항체 스크리닝

성공적인 항체 발견 프로그램은 표적 반응성 후보를 신속하게 식별하고 특성화해야 합니다. 이 사례 연구는 Cytometry Platform을 통한 iQue® High-Throughput Screening(HTS)이 표적 세포주 생성, 마우스 혈청 평가 및 하이브리도마 라이브러리 스크리닝에 어떻게 사용될 수 있는지 보여줍니다.

항체 스크리닝 애플리케이션

세포 표면 표적 항원으로 형질감염된 클론을 신속하게 평가합니다. 높은 수준의 표적 항원을 발현하는 건강한 클론을 선택하면 다운스트림 하이브리도마 스크리닝에서 최적의 성능이 보장됩니다.

생산성 향상

400개의 조작된 세포 클론이 표적 항원의 높은 표면 발현을 위해 스크리닝되었습니다.

5 x 96 웰 플레이트를 1시간 안에 실행하고 분석했습니다.

강력한 다중 스크리닝 분석

다중 세포 기반 분석을 통해 건강한 성장이 있고 높은 수준의 표면 항원을 발현하는 세포주에 대한 단일 단계 스크리닝이 가능합니다.

빠르고 쉬운 결과 시각화

프로필 맵을 사용하면 높은 수준의 표적 항원을 발현하고 높은 세포 수로 성장한 클론을 시각화할 수 있습니다.

표적 세포주 생성을 위한 화면 결과 시각화

iQue Forecyt® 소프트웨어를 사용하여 시각화한 화면 결과. 세포를 표적 항원을 코딩하는 렌티바이러스로 형질도입하고, 선택 압력 하에 배양하고, 96웰 플레이트에 분류했습니다. 세포 성장 후, 세포의 분취량을 분석 플레이트로 옮기고 iQue® 고처리량 스크리닝 세포측정 플랫폼을 사용하여 해당 항원에 특이적인 형광 태그가 지정된 항체를 사용하여 표면 항원 발현을 테스트했습니다. 세포 성장의 지표로서 세포수를 동시에 측정하였다.

프로필 맵은 표면에 높은 수준의 표적 항원을 발현하는 많은 수의 세포를 포함하는 웰을 보여줍니다.

플레이트 뷰는 세포 표면의 표적 항원 발현 수준에 대한 세부 정보를 보여줍니다. 형질감염되지 않은 대조 세포의 발현 데이터가 중첩되어 양성 클론을 쉽게 시각화합니다.

표적 항원에 대해 높은 수준의 항체를 생성하는 면역화된 마우스를 확인하기 위한 대규모 세포 기반 실험입니다. 수십 마리의 면역화된 마우스의 혈청을 동시에 테스트하면 최적의 항체 반응성을 갖는 하이브리도마를 성공적으로 생성할 가능성이 높아집니다.

생산성 향상

36마리의 면역화된 마우스의 혈청을 사용하여 세포 표면 표적 항원에 대한 결합을 테스트했습니다.

면역화 전 및 면역화 후 마우스의 혈청을 8배 희석하여 이중으로 테스트했습니다.

강력한 다중 스크리닝 분석

다중 세포 기반 분석을 사용하면 표적 항원에는 결합하지만 다른 항원에는 결합하지 않는 혈청에 대한 단일 단계 스크리닝이 가능합니다.

빠르고 쉬운 결과 시각화

히트 맵을 사용하여 표적 항원에는 결합하지만 다른 항원에는 결합하지 않는 항체 역가가 높은 마우스 혈청을 시각화합니다.

마우스 혈청 평가를 위한 화면 결과 시각화

iQue Forecyt® 소프트웨어의 HeatMap 기능을 사용하여 시각화된 테스트 결과입니다. 3개의 세포주를 형광성 세포 인코딩 염료로 색상 코딩하고 함께 혼합한 후 384웰 플레이트의 웰에 분배했습니다. 혈청 샘플을 각 웰에 첨가한 후 형광 검출 항체를 첨가하고 Cytometry Platform의 iQue® High-Throughput Screening(HTS)을 사용하여 플레이트를 분석했습니다. 표적 항원을 이용한 면역화 전 및 면역화 후 36마리 마우스의 혈청을 8배 희석하여 이중으로 테스트했습니다.

