하이브리도마 및 CHO 클론 선별

항체 생산을 위한 고발현 클론의 선별 및 분리

항체 생산을 위한 새로운 세포주 개발의 핵심 단계는 목표 단백질을 높은 수준으로 안정적으로 생산하는 단일 세포 유래 클론을 식별하는 것입니다. 기존 기술의 시간 소모적이고 노동 집약적인 단계와 비교하여, CellCelector를 이용한 생산성 스크리닝은 훨씬 효율적으로 수행할 수 있습니다.

고생산성 클론의 선별 및 분리

하이브리도마 클론의 항체 생성량은 클론마다 크게 다를 수 있습니다. 클론에서 생성되어 배양액으로 분비되는 단백질은 형광 표지된 이차 항체를 이용하여 시각화할 수 있습니다. 반고체 배양액의 점성 때문에 항체가 배양액 내부로 더 이상 확산되지 못하므로, 항체를 생성한 세포 클론 주변에 형광 후광이 나타납니다. 항체 생성량이 높은 클론을 선별하기 위해 CellCelector 소프트웨어는 명시야에서 보이는 세포 콜로니의 크기와 세포 콜로니를 둘러싼 형광 후광의 크기를 비교하여 각 클론의 항체 생산성을 계산합니다. 이를 통해 여러 배양 접시에서 최적의 항체 생산을 보이는 세포 클론의 순위를 매길 수 있습니다.

하이브리도마 클론(연한 파란색)과 형광 표지된 이차 항체(노란색 원 안에 녹색)를 이용한 분비 항체(진한 파란색) 검출의 개략도 (A-C)

형광 표지된 이차 항체와 함께 배양한 후 하이브리도마 클론의 현미경적 모습(명시야 및 형광 조명 중첩)(D-F).

항체 생성 강도는 콜로니 주변의 형광 후광 직경과 상관관계가 있습니다. 항체를 전혀 생성하지 않는 콜로니(A 및 D), 중간 정도의 항체를 생성하는 콜로니(B 및 E), 그리고 많은 양의 항체를 생성하는 콜로니(C 및 F)가 관찰되었습니다. 콜로니의 크기는 유사합니다(명시야 관찰 D-F의 확대 영역 참조).

항체를 생산하는 CHO 세포 콜로니; CellCelector의 반고체 배지 모듈을 사용하여 항체를 선별하기 전후의 품질 관리 이미지.

반고체 배지 모듈을 사용하여 96웰 플레이트에서 배양한 CHO 세포 콜로니 (수확 후 1일 및 5일째).

메틸셀룰로오스 및 기타 반고체 배지에서 CellCelector를 이용한 단일클론 콜로니 선별의 이점

일회용 팁 사용

픽을 교체할 때 자동으로 교환되는 일회용 플라스틱 팁을 사용하면 교차 오염과 노즐 막힘을 방지할 수 있습니다.
팁 오염 제거를 위해 세척 과정이 필요하지 않습니다.
다양한 클론 크기에 맞는 다양한 직경을 사용할 수 있습니다.

특징

플레이트 배치에서 가장 높은 순위의 클론을 선별합니다. 먼저 모든 플레이트를 스캔한 다음 플레이트별로 하나씩 선택합니다.
흡입량과 속도를 낮게 조절하면 인접한 클론이 동시에 채취되는 것을 방지할 수 있습니다.
피킹 중 인접한 클론의 움직임을 자동으로 검증하여 흡입 전에 모든 목표 클론이 자동으로 중앙에 위치하도록 합니다.
클론을 채취하기 직전에 목표 클론 주변 영역을 자동 분석하여 인접한 클론에 너무 가까운 클론을 채취하는 것을 방지합니다.
사용자가 정의할 수 있는 정렬 및 순위 지정 전략(예: 클론 품질, 크기 또는 생산성 기준 순위 지정).

고해상도 광학 장치 및 지능형 이미징 시스템

더 큰 클론 근처의 작은 콜로니 또는 단일 세포를 검출하여 목표 클론의 단일 클론 분리를 보장합니다.
콜로니의 구조를 분석하고 형태학적 매개변수(예: 구형도 및 모양)를 정의하여 의심스러운(예: 길쭉한) 콜로니를 채취 대상에서 제외할 수 있습니다.
품질 관리를 위한 현미경 이미지(채취 전후 이미지) 및 채취 과정 중 실시간 이미지.

맞춤 설정 및 유연성

최대 6개의 형광 채널을 지원하며, 필터 세트는 고객의 적용 요구 사항에 따라 맞춤 설정할 수 있습니다.
표준형 및 맞춤형 출발지 및 도착지 플레이트 유형을 모두 사용할 수 있습니다.
상류 및 하류 자동화 통합이 가능합니다.
우리 시스템에 통합하면 장기 실험이 가능합니다.

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