친화성 및 그 이상의 영역으로: 신속하고 특정한 생체 분자 정제

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신속한 항체 및 히스티딘 태그 단백질 정제를 위한 친화 크로마토그래피 솔루션

친화 크로마토그래피(AC)는 생명과학 연구실과 바이오제약 산업에서 생물학적 제제를 정제하는 데 필수적인 단계입니다. 특히, 친화성 리간드와의 특이적 상호작용을 기반으로 항체 및 히스티딘 태그 단백질 시료에서 주요 오염물질을 단일 단계로 제거하는 데 유용합니다.

스크리닝, 전처리 정제 및 기타 연구 응용 분야를 위해 Sartobind® IDA 및 당사의 차세대 Rapid A 멤브레인은 바로 사용할 수 있는 주사기 필터 형태로 제공되어 작업 단계를 줄이고 설정 시간을 최소화하며 간단하고 유연하며 선택성이 뛰어난 정제를 보장합니다.

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Sartobind Lab chromatography unit beauty shot on a yellow background

사르토빈드® 래피드 A 랩

단클론항체 및 기타 Fc 분자의 신속한 친화성 정제

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친화 크로마토그래피 및 그 응용 분야

친화 크로마토그래피의 원리

Sartobind® Lab 장치의 친화성 크로마토그래피 멤브레인을 통해 세포 배양 상등액과 같은 복합 혼합물을 통과시키면, 대류 질량 전달을 통해 관심 분자(MOI)가 효율적으로 포획되는 반면, 숙주 세포 단백질(HCP) 및 DNA와 같은 불순물은 멤브레인을 통과합니다. MOI를 용출하기 전에 세척 단계를 사용하여 순도를 높일 수 있습니다.

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항체 정제

단백질 A는 세균에서 유래한 세균 세포벽 단백질입니다. 이는 단클론항체를 포함한 면역글로불린 G 항체의 Fc 영역에 대한 높은 친화성을 가지고 있습니다.

크로마토그래피 매트릭스에 고정된 단백질 A는 세포 배양 상등액이나 혈청 샘플과 같은 복잡한 혼합물에서 항체를 선택적으로 포획할 수 있게 해줍니다. 이 방법을 통해 면역 분석부터 치료용 항체 생산에 이르기까지 다양한 분야에 활용 가능한 고순도 항체 샘플을 얻을 수 있습니다.

His-태그 단백질 정제

이가 금속 이온은 히스티딘 잔기에 특히 높은 친화성을 가지고 있습니다. 연구실에서는 재조합 단백질에 N-말단 또는 C-말단에 폴리히스티딘 태그를 도입하여 고정화 금속 친화성 크로마토그래피(IMAC)를 이용한 선택적 포획을 용이하게 합니다.

이 방법은 재현성, 선택성 및 온화한 용출 조건 덕분에 정제 과정을 단일 단계로 간소화하여 구조 및 기능 연구에 바로 사용할 수 있는 순수하고 천연 상태의 단백질 샘플을 얻을 수 있습니다.

실험실 여과 및 정화 관련 자료

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동영상

LCGC와의 인터뷰에서 실험실 여과 제품 관리자인 존 캐시먼은 멤브레인 크로마토그래피가 항체 정제에 더 효율적인 기술인 이유를 설명합니다.

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친화 크로마토그래피 자료

T cell releases antibodies, binding to virus
웹 세미나

연구 개발을 위한 생체 분자 정제 효율 향상

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Sartobind Lab being connected to a chromatography system
사례 연구

항체 정제 비용 효율성 향상

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필수 실험 장비를 활용하여 항체 정제 기술을 발전시키다

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Lab Purification: Membrane Chromatography Solutions brochure
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실험실 크로마토그래피

싸토리우스 실험실용 크로마토그래피 소모품 및 키트의 전체 제품군을 살펴보세요.

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사르토빈드® 래피드 A 랩

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사르토빈드® IDA 연구실

금속 친화성 정제에 대한 기술 사양 및 주문 정보를 참조하십시오.

