옥텟^® DYKDDDDK 바이오센서

Flag^®-tag(FLAG^®-tag 또는 DYKDDDDK-tag로도 표기)는 천연 단백질에서 유래하지 않은 합성 에피토프/펩타이드 태그입니다. 이 태그는 단백질 정제, ELISA, 유세포 분석, 면역형광(IF), 면역침전(IP), 웨스턴 블롯(WB) 등 다양한 워크플로우에서 단백질을 민감하게 포획하고 검출할 수 있도록 합니다. 이 옥타펩타이드 태그는 NH2-DYKDDDDK-COOH(Asp–Tyr–Lys–Asp–Asp–Asp–Asp–Lys) 서열을 가지며, 내장된 엔테로키나제 절단 부위(DDDDK)를 통해 정제 후 태그를 정밀하게 제거할 수 있습니다. Flag^® 태그가 부착된 단백질은 항-Flag^® 항체에 의해 특이적으로 인식되며, 해당 태그는 관심 단백질의 N-말단 또는 C-말단에 DNA 플라스미드에 삽입하여 형질전환을 통한 재조합 발현이 가능하도록 할 수 있다.

  1988년 Hopp et al.에 의해 도입된(1) 1× Flag-tag는 분자량이 약 1012.98 Da인 8개의 아미노산으로 구성됩니다. 고감도 3× Flag 변형체도 널리 사용되며, 일반적으로 단순 반복 대신 최적화된 모티프 DYKDHDG–DYKDHDI–DYKDDDDK를 사용합니다. 항체 기반 검출, 재조합 단백질 정제 또는 간소화된 분석법 개발 등 어떤 용도든 Flag^®-tag는 클로닝에서 정제에 이르기까지 강력하고 다재다능한 성능을 제공합니다.

Flag^® 태그는 Flag® 서열과 해당 항체의 결합에 대한 해리 상수 K가 약 100 nM로 매우 높은 특이성을 갖는 것으로 알려져 있다(2). Octet^® DYKDDDDK 바이오센서는 이 짧은 친수성 태그에 결합하며 단백질-단백질 상호작용 연구에 사용될 수 있다.

이러한 바이오센서는 높은 결합 용량, 감도 및 넓은 동적 범위를 제공합니다. 동역학 및 정량 분석에서 최대 10회까지 재생하여 사용할 수 있으며, 일관되고 정확한 측정값을 유지합니다. 따라서 신약 후보 물질 발굴 및 최적화, 세포주 개발, 공정 개발, 정제 및 미정제 단백질 시료의 품질 관리 등 다양한 고처리량 응용 분야에 비용 효율적인 솔루션입니다.

^{(1) Hopp, T., Prickett, K., Price, V. et al. A Short Polypeptide Marker Sequence Useful for Recombinant Protein Identification and Purification. Nat Biotechnol 6, 1204–1210 (1988). https://doi.org/10.1038/nbt1088-1204} 

^{(2) Einhauer, A & Jungbauer, A. (2001). Affinity of the monoclonal antibody M1 directed against the FLAG peptide. Journal of chromatography. A. 921. 25-30. https://doi.org/10.1016/S0021-9673(01)00831-7} 

FLAG는 독일 다름슈타트 소재 Merck KGaA의 등록상표이며, ANTI-FLAG는 Sigma-Aldrich Co. LLC의 상표입니다.