인큐사이트® 라이브 세포 분석을 위한 주화성 분석

암 종양학 보충자료 읽기

화학주성 세포 이동 및 침습

세포 이동은 기본적인 생물학적 과정이며 인간 발달, 면역 반응 및 종양 전이와 같은 질병의 중요한 구성 요소입니다. 정상적이고 건강한 상태에서 세포의 이동 능력은 엄격하게 조절됩니다 - 예를 들어, 손상된 조직에서 분비되는 케모카인에 대한 백혈구의 지향성 세포 이동(화학주성)은 염증 반응에서 핵심적인 역할을 합니다. 반대로, 조절되지 않은 세포 이동과 침습은 암과 같은 질병의 특징으로, 전이성 세포가 원발 종양에서 벗어나 유기체의 다른 부위에 2차 종양을 형성합니다.

세포의 주화성 측정은 질병 진행과 면역 반응을 이해하는 데 필수적인 구성 요소입니다. 그러나 현재 분석 방법에는 단점이 있습니다. 트랜스웰과 같은 기존 주화성 세포 기반 분석의 일반적인 제한 사항은 다음과 같습니다:

  • 실시간으로 세포의 이동 또는 침습 형태를 시각화할 수 없음
  • 고정, 염색 또는 세포 긁어내기 단계가 필요한 번거로운 프로토콜로 인한 낮은 처리량
  • 많은 수의 세포 요구
  • 통합된 세포 운동 운동학적 측정의 부족

Incucyte® 주화성 세포 이동 및 침습 분석은 광학적으로 투명하고 통합된 소프트웨어를 갖춘 이미지 기반 솔루션으로, 활성 세포 운동성의 지속적인 시각화 및 재현 가능한 분석을 제공합니다. 이전에는 볼 수 없었던 실험의 모든 세포를 모니터링하세요!

     

Incucyte® 생세포 이미징 및 분석 장비 탐색 

지금 구매 - 주행성 분석 소프트웨어 및 분석 제품 

주행성 솔루션

Incucyte® 주행성 세포 이동 및 침습 분석 개요

Incucyte® Clearview 96-웰 플레이트를 사용하여 동적 세포 이동을 추적하고 정량화하세요. 광학적으로 투명한 표면은 세포 이동의 비침습적 시각화 및 라벨 없는 분석을 가능하게 합니다. Incucyte® Clearview 96-웰 플레이트는 Incucyte® 생세포 분석 시스템과 함께 사용하도록 검증되었으며 Incucyte® 주행성 분석 소프트웨어 모듈이 필요합니다.

Incucyte® 클리어뷰 96-웰 플레이트는 화학주성 분석을 최적화하도록 특별히 설계되었으며, 지름 8 µm의 96개 레이저 에칭 구멍을 포함합니다. 세포는 상부 챔버에 추가되고 주화성 유도체는 하부 저장 플레이트에 추가됩니다. Incucyte® 클리어뷰 96-웰 플레이트의 설계는 72시간 동안 안정적인 화학주성 구배를 보장하며, 귀중하고 희귀한 샘플이 필요한 실험에 이상적인 웰당 1,000-5,000개의 세포만 필요로 합니다. 화학주성은 세포가 배양기의 생리학적으로 관련된 환경에 머무는 동안 시각적으로 모니터링됩니다.

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Incucyte® 주화성 분석 소프트웨어 모듈

Incucyte® 96-웰 클리어뷰 플레이트의 각 웰 내 모든 세포의 세포 형태를 정성적으로 모니터링하면서 형광 표지 및 비표지 주화성 세포 이동 또는 침습을 분석합니다.

제품 번호 9600-0015

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싸토리우스의 생세포 이미징 및 분석

Incucyte® 실시간 세포 분석 시스템을 사용하면 라벨 없거나 형광 표지된 주화성 세포 이동, 침습 및 혈관내피 통과 이동을 실시간으로 시각화하고 정량화할 수 있습니다. 시간 경과 이미징과 정량적 데이터는 배양 중에 자동으로 생성되어 생리학적으로 관련된 환경에서 주화성의 시간 경과에 대한 강력한 통찰력을 제공합니다. 이 장비는 Incucyte® Clearview 96웰 플레이트 및 Incucyte® 주화성 분석 소프트웨어 모듈과 함께 종료 시점 측정에 대한 강력한 대안과 주화성에 대한 더 나은 이해를 제공합니다.

