CAR-T 세포 생성의 개요: 최적화된 플라스미드 설계 및 렌티바이러스 벡터 생산

CAR-T 세포와 같은 유전자 변형 세포 치료는 암과 싸우기 위한 가장 유망한 첨단 치료 의약품(ATMP) 중 하나입니다. 이러한 치료법은 일반적으로 렌티바이러스 벡터를 사용하여 관심 유전자를 전달하고 환자의 세포를 수정합니다. 렌티바이러스 벡터 제조 중 사용되는 모든 원자재는 품질, 성능, 공급업체 등 다양한 매개변수를 기반으로 신중하게 선택되어야 합니다. 이 프로젝트에서 우리는 형질 도입 효율성을 추적하기 위해 융합 단백질 CAR을 발현하는 다양한 플라스미드 구조를 기반으로 CAR-T 세포를 생성했습니다. 먼저 Polyplus의 플라스미드 엔지니어링 서비스를 사용하여 다양한 플라스미드 구조를 구축한 후, FectoVIR^®-LV로 생성된 렌티바이러스 벡터를 사용하여 관심 유전자를 캡슐화하고, 말초혈액의 CD4+ CD8+ T 세포에 이 렌티바이러스 벡터로 형질 도입하고, 12일 동안 확장한 후 최종적으로 형질 도입된 CAR-T 세포의 효율성을 살해 분석을 통해 테스트했습니다.