하이브리도마 & CHO 클론 채취

항체 생산을 위한 고발현 클론 스크리닝 및 분리

새로운 항체 생산용 세포주를 개발할 때에는 일관적으로 높은 수준의 표적 단백질을 생산하는 단일 세포 유래 클론을 식별해야 합니다. 많은 시간과 수작업이 필요한 기존의 기술과 비교해 CellCelector의 생산성 높은 스크리닝은 한층 효율적으로 수행할 수 있습니다.

고생산성 클론 선별 및 분리

하이브리도마 클론의 항체 생성 과정은 클론에 따라 크게 달라질 수 있습니다. 클론이 생성하여 배지로 분비하는 단백질은 형광 라벨링 이차 항체를 사용하면 눈으로 확인이 가능합니다. 반고체 배지의 점성 덕분에 항체가 더 이상 배지로 확산되지 않아서 단백질을 생성하는 세포 클론 주변에만 후광 형태로 형광 신호가 나타납니다. CellCelector 소프트웨어는 고생산성 클론을 선별하기 위해 명시야로 보이는 세포 콜로니의 크기와 세포 콜로니 주변의 형광 후광 크기를 비교하여 각 클론의 항체 생산성을 계산합니다. 따라서 여러 플레이트에서 채취한 세포 클론의 항체 생산성 순위를 결정할 수 있습니다.

(A-C)는 하이브리도마 클론(밝은 청색)과 형광 색소로 라벨링된 이차 항체(황색 동그라미가 달린 녹색)로 검출한 분비 항체(어두운 청색)를 나타내는 도식입니다.

(D-F)는 형광색소로 라벨링한 이차 항체와 함께 배양한 하이브리도마 클론의 현미경 사진(명시야와 형광 발광 오버레이)입니다.

항체 생산 강도와 콜로니 주변에 나타난 형광 후광 지름 사이에는 상관관계가 존재합니다. (A, D)는 항체를 생산하지 않는 콜로니, (B, E)는 중간 정도의 항체를 생산하는 콜로니, (C, F)는 다량의 항체를 생성하는 고생산성 콜로니입니다. 콜로니 자체의 크기는 비슷합니다(D-F의 명시야 확대 영역 참조).

항체를 생성하는 CHO 세포 콜로니 - CellCelector의 반고체 배지 모듈을 사용한 채취 전후 QC 이미지

반고체 배지 모듈로 수확하여 96웰 도착 배지에서 배양한 CHO 세포 콜로니(수확 1일 차와 5일 차)

CellCelector를 사용한 메틸셀룰로오스 및 반고체 배지의 단일클론 콜로니 채취 기술의 장점

일회용 팁 사용

  • 일회용 플라스틱 팁을 사용합니다. 팁은 교차오염과 노즐 막힘 방지를 위해 채취 후 매번 자동으로 교체됩니다.
  • 팁 오염제거를 위한 세척 단계가 필요하지 않습니다.
  • 클론 크기에 따라 다양한 지름을 선택할 수 있습니다.

특징

  • 모든 플레이트를 스캔한 뒤 각 플레이트를 채취하는 방식으로 여러 플레이트에서 상위 클론을 선별할 수 있습니다.
  • 흡입량과 흡입 속도를 낮게 통제할 수 있어 이웃한 클론이 동시에 채취되지 않습니다.
  • 채취 과정에서 이웃한 클론의 움직임을 자동으로 검증하여 흡입 전 자동으로 모든 타깃 클론의 중심을 맞춥니다.
  • 채취 직전에 타깃 클론의 주변 영역을 자동으로 분석해 이웃한 클론과 지나치게 가까운 클론의 채취를 피합니다.
  • 사용자가 클론의 품질, 크기, 생산성 등을 기준으로 분류 및 순위 결정 전략을 정의할 수 있습니다.

고해상도 광학 기술과 지능적인 이미징 시스템

  • 타깃 클론의 단일클론 분리를 위해 작은 콜로니나 큰 클론 근처의 단일 세포를 감지합니다.
  • 콜로니 구조를 분석하고 형태 변수(구형률, 형태 등)를 정의해 의심스러운 콜로니(예: 긴 형태의 콜로니)를 채취에서 제외할 수 있습니다.
  • 품질 관리를 위한 형광 이미지(채취 전후 이미지)와 채취 중 실시간 이미지를 확인할 수 있습니다.

맞춤 구성과 유연성

  • 최대 6개의 형광 채널을 사용할 수 있고, 고객의 분야별 요건에 따라 필터 세트를 맞춤 구성할 수 있습니다.
  • 출발 플레이트와 도착 플레이트에 표준 플레이트와 맞춤형 플레이트를 모두 사용할 수 있습니다.
  • 업스트림 및 다운스트림 자동화 통합이 가능합니다.
  • 싸토리우스의 Incubator FlowBox와 통합해 장기 실험이 가능합니다.

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