CRISPR/Cas를 이용한 유전자 편집: 표적 세포 분리 및 단일 세포 복제를 위한 완벽한 도구, 셀셀렉터(CellCelector)

CRISPR-Cas9 유전자 편집은 세포의 유전적 변형을 위한 방법입니다. 이를 위해 세포에 DNA를 비특이적으로 절단하는 효소인 Cas9 뉴클레아제와 Cas9 뉴클레아제가 절단될 DNA 위치로 이동하도록 유도하는 합성 가이드 RNA를 도입합니다. 결과적으로 생성된 이중 가닥 절단은 세포 고유의 복구 시스템을 활성화합니다. 복구 템플릿이 있는 경우, 상동성 유도 복구(HDR)를 통해 복구 과정에서 특정 서열이 삽입되어 유전자 삽입(knock-in) 돌연변이가 발생합니다. 복구 템플릿이 없는 경우, 비상동성 말단 접합(NHEJ)을 통해 복구가 이루어집니다. 그러나 NHEJ는 종종 작은 결실이나 삽입을 유발하여 복구된 유전자의 서열을 중단시키고 유전자 결손(knock-out) 돌연변이를 초래할 수 있습니다.

하지만 CRISPR-Cas9 유전자 편집의 결과는 세포마다 다를 수 있어 이질적인 세포 집단이 생성될 수 있습니다. 많은 실험 환경에서는 세포들이 동질적인 유전적 배경을 가져야 합니다. 이는 원하는 유전자형을 가진 세포를 단일 세포 복제함으로써 달성할 수 있습니다.

CellCelector는 이러한 응용 분야에 완벽한 도구입니다. Probiogen AG와 공동 개발한 이 새로운 기술은 단일 세포 희석 단계를 포함하는 제한 희석 클로닝과 같은 일반적인 클로닝 방법에 비해 여러 가지 장점을 제공합니다. 이러한 제한 희석 클로닝 방법은 단일 세포 희석을 통해 세포를 완전히 분리하여 단일 클론성을 확보합니다. 그러나 많은 세포는 단일 세포 희석을 견디지 못하고 세포 간 소통이 부족하여 세포 손실이 크게 발생할 수 있습니다. 새로운 기술은 이러한 문제를 해결했습니다. 상당한 비용 및 시간 절감은 물론, 단일 클론성 및 생존력 검증이 통합되어 있어 HT-NIC 기술의 매력을 더욱 높여줍니다.