸 분류 마스킹(보라색 = 생세포, 청록색 = 사멸세포)을 보여줍니다.  시간별 데이터를 보면 생세포 군집의 형광 분류와 G1 세포(주황색)의 시간과 농도에 따른 증가를 확인할 수 있습니다.

재현성 높은 고처리량 스크리닝 수행 

다양하게 훈련된 AI 기반 솔루션으로 부착성 세포나 비부착성 세포를 분석하여 확실하고 정확한 결과를 생성합니다. 


그림 5. 384웰 처리량으로 분석한 Incucyte® AI 세포 건강 - 4가지 종류의 세포를 384웰 마이크로플레이트에 시딩하고 일정 농도 범위의 캄프토테신, 사이클로헥시미드, 독소루비신으로 처리했습니다. 마이크로플레이트 뷰는 Incucyte® AI 세포 건강 분석을 사용해 정량화한 2일에 걸친 사멸세포 비율 증가를 보여줍니다.  데이터를 보면 고농도의 캄프토테신과 독소루비신이 IC50 값과 유사한 수준의 세포사를 유도했으며, 사이클로헥시미드는 농도별로 세포증식억제 효과를 나타냈음을 알 수 있습니다.

무표지 AI 밀집도 분석

새로운 Incucyte® AI 밀집도 알고리즘은 사용자 조작을 최소화하는 동시에 폭넓은 세포 종류와 형태에 맞춰 사용할 수 있도록 설계된 고성능 AI 기반 분석 툴...

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Incucyte® AI 세포 건강 분석 소프트웨어 모듈 

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Incucyte® SX5, S3, SX1 실시간 세포분석 시스템 지원


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