검증 실험을 위한 정확한 세포 수 확인

그림 1. CellCelector는 모든 표준 또는 맞춤형 플레이트, 튜브 또는 바이알에 세포를 분리할 수 있습니다.

CellCelector 플랫폼은 다음과 같은 정밀한 세포 분리를 위한 플랫폼으로 구성됩니다: (i) 목표 세포 수에 해당하는 세포 밀도로 나노웰에 세포 파종; (ii) 나노웰 내 세포의 자동 스캔 및 계수; (iii) 목표 세포 수가 있는 나노웰의 자동 선택; (iv) 운영자에 의한 목록 검증; (v) 전체 과정을 완전히 추적하면서 선택된 세포 세트를 목적지 튜브/웰로 자동 이동 (그림 2).

그림 2. 정확한 수의 세포를 자동으로 분리하기 위한 CellCelector 워크플로우

나노웰 플레이트에 단일 세포 현탁액을 파종할 때 세포는 나노웰 내부에 무작위로 포획됩니다. 이상적으로 완벽한 단일 세포 현탁액의 균일한 파종은 표준 포아송 분포를 따릅니다. 여기서 나노웰 내에서 주어진 수의 세포(k)를 무작위로 포획할 확률(p)은 λ가 나노웰당 평균 파종 세포 수인 방정식으로 설명됩니다. 그림 3은 여러 세포 파종 밀도에 대해 S200 24-웰 나노웰 플레이트의 한 웰에서 이론적 및 측정된 세포 분포를 보여줍니다. 이를 통해 나노웰 내부에 필요한 수의 세포를 포획할 확률을 최대화하기 위해 24-웰 플레이트의 각 웰에 파종해야 할 세포 수를 계산할 수 있습니다.

그림 3. 나노웰당 1, 5, 10, 20개의 세포 파종 밀도에 대한 이론적(선) 및 실험적(점) 포아송 분포. 스캔 및 분석된 나노웰의 총 수는 2,500개입니다.

운영자가 회수할 나노웰 목록을 검증하면, 시스템은 선택된 모든 나노웰에서 자동으로 피킹을 수행합니다. 피킹 중에 시스템은 품질 관리 목적으로 피킹 전후 이미지를 자동으로 저장합니다. 시스템은 또한 여러 나노웰의 내용물을 하나의 목적지 튜브에 풀링할 수 있어, 예를 들어 20개의 세포 = 2개의 나노웰 x 10개의 세포, 100개의 세포 = 5개의 나노웰 x 20개의 세포와 같이 더 많은 수의 세포를 보관할 수 있습니다.

그림 7. 20개 세포 피킹의 예. 피킹 전후 이미지가 자동으로 저장됩니다.

선택된 세포의 100%가 목적지 웰에 침적됩니다. 세포가 평평한 바닥 플레이트나 튜브로 이동되면, 침적된 세포는 CellCelector 소프트웨어를 사용하여 쉽게 시각화하고 계산할 수 있습니다 (그림 8).

그림 8. 광학 평평한 바닥 PCR 튜브에 침적된 20개의 세포 검출.