단일 세포 단위의 CTC 이질성 해독
순환종양세포(CTC)는 종양에서 떨어져 나와 혈액순환에 합류한 세포입니다. 이차 부위의 미세환경에 적응하고 집락을 형성한 CTC는 종양 전이를 형성합니다. 이 전이는 종양 관련 사망의 90% 이상을 차지하는 원인입니다. 간단한 혈액 채취로 획득할 수 있는 CTC는 실시간으로 종양 간, 종양 내 이질성을 비롯한 종양 특성을 모니터링할 수 있는 '액체 생검’의 역할을 합니다. 그러나 CTC 분리와 특성분석은 기술적으로 쉽지 않습니다. 풍부한 백혈구 및 적혈구와 달리 CTC 세포의 수는 적기 때문입니다. 지금까지 CTC 분석, 농축, 분리를 위해 개발된 다양한 분석법은 일반적으로 표면 표지자 발현이나 크기, 밀도, 변형가능성 등 CTC의 특성을 사용합니다.
싸토리우스는 CTC를 농축하고 염색한 뒤 검출 및 분리하는 고유한 토털 솔루션을 제공합니다. 분리한 세포는 DNA, RNA, 단백질체 분석에 사용할 수 있습니다. 싸토리우스의 솔루션은 특수 개발된 소모품(예: CellCelector 나노웰 어레이, MagnetPick 슬라이드)과 검증된 프로토콜을 사용한 CellCelector 시스템을 바탕으로 합니다.
CellCelector를 사용한 단일 세포 CTC 분리 및 분석 공정
일반적인 CTC 분리 및 분석 공정에서 사용되는 CellCelector. *적혈구(RBC) 용해는 사용하는 농축 기술에 따라 선택 가능. **특정 농축 기술의 경우 농축 후 제자리 염색이 가능하지만, 그렇지 않은 경우 농축 장치에서 샘플을 회수한 뒤 염색을 진행해야 함.
기존 농축 기술과 완벽 호환
수많은 문헌에서 입증된 것처럼 CellCelector 플랫폼은 다양한 업스트림 농축 기술과 호환됩니다.
양성 면역자기농축(EpCAM 표면 표지자 등 사용) - 예: CellSearch®, Isoflux™, MagSweeper™
CD45 표면 표지자를 바탕으로 한 음성 백혈구(WBC) 고갈 - 예: Dynabeads™, RosetteSep™
미세유체역학 또는 필터를 사용한 무표지 분리 - 예: Parsortix™, Clearbridge™, Vortex™, ScreenCell™, RareCells™, Circulogix™ 등
CellCelector 솔루션과 소모품을 사용하면 샘플의 양을 줄이지 않고 샘플당 최대 수십만 개의 혈액세포를 처리할 수 있습니다.
농축 기술 | 참고문헌 |
|---|---|
양성 면역자기농축 | |
CellSearch® (EpCAM) | Neumann et al., 2016 |
Isoflux™ (EpCAM) | Ma et al., 2016; Cabezas-Camarero et al., 2019; Nimir et al., 2019; Ding et al., 2019 |
MagSweeper™ (EpCAM) | Lohr et al., 2014 |
Dynabeads 및 hand-held 자석 (rVAR2) | Agerbæk et al., 2018; Bang-Christensen et al., 2019 |
CD45 음성 고갈 | |
Dynabeads® CD45/Dynal® MPC®-S | Blassl et al., 2016 |
RosetteSep™ Human CD45 | Yao et al., 2014 |
크기에 따른 분리 | |
Parsortix™ | Lampignano et al., 2017; Szczerba et al., 2019; Gkountela et al., 2019; Reinhardt et al., 2019; Donato et al., 2019 |
밀도 기울기 원심분리 | |
OncoQuick™ | Heidary et al., 2014 |
CellCelector 단일 세포 분리 이전에 사용된 CTC 농축 기술과 해당하는 문헌(전체 참고문헌은 연구자료 페이지 참조).
다양한 암의 CTC 분리
| 암 종류 | 참고문헌 |
|---|---|
유방암 | Heidary et al., 2014; Schneck et al., 2015; Neumann et al., 2016; Lampignano et al., 2017; Szczerba et al., 2019; Gkountela et al., 2019; Reinhardt et al., 2019; Sprouse et al., 2019 |
전립선암 | Lohr et al., 2014; Ma et al., 2016; Nimir et al., 2019 |
결장직장암 | Adalsteinsson et al., 2013; Cabezas-Camarero et al., 2019 |
췌장암 | Kim et al., 2019 |
난소암 | Blassl et al., 2016 |
폐암 | Yao et al., 2014; Ding et al., 2019 |
뇌종양 | Agerbæk et al., 2018; Bang-Christensen et al., 2019 |
흑색종 | Sprouse et al., 2019 |
CellCelector 기술을 사용하면 어떤 종류의 암이든 액체 생검으로 순수한 단일 종양세포를 분리할 수 있습니다. 세계 일류의 암센터들은 CellCelector 시스템을 사용해 수많은 암 관련 적용분야를 발전시키고 있습니다.
CellCelector CTC 분리 플랫폼의 장점
탁월한 신뢰성
- 매우 적은 세포 손실(사멸 없음)
- 최대 100%의 단일 세포 채취 효율(공정에 따라 상이)
- 자동 채취 통제(채취/실패)
빠른 속도
- 10분 안에 20개의 단일 CTC를 채취하여 RNA 분석 및 실시간 세포 채취 기술과 호환 가능
- CTC 계수 및 분리에 샘플당 1시간 소요(농축 및 염색한 샘플 기준)
쉬운 사용
- 복잡한 샘플 준비 과정 불필요
- 사용자 친화적이고 강력한 소프트웨어
뛰어난 다용도 기능
- 개별 단일 CTC와 클러스터 분리
- 고정 세포와 생세포 분리
- 다양한 업스트림 농축 방법과 직접 호환
- 세포 형태, 병리학적 염색, 최대 6개의 형광 라벨링을 바탕으로 자동 CTC 검출
- 자동, 반자동, 수동 세포 선별 및 채취
- 개별 세포나 세포 풀 채취 가능
- 웰 플레이트, 페트리 접시, 현미경 슬라이드, PCR 플레이트/튜브, 나노웰 어레이, 맞춤형 소모품 등 대부분의 실험실 장비와 호환
다양한 다운스트림 분석 및 배양 공정과 완벽 호환
- NGS, RNAseq 등 폭넓은 단일 세포 분자 분석법과 호환
낮은 흡입 및 분주량으로 모든 단일 세포 WGA 및 qRT-PCR 키트와 매끄럽게 호환
- 도착 위치의 온도 제어(4~37°C)를 통해 RNA 변성을 방지하고 생세포 생존 촉진
- 생세포 증식을 위한 낮은 전단응력과 빠른 채취
