하이브리도마 & CHO 클론 피킹

항체 생산을 위한 고발현 클론 스크리닝 및 분리

새로운 항체 생산을 위한 세포주 개발의 근본적인 단계는 목표 단백질을 높고 일관되게 생산하는 단일 세포 유래 클론을 식별하는 것입니다. 기존 기술의 시간이 많이 소요되고 노동 집약적인 단계와 비교하여, CellCelector를 사용한 생산성 스크리닝은 더 효율적인 방식으로 수행될 수 있습니다.

고생산 클론의 선택 및 분리

하이브리도마 클론의 항체 생성은 클론 간에 크게 다를 수 있습니다. 클론에 의해 생성되고 배지로 분비된 단백질은 형광 표지된 이차 항체로 가시화될 수 있습니다. 반고체 배지의 점성으로 인해 항체가 더 이상 배지로 확산되지 않기 때문에 신호는 해당 단백질을 생산한 세포 클론 주변의 형광 헤일로로 나타납니다. 특히 고생산 클론을 선택하기 위해 CellCelector 소프트웨어는 밝은 필드에서 보이는 세포 군체의 크기를 세포 군체를 둘러싼 형광 헤일로의 크기와 비교하고 각 클론의 항체 생산성 비율을 계산합니다. 이를 통해 최상의 항체 생산을 위해 여러 소스 플레이트에 걸친 세포 클론의 순위를 매길 수 있습니다.

하이브리도마 클론(연한 파란색)과 형광 표지된 이차 항체(녹색에 노란 원)에 의한 분비된 항체(진한 파란색) 검출의 개략도 (A-C)

현미경 시야 (밝은 시야와 형광 조명의 오버레이): 형광 표지된 이차 항체와 배양 후 하이브리도마 클론의 모습 (D-F).

항체 생산 강도는 군락 주변의 형광 후광 직경과 상관관계가 있음: 항체를 생산하지 않는 군락 (A와 D), 중간 수준의 항체를 생산하는 군락 (B와 E), 높은 양의 항체를 생산하는 고생산 군락 (C와 F). 군락의 크기는 유사함 (밝은 시야 관찰의 확대 영역 D-F 참조).

항체 생성 CHO 세포 군락; CellCelector의 반고체 배지 모듈을 사용하여 선택하기 전후의 품질 관리 이미지.

CellCelector의 반고체 배지 모듈로 수확한 CHO 세포 군락을 96웰 목적지 플레이트에서 배양 (수확 후 1일 및 5일째).

메틸셀룰로오스 및 기타 반고체 배지에서 CellCelector 단일 클론 군락 선택의 이점

일회용 팁 사용

교차 오염 및 노즐 막힘을 방지하기 위해 자동으로 교환되는 일회용 플라스틱 팁 사용.
팁 제염을 위한 세척 단계 불필요.
다양한 클론 크기에 맞는 다른 직경 사용 가능.

기능

배치 플레이트에서 상위 순위 클론 선택: 모든 플레이트 먼저 스캔한 후 플레이트별로 선택
제어된 낮은 흡입 볼륨과 속도로 인접한 클론의 동시 선택 방지
피킹 중 인접 클론 이동의 자동 검증으로 모든 타겟 클론이 흡입 전 자동으로 재중심화 보장
타겟 클론 주변 영역의 자동화된 분석은 인접한 클론과 너무 가까운 클론의 선택을 방지합니다.
사용자 정의 가능한 정렬 및 순위 지정 전략, 예: 클론 품질, 크기 또는 생산성에 대한 순위 지정

고해상도 광학 및 지능형 이미징 시스템

대형 클론 근처의 작은 군체 또는 단일 세포 감지로 타겟 클론의 단일 클론 분리 보장
콜로니의 구조를 분석할 수 있으며, 형태학적 매개변수(예: 구형도 및 모양)를 정의하여 의심스러운(예: 길쭉한) 콜로니를 선택에서 제외할 수 있습니다.
선택 전후 이미지 및 선택 중 라이브 이미지를 위한 현미경 이미지

맞춤화 및 유연성

최대 6개의 형광 채널; 필터 세트는 고객 애플리케이션 요구 사항에 따라 맞춤 설정할 수 있습니다.
표준 및 사용자 지정 소스 및 목적지 플레이트 유형 사용 가능.
업스트림 및 다운스트림 자동화 통합 가능.
당사의 인큐베이터 FlowBox와 통합하여 장기 실험 가능.

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