뇌 오르가노이드 분화 정량화를 위한 포괄적 워크플로

최종 업데이트: 2025년 7월

개요

iPSC 유래 뇌 오르가노이드 모델의 혁신적 발전이 신경과학과 신약 개발을 변화시키고 있습니다. 하지만 여전히 도전 과제가 남아있습니다—장시간 프로토콜, 배치 간 변동성, 실시간 비파괴적 분석을 위한 제한된 도구들이 재현성과 확장성을 저해하고 있습니다.

이 애플리케이션 노트는 비침습적 생세포 이미징과 고처리량 세포 분석을 통합하여 분화 과정 전반에 걸쳐 뇌 오르가노이드를 객관적으로 모니터링하고 특성화할 수 있는 견고하고 포괄적인 워크플로우를 제시합니다.

학습 내용:

  • iPSCs로부터 40일 내에 뇌 오가노이드를 생성하는 4단계 프로토콜
  • Incucyte®와 CellCelector® 플랫폼을 사용하여 실시간으로 성장과 형태를 모니터링하는 방법
  • HTS 세포측정법(iQue®)이 시간에 따른 정량적 마커 발현 분석을 가능하게 하는 방법
  • 조기에 최적화되지 않은 오르가노이드 배치를 식별하기 위한 품질 관리 전략
  • 재현성 향상, 변동성 감소, 분화 과정 간소화를 위한 모범 사례

신경 발달을 모델링하거나, 중추신경계 치료제를 스크리닝하거나, 환자 유래 유도만능줄기세포로 작업하는 경우, 이 워크플로우는 다음을 제공합니다:

  • 실험적 일관성 향상
  • 데이터 기반 진행/중단 결정 내리기
  • 번역 연구를 위한 오르가노이드 검증 가속화

애플리케이션 노트

10 페이지

16분

 

 

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주요 포인트

  • 이 연구는 iPSC를 사용하여 뇌 오르가노이드를 생성하는 4단계, 40일 프로토콜을 설명하며, 형성, 유도, 확장 및 성숙 단계를 통합합니다.
  • Incucyte®와 CellCelector 플랫폼은 비침습적이고 실시간으로 오르가노이드의 형태, 성장 및 균일성을 분석할 수 있는 연속 및 개별 이미징을 가능하게 합니다.
  • iQue® 고처리량 세포 계측은 분화를 검증하고 조기에 최적화되지 않은 배치를 감지하기 위해 마커 발현(다능성 및 피질 계통)의 시간적 평가를 허용합니다.
  • 통합된 워크플로우는 분석 내 및 분석 간 견고성을 향상시켜, iPSC 라인과 오르가노이드 성능을 평가하기 위한 신뢰할 수 있는 기준선을 설정할 수 있게 합니다.
  • SOX2, TRB2, MAP2, TUBB3와 같은 마커의 발현은 분화 단계에 걸쳐 추적되어, 계통 진행 및 성공적인 피질 유사 발달을 확인합니다.
  • 형태학적 특징을 발달 전반에 걸쳐 포착하면 조기 개입이나 분화 종료를 지원하여 자원 낭비를 줄이고 배치의 충실도를 보장할 수 있습니다.

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