히트맵은 대조 세포, 표적 항원을 발현하는 세포 및 관련이 있지만 관련이 없는 항원을 발현하는 세포에 결합하는 항체에 대한 결과를 보여줍니다.

대조 항원이 아닌 표적 항원에 대한 결합을 동시에 테스트하는 높은 처리량의 다중 스크린입니다. 전체 화면과 데이터 분석이 하루 만에 완료되었습니다.

생산성 향상

2마리의 서로 다른 면역화된 마우스로부터 스크리닝된 9600개의 하이브리도마 클론.

25 x 384 웰 플레이트를 하루 만에 실행하고 분석했습니다.

강력한 다중 스크리닝 분석

다중 세포 기반 분석을 사용하면 표적 항원에는 결합하지만 다른 항원에는 결합하지 않는 항체에 대한 단일 단계 스크리닝이 가능합니다.

빠르고 쉬운 결과 시각화

28,800개의 데이터 포인트가 즉시 결합되어 바인딩 지표로 처리됩니다.

표적에는 결합하지만 대조 항원에는 결합하지 않는 53개의 히트가 시각화되었습니다.

하이브리도마 라이브러리 스크리닝을 위한 스크리닝 결과 시각화

iQue Forecyt® 소프트웨어의 파노라마 기능을 사용하여 시각화된 전체 화면의 결과입니다. 3개의 세포주를 함께 혼합한 형광성 Cell Encoder 염료로 색상 코딩하고 384웰 플레이트의 웰에 분배했습니다. 하이브리도마 상층액을 각 웰에 첨가한 후 형광 검출 항체를 첨가했습니다. 표적 항원을 발현하는 세포로 면역화된 2마리의 서로 다른 마우스로부터 9,600개의 하이브리도마를 테스트했습니다. 전체 화면이 하루 만에 완성되었습니다.

대조 세포, 표적 항원을 발현하는 세포 및 관련이 있지만 관련이 없는 항원을 발현하는 세포에 대한 항체 결합 결과를 보여주는 히트 맵(빨간색).

프로필 맵(파란색)은 세 가지 세포 유형에 대한 결합 결과를 결합하여 표적 항원을 발현하는 세포에는 결합하지만 관련 없는 항원을 발현하는 세포나 음성 대조군 세포에는 결합하지 않는 항체를 보여줍니다.

항체 스크리닝을 위한 리소스

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iQue® 세포 계측법 플랫폼을 통한 고처리량 스크리닝(HTS) 장점

iQue Forecyt® 소프트웨어의 프로필 맵 기능을 사용하여 원하는 특성을 가진 항체 클론을 선택합니다.

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과학자들과 ModiQuest Research가 여러 단계의 세포 측정 플랫폼을 통해 iQue® High-Throughput Screening(HTS)을 어떻게 통합했는지 알아보세요.

eBook: 치료용 항체 발견

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라벨 없는 분석은 이러한 프로세스의 속도와 효율성을 향상시킵니다. 바이오센서 분석은 처리량이 높으며 친화성 순위, 대규모 항체 풀의 에피토프 비닝, Fc 수용체 결합, 글리코실화 스크리닝, 항체-항원 특이성, 결합 특성화 및 역가 분석과 같은 다양한 응용 분야를 위해 쉽게 개발될 수 있습니다.

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자료

마우스 IgG TNT Fred Hutch 애플리케이션 노트

Fred Hutch 암 센터의 연구원들은 iQue® 마우스 IgG 유형 및 역가 분석 키트를 활용하여 항체 발견 워크플로우를 간소화했습니다.

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iQue® 고처리량 세포 계측법 플랫폼 브로셔

iQue® 고처리량 스크리닝 세포측정 플랫폼을 사용하면 연구자는 높은 함량의 다중 분석을 획득하고 분석할 수 있습니다.

주요 제품

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iQue® HTS by Cytometry 플랫폼

단일 웰의 다중 분석을 통해 복잡한 세포 연구 문제를 해결하여 연구를 가속화하십시오.

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