Nanowell single stem cell

정확한 수의 세포 분리

검증 실험을 위한 정확한 세포 수를 얻으세요

농축률 측정이나 민감도 및 특이도 평가와 같은 많은 응용 분야에서, 기준 샘플에 대한 고품질 스파이크인을 생성하려면 정확한 수의 세포가 필요합니다. FACS 또는 단일 세포 프린팅과 같은 기존의 세포 분류 기술은 목적지 웰/튜브에 정확한 수의 세포를 주입하는 것을 보장할 수 없습니다.

CellCelector 플랫폼은 당사의 나노웰 플레이트 기술과 결합하여 매우 정밀하고 부드럽게 정확한 수의 세포를 분리할 수 있도록 합니다. 예를 들어, 분석에 1개, 5개, 10개, 50개 또는 100개의 세포가 정확하게 필요한 경우, CellCelector를 사용하면 손상되지 않은 1개, 5개, 10개, 50개 또는 100개의 세포를 정확하게 추출할 수 있습니다.

그림 1. 셀셀렉터(CellCelector)를 사용하면 표준 또는 맞춤형 플레이트, 튜브 또는 바이알에 세포를 분리할 수 있습니다.

워크플로우

정확한 수의 세포를 분리하기 위한 CellCelector 플랫폼은 (i) 나노웰당 목표 세포 수에 해당하는 세포 밀도로 세포를 접종하고, (ii) 나노웰 내 세포를 자동으로 스캔하고 계수하며, (iii) 목표 세포 수로 채워진 나노웰을 자동으로 선택하고, (iv) 작업자가 목록을 검증하고, (v) 선택된 세포 세트를 목적지 튜브/웰로 자동 전송하는 전체 과정을 완벽하게 추적하는 단계로 구성됩니다(그림 2).

그림 2. 정확한 수의 세포를 자동 분리하기 위한 CellCelector 워크플로우.

세포 접종 통계

나노웰 플레이트에 단일 세포 현탁액을 접종하면 세포는 나노웰 내부에 무작위로 포획됩니다. 이상적인 경우, 완벽한 단일 세포 현탁액의 균일한 접종은 표준 포아송 분포를 따릅니다. 여기서 나노웰에 주어진 수의 세포(k)가 무작위로 포획될 확률(p)은 다음 방정식으로 나타낼 수 있습니다. 여기서 λ는 나노웰당 접종된 평균 세포 수입니다. 그림 3은 여러 세포 접종 밀도에 대해 S200 24웰 나노웰 플레이트의 한 웰에서 이론적 및 측정된 세포 분포를 모두 보여줍니다. 이를 통해 나노웰 내부에 필요한 수의 세포를 포획할 확률을 최대화하기 위해 24웰 플레이트의 각 웰에 접종해야 하는 세포 수를 계산할 수 있습니다.

그림 3. 나노웰당 1, 5, 10, 20개의 세포를 접종했을 때의 이론적(선) 및 실험적(점) 포아송 분포. 스캔 및 분석된 나노웰의 총 개수는 2,500개이다.

자동화된 웰 스캐닝 및 세포 계수

세포가 형광 표지된 경우, 배양된 웰은 형광(BF) 모드와 모든 형광 채널에서 스캔할 수 있습니다(그림 3 및 그림 4). 세포 계수는 형광 모드와 형광 모드 모두에서 가능합니다. 세포 계수 후, 사용자는 나노웰 이미지 갤러리에서 모든 나노웰의 이미지를 확인할 수 있습니다.

그림 4. FITC 채널에서 스캔한 하나의 유정의 개요 이미지. 원은 스캔 및 분석 영역을 나타낸다.

그림 5. 평균 세포 밀도가 나노웰당 20개의 염색된 SK-BR-3 세포인 200µm 나노웰 내 전형적인 세포 분포. 왼쪽: 명시야, 오른쪽: FITC 염색.

그림 6. CellCelector 소프트웨어에 의해 자동으로 선택된 5개의 세포가 포함된 12개의 나노웰의 예.

자동 회수(피킹)

작업자가 회수할 나노웰 목록을 검증하면 시스템이 선택된 모든 나노웰에서 자동으로 샘플을 채취합니다. 채취 과정 중 시스템은 품질 관리를 위해 채취 전후 이미지를 자동으로 저장합니다. 또한, 여러 나노웰의 내용물을 하나의 튜브에 모아 더 많은 수의 세포를 한 번에 채취할 수 있습니다. 예를 들어, 20개의 세포는 2개의 나노웰에 10개씩, 100개의 세포는 5개의 나노웰에 20개씩 담을 수 있습니다.

그림 7. 20개의 세포를 선택하는 예시. 선택 전후 이미지가 자동으로 저장됩니다.

선택된 세포의 100%가 목적지 웰에 증착됩니다. 세포를 평평한 바닥 플레이트나 튜브로 옮기면 CellCelector 소프트웨어를 사용하여 증착된 세포를 쉽게 시각화하고 계수할 수 있습니다(그림 8).


그림 8. 광학 평바닥 PCR 튜브에 담긴 20개의 세포를 검출한 결과.

선적 서류 비치

사용자는 소스 및 대상 플레이트에 대한 전체 추적 정보를 포함한 모든 수치 데이터와 선택된 나노웰과 관련된 모든 이미지(스캔, 피킹 전/후 등)를 내보낼 수 있습니다.

그림 9. 96웰 플레이트의 특정 웰에 분리된 세포 세트에 해당하는 나노웰 이미지 사전 선택 갤러리의 예.

CellCelector 워크플로우를 사용하여 정확한 수의 세포를 분리할 때의 이점

성능

  • 단 하나의 세포까지 포함하여 매우 정확한 수의 세포를 분리할 수 있도록 보장하는 유일한 시스템입니다.
  • 신뢰할 수 있는 이미지 기반 확인 - 숨겨진 셀 없음
  • 100% 선별 효율 - 세포가 남거나 손실되지 않음
  • 세포를 매우 조심스럽게 다룹니다.

유연성

  • 모든 셀 크기 및 유형과 호환됩니다.
  • 고정 세포와 생세포 모두에서 작동합니다.
  • 명시야 및/또는 형광 현미경을 이용한 자동 세포 계수
  • 다양한 격리 시나리오: 대상 플레이트 전체에 동일한 셀 수를 사용하거나 1, 2, 5, 10, 20개 셀과 같은 일련의 셀 수를 생성할 수 있습니다.
  • 일정한 비율로 여러 세포 집단을 혼합하는 것

사용하기 쉽습니다

  • 간단한 시료 준비
  • 사용자 친화적인 소프트웨어
  • 정기적인 유지 보수가 필요하지 않습니다.