최적화된 플라스미드 설계 및 렌티바이러스 벡터 생산을 이용한 CAR-T 세포 생성 개요

CAR-T 세포와 같은 유전자 변형 세포 치료법은 암 치료에 있어 가장 유망한 첨단 치료제(ATMP) 중 하나입니다. 이러한 치료법은 일반적으로 렌티바이러스 벡터를 사용하여 관심 유전자를 전달하고 환자의 세포를 변형합니다. 렌티바이러스 벡터 제조에 사용되는 모든 원료는 품질, 성능, 공급업체 등 다양한 매개변수를 고려하여 신중하게 선택해야 합니다. 본 프로젝트에서는 융합 단백질 CAR을 발현하는 다양한 플라스미드 구조를 기반으로 CAR-T 세포를 생성하고 형질전환 효율을 추적했습니다. 먼저 Polyplus의 플라스미드 엔지니어링 서비스를 이용하여 다양한 플라스미드 구조를 구축한 후, FectoVIR^®-LV로 생산된 렌티바이러스 벡터를 사용하여 관심 유전자를 캡슐화했습니다. 그런 다음 말초혈액에서 분리한 CD4+ CD8+ T 세포에 이 렌티바이러스 벡터를 도입하고 12일 동안 배양한 후, 세포 사멸 분석을 통해 형질전환된 CAR-T 세포의 효율을 평가했습니다.