성공적인 항체 발견 프로그램은 표적 반응성 후보를 신속하게 식별하고 특성을 파악해야 합니다. 이 사례 연구는 싸토리우스의 iQue® 고처리량 스크리닝(HTS) 세포 분석 플랫폼이 표적 세포주 생성, 마우스 혈청 평가 및 하이브리도마 라이브러리 스크리닝에 어떻게 사용될 수 있는지 보여줍니다.
세포 표면 타겟 항원으로 형질전환된 클론의 신속한 평가. 높은 수준의 타겟 항원을 발현하는 건강한 클론을 선별하여 후속 하이브리도마 스크리닝의 최적 성능을 보장합니다.
타겟 항원의 높은 표면 발현을 위해 400개의 엔지니어링된 세포 클론을 스크리닝했습니다.
1시간 내에 5 x 96 웰 플레이트를 실행하고 분석했습니다.
다중 세포 기반 분석법으로 건강한 성장과 높은 수준의 표면 항원 발현을 보이는 세포주를 한 단계에서 스크리닝할 수 있습니다.
프로필 맵을 사용하여 높은 수준의 목표 항원을 발현하고 높은 세포 수로 성장한 클론을 시각화하세요.
iQue Forecyt® 소프트웨어를 사용하여 스크린 결과를 시각화했습니다. 세포는 타겟 항원을 인코딩하는 렌티바이러스로 형질전환되었고, 선택 압력 하에서 배양되어 96웰 플레이트에 분류되었습니다. 세포 성장 후, 세포 분획을 분석 플레이트로 이동시켜 iQue® 고처리량 스크리닝 세포측정 플랫폼을 사용하여 해당 항원에 특이적인 형광 표지 항체로 표면 항원 발현을 테스트했습니다. 세포 수는 세포 성장의 지표로 동시에 측정되었습니다.
프로파일 맵은 표면에 목표 항원을 고농도로 발현하는 세포가 많은 웰을 보여줍니다.
플레이트 뷰는 세포 표면의 목표 항원 발현 수준에 대한 세부 정보를 보여줍니다. 형질전환되지 않은 대조군 세포의 발현 데이터가 겹쳐져 있어 양성 클론을 쉽게 시각화할 수 있습니다.
목표 항원에 대해 고농도 항체를 생성하는 면역화된 마우스를 식별하기 위한 대규모 세포 기반 실험. 면역화된 수십 마리의 마우스 혈청을 동시에 테스트함으로써 최적의 항체 반응성을 가진 하이브리도마를 성공적으로 생성할 확률을 높입니다.
36마리의 면역화된 마우스로부터 얻은 혈청을 세포 표면 표적 항원에 대한 결합력 테스트를 진행했다.
면역화 전후의 마우스 혈청을 8배 희석하여 이중으로 테스트했다.
다중 세포 기반 분석법은 다른 항원이 아닌 표적 항원에 결합하는 혈청을 한 단계로 스크리닝할 수 있게 합니다.
열 지도를 사용하여 다른 항원이 아닌 표적 항원에 결합하는 높은 역가의 항체를 가진 마우스 혈청을 시각화합니다.
iQue Forecyt® 소프트웨어의 히트맵 기능을 사용하여 테스트 결과를 시각화했습니다. 3개의 세포주를 형광 세포 인코딩 염료로 색상 코딩한 후 혼합하여 384웰 플레이트의 웰에 분주했습니다. 각 웰에 혈청 샘플을 추가한 후 형광 검출 항체를 적용하고, 싸토리우스의 세포측정 고처리량 스크리닝(HTS) 플랫폼인 iQue®로 플레이트를 분석했습니다. 목표 항원으로 면역 처리 전후의 36마리 마우스 혈청을 8배 희석하여 2회 반복 테스트했습니다.
히트맵은 대조군 세포, 목표 항원 발현 세포, 관련되지만 무관한 항원 발현 세포에 대한 항체 결합 결과를 보여줍니다.
타겟 항원에 대한 결합은 테스트하지만 대조군 항원에는 그렇지 않은 고처리량, 다중 스크리닝. 전체 스크리닝과 데이터 분석은 하루 만에 완료되었습니다.
2마리의 면역화된 마우스로부터 9,600개의 하이브리도마 클론 스크리닝.
25 x 384 웰 플레이트를 1일 내에 실행 및 분석.
다중 세포 기반 분석법은 특정 항원에는 결합하지만 다른 항원에는 결합하지 않는 항체를 한 단계로 스크리닝할 수 있게 해줍니다.
28,800개의 데이터 포인트를 즉시 결합하고 결합 지표로 처리합니다.