Incucyte® 장비 탐색

Incucyte® 주화성 세포 이동 및 침습 분석의 주요 장점

빠르게 답변 얻기

실험의 모든 세포에 대해 완전 자동화된 분석으로 실시간 세포 이동 또는 침범을 정량화하고 시각화하기

강력하고 재현 가능한 분석

Incucyte® Clearview 플레이트를 사용하여 스크리닝에 적합한 고도로 재현 가능한 96웰 동역학 분석 수행

귀중한 세포 보존

최적화된 공극 밀도와 안정적인 경사로 희귀하거나 고가의 세포에 이상적인 세포 요구량 감소

더 깊은 생물학적 통찰

이동 및 침습에 대한 치료 효과를 조사하고 경내피 이동에 관여하는 경로 특성 규명

화학주성 세포 이동 및 침습 분석을 위한 예시 데이터

완전 자동화된 분석으로 실시간 세포 이동 시각화

실험의 모든 세포를 모니터링하고, 위상차 및/또는 형광 이미징을 사용하여 이미지와 동영상에서 형태학을 평가하고 표현형 통찰력을 얻으세요. 동영상 1. HT-1080 주화성의 실시간 정량적 분석. FBS를 향한 HT-1080 세포의 주화성 이동을, Incucyte® Clearview 96-well 플레이트에서 시각화했습니다. 통합된 Incucyte® 주화성 분석 소프트웨어는 세포가 구멍을 통과하고 막의 아래쪽에 부착되는 것을 실시간으로 정량화할 수 있게 해줍니다. 더 많은 동영상 보기:

96웰 키네틱 분석을 재현 가능하게 수행

선택한 세포 모델 - 이동, 침습 또는 경내피 이동 - 을 사용하여 Incucyte® Clearview 플레이트로 고도로 재현 가능한 96웰 키네틱 분석을 수행하세요.

최적화된 기공 밀도와 안정적인 경사를 통한 세포 요구사항 감소

Incucyte® Clearview 96-well 플레이트와 변형된 보이든 챔버의 세포 사용량 비교. Jurkat T 세포의 SDF-1α에 대한 주화성을 두 시스템에서 측정 (2,000~20,000 세포/웰). 그러나 변형된 보이든 플레이트에서는 신호가 관찰되지 않았습니다. 보이든 시스템을 사용하여 주화성 이동을 관찰하려면 최소 150,000 세포/웰이 필요했습니다.


(A) 10,000 kDA 덱스트란, Alexa Fluor® 594로 표지된 것을 농도 10 µM로 Incucyte® Clearview 96-웰 플레이트와 96-웰 변형 보이든-챔버의 저장소 플레이트에 추가하여 농도 구배를 형성했습니다. 농도 구배의 안정성을 0, 4, 8, 24, 48, 72시간에 측정했습니다(N=3 웰). 4시간 후, 변형된 보이든-챔버에서는 농도 구배가 빠르게 감소하는 반면, Incucyte® Clearview 플레이트는 72시간 동안 선형 구배를 유지합니다. (B) FBS 농도 구배를 72, 48, 24, 0시간에 별도의 웰에 형성했습니다. 혈청 기아 상태의 Incucyte® Nuclight Red HT-1080 세포를 형성된 구배에 추가하고 FBS 유도 주화성 반응을 측정했습니다. 각 데이터 포인트는 평균 ± 표준오차, N=3을 나타냅니다.


이동 및 침습에 대한 처리 효과 조사

침습 억제 및 경내피 이동과 관련된 경로를 특성화하는 스크린 처리 효과.

. AMD3100 (A), BIRT377 (C) 및 ICAM-1 중화 (D)에 의한 CXCL12 (SDF-1α) 유도 T 세포 이동 억제. AMD3100의 약리학적 반응 분석 (B). 내피층을 통한 이동은 ICAM-1에 적어도 부분적으로 의존적이었으며, ICAM-1 중화 항체와 LFA-1의 알로스테릭 억제제인 BIRT 377로 처리하면 T 세포의 SDF-1α 매개 유출을 크게 억제했습니다.

Incucyte® 고해상도 이미지는 Incucyte® Nuclight HT-1080 섬유육종 세포가 2D 기질을 가로지르고 혈청 농도 구배에 반응하여 3D 기저막 추출물(BME) 바이오매트릭스를 통해 침윤하는 모습을 보여줍니다 - 세포외 기질(ECM)로 뻗어나가는 차별적인 형태와 침윤성 섬유족 돌기에 주목하세요. 시간 경과 그래프는 세포의 BME 매트릭스를 통한 침윤이 이동보다 느리며, 침윤은 이동과 달리 매트릭스 메탈로프로테아제 억제제인 GM6001에 의해 농도 의존적으로 억제됨을 보여줍니다.


