화학주성 세포 이동 및 침입

Incucyte^® 96웰 클리어뷰 플레이트의 각 웰에 있는 모든 세포의 형태를 정성적으로 관찰하면서, 라벨이 없는 세포 이동 또는 형광 라벨이 부착된 세포 이동 또는 침입을 분석합니다.

제품 번호: 9600-0015

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Incucyte^® 라이브 셀 분석 시스템을 사용하면 배양기 내에서 실시간으로 라벨이 없거나 형광 라벨이 부착된 화학주성 세포의 이동, 침윤 및 내피세포 투과 이동을 시각화하고 정량화할 수 있습니다. 배양 과정 동안 타임랩스 이미징과 정량적 데이터가 자동으로 생성되어 생리학적으로 적합한 환경에서 화학주성의 시간 경과에 대한 심층적인 정보를 제공합니다. 이 장비는 Incucyte^® 클리어뷰 96웰 플레이트 및 Incucyte^® 화학주성 분석 소프트웨어 모듈과 함께 사용하면 최종 시점 측정에 대한 강력한 대안을 제공하고 화학주성을 더 잘 이해할 수 있도록 도와줍니다.

Incucyte^® 기기를 살펴보세요

Monitor every cell in your experiment, assess morphology and gain phenotypic insight from images and movies using phase contrast and/or fluorescent imaging.

Movie 1.  Real-time quantitative analysis of HT-1080 chemotaxis. Chemotactic migration of HT-1080 cells toward FBS, visualized on an Incucyte^® Clearview 96-well Plate. Integrated Incucyte^® Chemotaxis Analysis Software allows for real-time quantification of cells as they move through pores and adhere to the bottom side of the membrane.

Watch more movies: 

• IL-8에 대한 호중구 이동
• VEGF에 대한 HUVEC의 이동
• HT-1080 세포의 FBS 방향으로의 화학주성 침윤 

Incucyte^® Clearview 플레이트를 사용하면 세포 이동, 침윤 또는 내피세포 투과 이동과 같은 원하는 세포 모델을 사용하여 재현성이 매우 높은 96웰 동역학 분석을 수행할 수 있습니다.

Incucyte^® Clearview 96웰 플레이트와 변형된 보이든 챔버의 세포 사용량을 비교했습니다. 두 시스템 모두에서 Jurkat T 세포의 SDF-1α에 대한 화학주성을 측정했습니다(웰당 2,000~20,000개 세포). 그러나 변형된 보이든 플레이트에서는 신호가 관찰되지 않았습니다. 보이든 시스템을 사용하여 화학주성 이동을 관찰하려면 최소 웰당 150,000개의 세포가 필요했습니다.

그림 3. Incucyte^® 화학주성 분석법 기울기 평가.(A) 10,000 kDA dextran, labeled with Alexa Fluor^® 594 was added to the reservoir plates of an Incucyte^® Clearview 96-well Plate and a 96-well modified Boyden-chamber at a concentration of 10 µM to establish a gradient. Gradient stability was measured at 0, 4,8, 24, 48 and 72 hours (N=3 wells). After 4 hours, a rapid loss in gradient is measure in the modified Boyden-chamber, whereas the Incucyte^® Clearview Plate maintains a linear gradient over 72 hours. (B) An FBS gradient was established over 72, 48, 24 and t=0hours in separate wells. Serum starved Incucyte^® Nuclight Red HT-1080 cells were added to the established gradients and FBS-induced chemotactic response was measured. Each data point represents mean ± SEM, N=3.

세포 침윤 억제에 대한 치료 효과를 스크리닝하고, 혈관내피세포 투과 이동에 관여하는 경로를 규명한다.

AMD3100(A), BIRT377(C) 및 ICAM-1 중화제(D)에 의한 CXCL12(SDF-1α) 유도 T 세포 이동 억제. AMD3100의 약리학적 반응 분석(B). 내피층을 통한 이동은 적어도 부분적으로 ICAM-1에 의존적이라는 것이 밝혀졌는데, ICAM-1 중화 항체와 LFA-1의 알로스테릭 억제제인 BIRT 377 처리가 SDF-1α 매개 T 세포 혈관외 유출을 유의하게 억제했기 때문이다.

Incucyte^®의 고해상도 이미지는 혈청 농도 구배에 반응하여 2차원 기질을 가로질러 이동하고 3차원 기저막 추출물(BME) 생체 매트릭스를 침윤하는 Incucyte^® Nuclight HT-1080 섬유육종 세포를 보여줍니다. 세포 형태가 다르고 세포외 기질(ECM)로 뻗어 나가는 침윤성 필로포디아 유사 돌기가 관찰됩니다. 시간 경과 그래프는 BME 매트릭스를 통한 세포 침윤이 이동보다 느리며, 침윤은 기질 금속단백분해효소 억제제인 GM6001에 의해 농도 의존적으로 억제되지만 이동은 억제되지 않음을 보여줍니다.