원형질체/식물세포 분리
애기장대(Arabidopsis thaliana)는 꽃양배추와 같은 십자화과 식물로, 작물 연구의 모델 유기체입니다. 같은 애기장대속에 속하는 평지(Brassica napus) 역시 재생에너지 연구 분야에서 중요한 모델로 주목을 받고 있습니다. 유전자코드가 알려져 있는 평지는 세대 주기가 약 6주에 불과한 성장 특성상 여러 세대를 짧은 시간 안에 연구할 수 있습니다.
여기서는 우선 식물세포를 셀룰레이스로 처리해 세포벽을 제거했습니다. 그리고 버퍼 속의 단일 세포를 CellCelector 현미경 화면상에서 위상대조, 명시야, 형광 모드로 관찰했습니다. 형광 식물세포는 자동 검출이 가능합니다.
그림 1. 스캔 맵 상세 이미지 - 형광 Arabidopsis thaliana 잎 세포와 형광을 나타내지 않는 세포를 함께 볼 수 있습니다.
CellCelector를 사용하면 단일 세포 RT-PCR을 통한 RNA 분석과 같은 다운스트림 공정에 필요한 생존성 있는 온전한 세포를 쉽게 흡입할 수 있습니다.
그림 2. CellCelector를 사용한 형광 채널의 원형질체 채취 기록 - 왼쪽: 채취 전, 오른쪽: 채취 후
그림 3. 명시야의 원형질체 채취 기록 - 왼쪽: 채취 전, 오른쪽: 채취 후
그림 4. CellCelector로 분리한 Arabidopsis thaliana 잎 세포의 gdp2에 대한 RT-PCR - 글리신 데카르복실라제(gdp)는 C4 식물에서 나타나는 광호흡 주기의 일부입니다.