제약 세포주 개발을 위한 단일 세포 복제 기술의 혁명을 만나보세요

CellCelector를 사용하면 이제 고처리량 단일 세포 클로닝이 가능해져 의약품 생산용 세포주를 신속하게 생성할 수 있습니다. 클론은 단 한 번의 클로닝 과정으로 생성되며, 고처리량 아노웰 기반 이미지 검증 클로닝을 위한 HT-NIC(고처리량 이미지 검증 클로닝을 위한 HT-NIC 방법)을 통해 공정 중 이미지 검증을 통한 단일 클론성 증명을 제공합니다.

CellCelector의 단일 세포 클로닝 기술은 클론의 단일성 및 생존력 평가는 물론, 96웰 또는 384웰 플레이트로 클론을 옮긴 후 업계 최고 수준의 증식률을 제공함으로써 차세대 단일 세포 클로닝 방식을 제시합니다. 이 기술은 기존 방식을 뛰어넘어 제한 희석법, 형광 활성 세포 분류(FACS) 또는 단일 세포 프린팅 기술보다 우수한 대안을 제공합니다. 특허 출원 중인 이 기술은 CellCelector의 다른 고객들과의 협력을 통해 개발 및 검증되었습니다.

세포 접종은 기존 세포 배양 플레이트와 유사한 방식으로 수행됩니다. 세포를 접종하면 세포는 고전적인 포아송 분포를 따라 나노웰 내부에 무작위로 포획됩니다. 접종된 웰을 자동 스캔하고 단일 세포를 포함하는 모든 나노웰을 자동으로 식별함으로써 견고하고 기록 가능한 분석 방법을 제공합니다. 접종된 세포 수에 따라 웰당 400~600개의 단일 세포를 포획하여 분석할 수 있습니다. 여러 개의 웰에 접종하면 단일 세포를 포함하는 최대 약 14,000개의 나노웰을 하나의 플레이트 내에서 분석할 수 있습니다.

단일 클론성이 확인된 후, 세포는 배양기에서 3~6일 동안 배양되어 클론당 20~75개의 세포로 증식합니다. 기존의 메틸셀룰로오스 기반 방식과 달리, 셀셀렉터 나노웰 기반 방식은 액체 배지에서 콜로니 성장을 가능하게 합니다. 클론들은 동일한 배지를 공유하지만, 나노웰 벽으로 효과적으로 분리됩니다. 세포가 단일 세포 클론으로 성장하면 나노웰 플레이트를 다시 스캔하여 단일 클론성을 가진 생존 가능한 클론을 자동으로 선택하고 추가 분석 및 대량 생산을 위해 96웰 또는 384웰 플레이트로 옮깁니다.

단일 세포 클로닝에 널리 알려진 전통적인 방법인 제한 희석법은 웰당 평균 세포 수에 따른 포아송 분포에 따른 단일 클론 확률에 전적으로 의존합니다. 다클론 웰의 비율을 제한하기 위해 일반적으로 웰당 0.2개 이하의 세포를 접종합니다. 하지만 이 방법으로는 단일 클론 웰이 약 16%에 불과합니다(즉, 플레이트의 7/8이 비어 있습니다). 400개의 단일 세포 웰을 얻으려면 25개 이상의 96웰 플레이트가 필요합니다. 웰당 0.5개의 세포를 접종하면 단일 세포 웰의 수를 두 배로 늘릴 수 있지만, 단일 클론이 아닌 웰의 비율이 크게 증가합니다.

CellCelector HT-NIC 클로닝 방법은 단일 세포 나노웰의 자동 식별, 클론으로의 성장 추적, 그리고 성장한 클론을 96웰 플레이트로 교차 오염 없이 옮기는 과정을 통해 샘플 준비, 세포 유형 또는 나노웰 플레이트에 접종하는 세포 밀도에 관계없이 클로닝 결과를 제공합니다.

이 그림은 CellCelector 나노웰 기반 클로닝 방법이 두 가지 접종 밀도를 사용한 제한 희석법에 비해 단일 클론 웰을 얻는 데 더 효율적임을 보여줍니다.

제한 희석법을 사용하여 400개의 단일 클론 웰을 얻으려면 웰당 0.2개 또는 0.5개의 세포를 접종하는 경우 96웰 플레이트 26개 또는 13개를 사용해야 합니다. 하지만 동일한 수의 단일 세포 나노웰을 얻으려면 CellCelector 나노웰 플레이트의 웰 하나만으로도 충분합니다.

싸토리우스는 합리적인 가격의 일회용 셀셀렉터를 제공하며, 이는 클로닝 실험 간 교차 오염을 방지하는 데 사용할 수 있습니다. 유리 모세관 하나와 나노웰 플레이트 하나(또는 몇 개의 웰)만 있으면 단일 세포 클로닝 실험을 수행할 수 있으며, 클론을 옮기는 데 사용되는 목적지 마이크로플레이트의 수에는 제한이 없습니다.

예산 제약 조건에 따라, 실험 후 사용된 모세관은 시스템에서 자동으로 세척 및 살균 처리되어 추후 재사용이 가능합니다.

사용 편의성

• 간단한 시료 준비
• 단일 세포 복제에 특화된 기능을 갖춘 사용자 친화적인 소프트웨어
• 정기적인 유지 보수가 필요하지 않습니다.

성능

• 단일 세포에서 유래한 클론을 100% 얻는 것
• 이미지 검증을 통한 단일 클론성 증명 및 클론 생존력 평가가 통합된 단일 클로닝 라운드
• 클론을 96웰 플레이트로 옮긴 후 세포 생존율은 최대 95%에 달했습니다.

믿을 수 있는

• FDA에 제출할 단일 세포 검출 및 단일 클론성 증명을 위한 고품질 이미지 제공 (자동화된 무표지 단일 세포 검출)
• 클론 간 오염 없이 100% 선택적 클론 회수
• 프로젝트 간 교차 오염을 방지하기 위해 일회용 모세관 및 나노웰 플레이트를 사용합니다.
• 단일 세포에서 클론, 그리고 전송에 이르기까지 모든 클론의 통합 추적성
• 자동화된 클론 전송 품질 관리(성공/실패)

저금

• 6일 이내에 검증된 생존 가능한 단일클론 클론을 확보하세요
• 소모품, 배지 및 배양기 보관 공간에 대한 상당한 비용 절감
• 24웰 나노웰 플레이트의 한 웰에서 200~500개의 표적 클론이 생성됩니다.
• 단일클론성 평가를 위해 추가적인 영상 시스템이 필요하지 않습니다.

유연한

• 다양한 세포주(CHO, HEK293, NS0, PER.C6 등)와의 호환성
• 세포 크기에 제한 없음
• 한 플레이트에서 최대 24개의 샘플을 동시에 실행하여 세포 밀도 또는 배지 최적화를 간편하게 수행할 수 있습니다.
• 다양한 워크플로우(단일 B세포 스크리닝, 하이브리도마 스크리닝, 유전자 편집, 희귀 단일 세포 분리 등)와 호환됩니다.
• 다양한 표준 또는 맞춤형 공급 및 목적지 소모품(마이크로플레이트, 배양 접시, 슬라이드, PCR 플레이트/튜브 등)과 호환됩니다.