Octet® AAVX Biosensors for Rapid and Direct Quantitation of AAV Capsids

Octet® AAVX 바이오센서를 이용한 AAV 캡시드의 신속하고 직접적인 정량 분석

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Octet® AAVX 바이오센서를 이용한 AAV 캡시드의 신속하고 직접적인 정량 분석

유전자 치료 분야의 생물공정 개발 및 품질 관리를 위한 다양한 혈청형의 AAV 캡시드 신속 정량 분석

아데노 관련 바이러스(AAV)는 유전자 치료에서 유전자 전달 도구로 널리 사용되어 왔습니다. 다양한 AAV 혈청형(야생형 및 재조합형 포함)이 조직 특이성(영양성) 때문에 사용됩니다. AAV 생산 및 제조 생물공정 워크플로우에서 바이러스 캡시드(바이러스 입자) 농도 측정은 중요한 품질 관리 요소입니다. 현재 바이러스 캡시드 농도를 정량화하는 데 사용되는 ELISA, 드롭릿 디지털 PCR(ddPCR), 분석 초원심분리(AUC) 등의 방법은 시간이 많이 소요되고 노동 집약적입니다.

개요

본 응용 노트에서는 Octet® AAVX 바이오센서의 평가 결과를 제시합니다. AAVX 바이오센서는 8.5E8 ~ 1.0E13 vp/mL의 정량 동적 범위, 높은 정밀도(CV<10%), 그리고 광범위한 AAV 혈청형 결합 특이성을 제공하여 테스트된 10가지 혈청형을 정량할 수 있습니다. 또한, AAVX 바이오센서는 상류 및 하류 공정 중간체에서 접하는 다양한 시료 매트릭스에서 사용 가능하며, 최소한의 시료 전처리만 필요로 하는 것으로 확인되었습니다.

Octet® 바이오 레이어 간섭계(BLI) 시스템과 함께 사용되는 Octet® AAVX 바이오센서 정량 분석 워크플로는 AAV 생물공정 워크플로 전반에 걸쳐 샘플 내 AAV 농도를 신속하고 실시간으로 대량 측정할 수 있도록 지원하여 빠른 공정 최적화, 품질 검사 및 생산성 향상을 가능하게 합니다.

응용 노트 12 (20분) 2022년 12월 1일 Yuanyuan Zhang 박사, Ahmad Kour, Frederik Meierrieks, Benjamin Moritz Graf 박사, Ivan Krylov 박사, Ling Zhang 박사, David Apiyo 박사, Bob Dass 박사

본 애플리케이션 노트는 다음 내용을 다룹니다.

  1. 정제되지 않은 시료와 정제된 시료에서 AAV 캡시드를 신속하고 직접적이며 표지 없이 정량화하는 방법
  2. AAV1~AAV9 및 AAVrh10을 포함한 다양한 AAV 혈청형에 대한 특이성
  3. 8.5E8 – 1.0E13 vp/mL의 동적 범위에서 AAV 캡시드의 직접 정량
  4. 효율적이고 비용 효율적인 재생을 통해 바이오센서를 최대 20회까지 재사용할 수 있습니다.
  5. ELISA 결과와의 높은 상관관계
Imagery of adeno-associated vector genome. Two capsids are present one empty the other full, with DNA cargo. For AAV empty/full ratio assay in gene therapy.
기술 노트

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