사르토리우스의 고처리량 스크리닝(HTS) 세포 분석

0.2~150마이크로미터 크기의 모든 부유 입자 또는 세포가 분석에 적합합니다. 고체 조직의 세포는 분석 전에 분해되어야 합니다.

추가 정보를 수집하기 위해 세포에 형광 분자로 표지할 수 있습니다. 특히, 형광 표지된 항체를 세포 표면의 단백질(항원)에 결합시킬 수 있습니다. 세포에 많은 항원이 있는 경우, 많은 수의 형광 표지된 항체가 결합하여 강한 형광 신호를 생성합니다. 항원이 없거나 적은 세포는 약한 형광 신호를 생성합니다.

형광 마커(예: 형광 표지된 항체)는 관심 있는 에피토프를 직접 표적으로 삼아 그 생물학적 및 생화학적 특성을 측정할 수 있게 합니다. 형광 마커는 세포 집단 식별 및 정량화, 세포 표면 수용체 또는 세포 내 표적 확인, 세포 분류, 면역 표현형 분석, 세포 사멸 연구 등 다양한 응용 분야에서 유용합니다.

유세포 분석 실험에서 검사 지점을 통과하고 감지되는 모든 세포는 개별 사건으로 계산됩니다. 감지되는 각 광원 유형(전방 산란, 측방 산란, 그리고 각기 다른 형광 방출 파장)은 고유한 채널을 가집니다.

각 사건의 데이터는 독립적으로 도시되어 각 채널에서 감지된 광 신호 강도를 나타냅니다. 이 데이터는 여러 가지 방식으로 시각화될 수 있으며, 유세포 분석에서 가장 흔히 사용되는 데이터 그래프 유형은 히스토그램, 도트 플롯, 등고선 다이어그램입니다.

히스토그램

히스토그램은 일반적으로 두 개 이상의 집단의 형광 강도를 비교하는 데 사용됩니다.

도트 플롯

도트 플롯은 각 이벤트가 단일 점(또는 도트)으로 표시되는 산점도에서 동시에 2~3개의 매개변수를 비교합니다. 도트 플롯은 여러 변수 간의 관계를 한 번에 보여주는 그림이며, 매개변수는 산란 및 형광 신호의 모든 조합이 가능합니다.

등고선 플롯

등고선 플롯은 수집된 이벤트 수와 관계없이 모집단의 상대적 빈도를 표시합니다. 등고선 다이어그램은 유사한 세포 수를 나타내는 연결된 선으로 확률 등고선을 표시합니다. 밀도가 높을수록 등고선 다이어그램에서 동심원이 더 가깝게 형성됩니다.

Raji 세포(iQue^® 세포 증식 및 인코딩(V/Blue) 염료로 밝게 표지됨), Ramos 세포(인코더 염료로 희미하게 표지됨) 및 Jurkat 세포(미표지)를 결합(5K/well)하여 CDC 분석을 수행하고 히스토그램에 표시된 대로 인코더 염료 형광에 따라 분리했습니다. (iQue Forecyt^®의 사전 정의된 게이트의 점 플롯 예시는 인간 T 세포 하위 집단의 자동 표현형 분석을 가능하게 합니다. (CD14 양성 모집단을 명확하게 게이팅한 등고선 플롯.

유세포 분석법은 면역학, 분자생물학, 세균학, 바이러스학, 암 생물학 및 감염성 질환 모니터링에 응용되는 강력한 도구입니다. 유세포 분석법의 가장 흔한 응용은 면역표현형 분석입니다. 이는 유세포 분석법의 고유한 능력을 활용하여 표면 마커, 사이토카인 분석 및 세포 건강과 같은 다중 매개변수에 대해 혼합된 세포 집단을 동시에 분석할 수 있게 합니다.