pPLUS^® AAV-Helper: 부유 세포 배양 시스템에서 여러 AAV 혈청형의 수율 및 품질을 향상시키는 새로운 유전자 조작 pHelper 플라스미드

치료용 유전자 전달을 위한 바이러스 벡터로서 재조합 아데노바이러스(rAAV)를 활용하려면 벡터 투여량을 줄여 제조 비용을 절감하고 환자 안전성을 향상시키기 위해 수율과 특이성을 개선해야 합니다. 이를 위해 본 연구에서는 일시적 형질전환을 이용하여 고수율의 rAAV 입자를 제조하는 새로운 기술 개발과 더불어, 포장된 물질의 전체 크기와 전달 특이성에 영향을 미치는 rAAV 벡터의 특성을 향상시키는 데 집중하고 있습니다. 본 연구에서는 부유 배양에서 얻은 바이러스 입자의 감염력(TU/mL)과 품질(충만/빈 비율)을 모두 개선하기 위해 새로운 헬퍼 플라스미드(phelpers)를 설계하는 최첨단 접근 방식을 제시합니다. 우리는 자체 개발한 DNA 조립 기술을 활용하여 합성 플라스미드에 모듈식으로 조립된 여러 유전적 특성의 시너지 효과를 탐구했습니다. 합리적으로 설계된 여러 버전의 pHelper의 생물학적 활성을 비교한 결과, 모든 생물 생산 조건에서 기존 헬퍼 플라스미드보다 우수한 성능을 보이는 최적의 구성을 확인했습니다. DNA 플라스미드 설계 및 조립 분야의 전문 지식과 rAAV 제조를 위한 확장 가능한 형질전환 솔루션을 통해 유전자 치료 제품의 생산성과 특이성을 모두 향상시킬 수 있는 잠재력을 갖추고 있습니다.