HTS 세포 현미경을 이용한 세포 수 및 생존율 측정

세포 수 및 생존율

세포 계수는 생명과학부터 의료 진단에 이르기까지 많은 실험 워크플로우에서 일상적으로 사용되는 표준 실험실 절차입니다. 생존율과 결합된 세포 계수 평가는 세포 건강을 특성화하는 중요한 단계입니다. 세포 수 및 생존율 정보는 증식률 모니터링, 성장 조건 최적화, 추가 연구를 위한 세포 데이터 정규화에 사용될 수 있습니다.

최적의 결과를 얻기 위해서는 정확하고 반복 가능한 세포 수 및 세포 생존율이 필수적입니다. 세포 수와 생존율을 측정하는 기존 방법은 처리량이 낮고, 선형성이 부족하며, 생세포 분석의 재현성과 정확성에 필요한 적절한 이벤트 샘플링을 제공하지 않는 시간이 많이 소요되는 프로세스입니다.

iQue® 세포 계수 및 생존력 키트는 96 및 384 웰 플레이트에서 넓은 선형 범위에 걸쳐 정확성을 제공하며, 세포 희석 없이 간소화된 워크플로우로 다양한 부착되지 않은 세포주의 절대 세포 계수 및 생존력 데이터를 재현성 있게 분석할 수 있습니다. 효율적이고 정확하게 세포 계수 및 생존력을 정량화하세요.

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분석 개념

iQue^® 세포 수 및 생존율 키트 분석 개념

정량적 세포 수 및 생존율 분석을 위해 설계된 이 분석법은 BR 및 VBR 구성으로 iQue^® HTS 플랫폼에서 실행하도록 최적화되어 있으며, 고처리량 샘플링 및 유세포 분석 검출 기능을 결합합니다. 간소화된 세포 표지에서 분석까지의 워크플로우를 통해 다양한 부착되지 않은 세포주에서 넓은 선형 범위에 걸쳐 절대 세포 수와 생존율을 빠르게 분석할 수 있습니다.

이 키트에는 게이팅 전략 및 분석을 위한 검증된 시약과 사전 설정된 템플릿이 포함되어 있습니다. 고객이 제공한 세포를 사용하여, 키트는 생존 세포를 식별하고 빠른 세척 불필요 분석법으로 샘플 밀도를 결정합니다.

기본 분석 워크플로:

희석되지 않은 세포를 생존성 염료와 1:1로 혼합하고 10-30분간 배양합니다
계수 비즈를 웰에 추가합니다
iQue^® HTS 플랫폼에서 플레이트 분석 (BR 및 VBR 구성)

생물학적 워크플로우의 정확성과 재현성 향상

다중 세포 계수 및 생존력 평가를 통한 강력한 실험 결과 보장

그림 1. 넓은 범위에 걸친 재현 가능하고 정확한 생존율 및 세포 수

성장하는 세포와 열로 사멸된 세포(Jurkat, Raji 또는 Ramos 세포주)의 혼합물을 다양한 비율로 테스트하여 민감도 범위 전체에 걸쳐 선형 상관관계를 확인했습니다.

Jurkat 세포의 다양한 밀도를 세포 계수의 선형 범위를 결정하기 위해 비교했습니다. 미희석 세포는 8x10⁴부터 2x10⁷ 세포/ml의 밀도 범위에서 신뢰성 있게 측정되었습니다.

96 또는 384웰 플레이트에서 넓은 선형 범위에 걸쳐 세포 생존력을 정량화하고 효율적으로 계수

그림 2. 히트 및 프로필 맵은 실행 가능한 데이터로 이어집니다

희석 한계 클로닝은 96웰 플레이트에 CHO-S 세포의 제한된 희석을 플레이팅하여 수행되었습니다. 세포는 궤도 진탕기에서 37°C, 5% 습도로 배양되었습니다. 외부 웰은 에지 효과를 방지하기 위해 배지만 포함되었습니다. 세포 밀도와 생존율은 iQue^® 세포 계수 및 생존율 키트를 사용하여 결정되었습니다. 프로필 맵은 여러 기준을 충족하는 웰을 강조하기 위해 생성되었습니다 [(세포 밀도 > 0.3백만 세포/ml) AND (생존율 > 75%)]. 프로필 맵의 각 지표는 그래프 상단의 슬라이더 바를 드래그하거나 우클릭하여 편집할 수 있으며, '히트' 맵이 자동으로 업데이트됩니다. 히트는 히트 선택 또는 기타 후속 분석을 위해 CSV 파일로 내보낼 수 있습니다.

세포 밀도의 히트맵

생존율의 히트맵

높은 밀도와 생존율에 일치하는 히트를 보여주는 프로필 맵