조혈모세포(HSC) 자손 세포 분리 또는 "더블렛 분할"

조혈모세포(HSC)는 혈액계 위계의 정점에 위치하며, 기능하는 혈액 시스템을 확립하고 유지하는 책임을 맡고 있습니다. HSC는 자가 재생할 수 있고 혈액 시스템의 다양한 계통을 생성할 수 있습니다. 따라서 자가 재생과 분화의 균형은 우리의 혈액 시스템이 건강하게 기능하는 데 매우 중요합니다.

그러나 한 가지 또는 다른 줄기세포의 운명으로 이어지는 역학은 완전히 이해되지 않았습니다. 운명 결정을 연구하는 한 가지 방법은 CFC 분석입니다(참조 ). CFC 분석은 단일 줄기세포 또는 전구세포로부터 군체 형성을 연구하지만, 이러한 군체 내의 단일 세포를 구분하지는 않습니다. 따라서 세포 운명 결정을 연구하는 또 다른 옵션은 단일 세포 수준에서 단일 '모' HSC로부터 유래된 '자손' 세포를 분자 및 기능적 분석(예: 단일 세포 염기서열 분석 또는 이식 분석)에서 연구하는 것입니다.

그러나 어떤 방법을 적용하든, 먼저 단일 '자손' 세포를 분리해야 합니다(여기서는 '복제 분할'이라고도 함). 기능적 분석뿐만 아니라 발현 연구를 위해서도 세포의 분자 프로그램에 최소한의 영향을 미치는 조건에서 분리가 수행되는 것이 중요합니다. 골수 또는 혈액 샘플에서 HSC를 분리하는 것은 보통 FACS로 수행됩니다. 그러나 전체 세포 수가 적기 때문에(2개의 자손 세포까지), 이는 복제 분할에 대한 옵션이 아닙니다. 과거에 복제 분할은 연속 희석을 통해 수행되었으며, 이는 세포를 한 웰에서 다른 웰로 피펫팅하여 세포를 단일화하는 것을 의미합니다. 그러나 이 방법은 매우 부드럽지 않으며 세포를 손상시키거나 심지어 잃을 위험이 높습니다. 게다가 복제는 함께 앉는 경향이 있어 연속 희석의 성공을 감소시킵니다.

여기서는 각 단일 세포의 추적성을 가능하게 하는 딸세포의 부드러운 분리를 위한 더 나은 옵션을 제시합니다: CellCelector의 대화형 선택 모드를 통해 세포 분자 프로그램에 미치는 영향을 최소화하면서 세포를 잃을 위험을 무시하고 세포에 일어나는 상황을 라이브 이미지로 완전히 확인할 수 있으며, 동시에 중복 세포를 분리할 수 있습니다. 또한 CellCelector로 선택하는 과정은 세포에 매우 부드럽고, 최종적으로 선택 과정은 완전한 추적성을 허용하는 방식으로 철저히 문서화됩니다.