타겟 항원이지만 대조군 항원은 아닌 53개의 결합 부위 시각화
iQue Forecyt® 소프트웨어의 파노라마 기능을 사용하여 전체 스크리닝 결과 시각화. 형광 셀 인코더 염료로 색상 코딩된 3개의 세포 계통을 혼합하여 384 웰 플레이트의 웰에 분주했습니다. 각 웰에 하이브리도마 상층액을 추가한 후 형광 검출 항체를 추가했습니다. 타겟 항원을 발현하는 세포로 면역된 2마리의 서로 다른 마우스로부터 9,600개의 하이브리도마를 검사했습니다. 전체 스크리닝은 1일 만에 완료되었습니다.
열 지도(빨간색)는 대조군 세포, 표적 항원 발현 세포, 관련 없는 항원 발현 세포에 대한 항체 결합 결과를 보여줍니다.
프로필 지도(파란색)는 세 가지 세포 유형에 대한 결합 결과를 결합하여, 대조군 세포나 무관한 항원 발현 세포가 아닌 표적 항원 발현 세포에 결합하는 항체를 보여줍니다.
iQue Forecyt® 소프트웨어의 프로필 맵 기능을 사용하여 원하는 특성을 가진 항체 클론 선택
싸토리우스의 고처리량 스크리닝(HTS) 세포 분석 플랫폼을 다양한 단계에서 어떻게 과학자들과 모디퀘스트 연구팀이 통합했는지 알아보세요
이 전자책 모음집은 항체 스크리닝 전략을 포함한 항체 개발 워크플로우의 중요한 발전과 응용에 중점을 둡니다...
신약 개발 과정에서 결합 메커니즘과 안정성에 대한 심층적인 이해를 확립하는 것은 생체분자 결합 상호작용을 완전히 이해하는 데 필수적입니다.
리드 선택에 있어 친화성 상수(KD)와 결합 및 해리 속도(ka, kd)를 평가하는 것이 중요합니다. 유사한 친화성을 가진 약물도 다양한 결합 메커니즘과 동역학을 나타낼 수 있기 때문입니다. Octet® 레이블 프리 분석법은 생체분자의 친화성과 동역학을 실시간으로 특성화하는 데 귀중한 도구입니다.
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선도물질 선택 및 정제 과정은 특정 요구사항을 충족하고 개발 워크플로우의 다음 단계로 진행될 수 있는 분자를 식별하는 데 중요한 역할을 합니다. 바이오의약품의 경우, 선도물질 선택은 원하는 기능적, 생물리학적 특성을 가진 생물학적 분자를 선별하는 것을 포함하며, 최적화는 이러한 특성을 향상시키는 데 도움을 줍니다.
라벨 프리 분석법은 이러한 과정의 속도와 효율성을 개선합니다. 바이오센서 분석은 고처리량이며 친화력 순위 결정, 대규모 항체 풀의 에피토프 분류, Fc-수용체 결합, 당화 스크리닝, 항체-항원 특이성, 결합 특성 분석, 역가 분석 등 다양한 응용 분야에 쉽게 개발될 수 있습니다.
싸토리우스 Octet® BLI 플랫폼은 바이오의약품 개발의 효율성과 품질을 개선할 수 있는 다양한 분석 기능을 제공합니다. 이러한 기능에는 세포주 개발 중 샘플 스크리닝, 생물반응기의 제품 역가 모니터링, 친화성 수지의 동적 결합 능력 측정, 정제된 제품 특성 분석 등이 포함됩니다. 또한, 싸토리우스 Octet® BLI 플랫폼은 기존의 효소 결합 면역흡착 분석법(ELISA)보다 더 높은 정밀도와 견고성으로 숙주 세포 단백질(HCP)과 잔류 단백질 A(RPA)와 같은 잠재적인 공정 생성 오염물질을 신속하게 감지하고 모니터링할 수 있습니다.
약물 개발 워크플로우를 단순화하고 결과 도출 시간을 줄임으로써, 높은 품질과 안전 기준을 유지하면서 바이오의약품 생산 중 비용을 최소화합니다.
프레드 허치 암 센터의 연구자들은 iQue® 마우스 IgG 유형 및 역가 분석 키트를 활용하여 항체 발견 워크플로우를 간소화했습니다...
이 전자책은 현재 항체 스크리닝 도구에 대한 유용한 통찰력을 제공하고 새로운 b... 개발 연구자들을 어떻게 도울 수 있는지 강조하는 기사들을 담고 있습니다.
iQue® 3 고처리량 스크리닝 세포 분석 플랫폼은 연구자들이 고함량, 다중 분석 실험을 획득하고 분석할 수 있게 해줍니다.
복잡한 세포 연구 문제를 단일 웰에서 다중 분석을 통해 연구를 가속화하세요.
실시간, 레이블-프리 분석을 통해 동역학, 친화성 및 항체/단백질 정량을 결정할 수 있습니다.
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