주화성 분석 기술 자료

주요 자료

eBook: Live-Cell Analysis 6th Edition Handbook

6판 라이브 세포 분석 핸드북

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세포 이동 및 전이의 분자적 기반 조사

보충 자료 읽기

제품 리소스

Brochure: Incucyte® — Reagents, Consumables and Software
브로셔

Incucyte® — 시약, 소모품 및 소프트웨어

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Incucyte® 화학주성 세포 이동 분석 프로토콜

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상세 Incucyte® 화학주성 세포 침습 분석 프로토콜

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Incucyte® 화학주성 경내피 이동 분석 프로토콜

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분화된 THP-1 인큐사이트® 주화성 마이그레이션 프로토콜

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상세 T 세포 인큐사이트® 혈관내피 횡단 주화성 프로토콜

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인큐사이트 대식세포 주화성 분석 프로토콜 설명서

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주르캇 세포용 상세 인큐사이트 주화성 분석 프로토콜 매뉴얼

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화학주성 자주 묻는 질문

Incucyte® 스크래치 상처 분석은 화학주성 농도 구배가 없는 세포 자유 영역으로의 세포 이동을 측정합니다. Incucyte® 상처 메이커 도구를 사용하여 각 웰에 정확한 상처를 만들고 세포가 기질을 가로질러 이동하거나(이동) 3D 젤 매트릭스를 통해 이동하는 상처 폐쇄를 모니터링할 수 있습니다.

Incucyte® 화학주성 분석법은 화학주성 농도 구배에 대한 세포의 방향성 있는 이동을 측정합니다. Incucyte® 생세포 분석 시스템을 사용하여 처리 효과가 화학주성 프로파일에 미치는 영향을 조사할 수 있습니다. 이 시스템은 부착성 및 비부착성 세포에 적합합니다.


아니요. 기존 Boyden 챔버의 멤브레인 표면 광학 품질은 Incucyte® 이미징 또는 이미지 처리 알고리즘에 적합하지 않습니다.


아니오. Incucyte® Clearview 세포 이동 삽입물은 Incucyte® Clearview 저장 플레이트와 함께 작동하도록 특별히 설계되었습니다.


2015A Rev 1 이상. Incucyte® 주화성 분석 소프트웨어 모듈은 이전 소프트웨어 버전과 호환되지 않습니다. 소프트웨어 업그레이드를 원하시면 판매처 담당자에게 연락해 주세요.


예. Incucyte® Clearview 세포 이동 플레이트는 비부착성 세포 유형에 대해 광범위하게 검증되었습니다. 파종 후 각 웰 내에서 균일한 세포 침전을 보장하기 위해, 플레이트를 파종 후 45-60분 동안 실온에 두는 것을 권장합니다. 화학주성(상단만) '분석 작업 유형'은 비부착성 세포 이동을 정량화하는 데 권장됩니다.


최적화할 주요 변수에는 막 코팅, 분석 배지 및 세포 밀도가 포함됩니다. 암세포, 혈관 세포 및 백혈구를 포함한 다양한 세포 유형에 대한 권장 실험 조건은 분석 프로토콜에서 찾을 수 있습니다.


네. 상부 및 하부 멤브레인 표면을 독립적으로 또는 함께 코팅할 수 있습니다. 권장 용량은 멤브레인 상단에 20 μL, 하단에 150 μL입니다.


네. 이미지 분석 후 인접한 세포를 개별 객체로 구분할 수 있도록 핵 제한 형광 색소(세포질과 대조적으로)를 사용하는 것을 권장합니다. 형광 색소의 여기 및 방출 스펙트럼은 Incucyte® 형광 채널과 호환되어야 합니다.


예. 형광 프로브로 다른 세포 유형에 라벨을 지정하고 Incucyte® 생세포 분석 시스템의 위상, 녹색, 빨간색, 주황색 또는 근적외선 빨간색 데이터 획득 채널을 사용하면 공동 배양에서 둘 이상의 세포 유형의 주화성을 정량화할 수 있습니다.


예. Incucyte® 생세포 분석 시스템은 분석 중에 세포를 방해하지 않습니다. 실험이 완료되면 추가 분석을 수행하기 위해 우물에서 배지를 간단히 제거할 수 있습니다.


네. 사용하지 않은 이미징 채널을 사용하여 세포 건강의 다중 측정을 수행할 수 있습니다. Incucyte® 생세포 분석 시스템은 HD 위상차 및 녹색, 빨간색, 주황색, 근적외선 형광 자동 이미징 모드를 지원합니다.


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