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Sartobind® 크로마토그래피 제품

가장 인기 있는 Sartobind® 실험실 정제 장치의 주문 정보를 간편하게 확인할 수 있는 참고 자료입니다.

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Sartobind® 연구실에서 공정까지

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막 크로마토그래피로의 전환

단일클론항체 포획에서 속도와 일관성 제공

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자주 묻는 질문 (FAQ)

친화성 크로마토그래피는 생체 분자와 선택된 리간드 간의 특이적 상호작용을 기반으로 합니다. 이는 항체 및 기타 Fc 함유 분자(단백질 A) 또는 히스태그가 부착된 단백질(IDA)의 포획 정제에 사용할 수 있습니다.

Sartobind® IDA Lab은 환경 시료에서 2가 금속 이온을 포집하거나 제거하는 데에도 사용할 수 있습니다.

Sartobind® Lab은 현재 단백질 A 또는 이민디아세트산(IDA) 리간드와 함께 제공됩니다.

친화성 크로마토그래피는 생체 분자와 선택된 리간드 간의 특이적 상호작용을 기반으로 합니다. 이는 항체(단백질 A) 또는 히스태그가 부착된 단백질(IDA)의 포획 정제에 사용될 수 있습니다.

Sartobind® IDA Lab은 환경 시료에서 2가 금속 이온을 포집하거나 제거하는 데에도 사용할 수 있습니다.

1개 또는 4개의 유닛, 루어-UNF 어댑터 한 쌍 및 빠른 시작 가이드가 포함됩니다.

본체 2개, 루어-UNF 어댑터 한 쌍, 그리고 빠른 시작 가이드가 포함되어 있습니다.

네, 그렇습니다. 제품 포장에 간편 사용 설명서를 포함하여 환경에 미치는 영향을 최소화하기 위한 노력을 기울였지만, 제품 사용 방법에 대한 자세한 정보가 필요하시면 저희 온라인 쇼핑몰의 해당 제품 페이지에서 전체 사용 설명서를 다운로드하실 수 있습니다.

두 가지 막 크로마토그래피 장치 모두 장비 유무에 관계없이 사용할 수 있습니다. 주사기를 루어락 주입구에 직접 연결하여 최소한의 준비 시간으로 빠른 정제가 가능합니다.

침대 용량은 막 용량(MV)이라고도 합니다.

  • 사르토빈드® 래피드 A 랩: 0.5mL
  • Sartobind® IDA Lab: 2.1 mL

이러한 크로마토그래피 장치는 대부분의 일반적인 정제 완충액에서 안정적입니다. 산화제는 피해야 합니다.

수지 크로마토그래피와 달리, Sartobind® 멤브레인에는 기포가 혼입되어 손상을 일으킬 가능성이 없습니다. 따라서 완충액의 탈기 과정이 필요 없어 준비 시간을 크게 절약할 수 있습니다.

최적의 생체분자 포획을 위해서는 정제할 시료와 조성이 유사한 완충액으로 평형화하는 것을 권장합니다. 이 과정은 신속하게 진행되며 정제 주기에 단 몇 초만 추가됩니다.

Sartobind® 멤브레인은 막힘에 강하지만, 모든 시료는 로딩 전에 사전 여과하는 것이 좋습니다. 생산성을 극대화하기 위해 Sartobind® 실험실 주입구에 를 연결하여 사전 여과와 시료 로딩을 동시에 수행할 수 있습니다.

분자 포획에 최적의 조건을 알지 못하는 경우, 멤브레인에 다양한 금속 이온을 로딩하여 스크리닝하는 것을 권장합니다. 권장 금속 이온으로는 니켈(Ni), 코발트(Co), 구리(Cu), 아연(Zn)이 있습니다.

최적의 세척 및 용출 조건을 결정하기 위해 예비 정제를 수행할 수도 있습니다. 원심분리기, 주사기 또는 펌프를 사용하여 정제할 경우, 이미다졸 농도가 점진적으로 증가하는 완충액을 사용하는 다단계 용출법을 사용하십시오. 액체 크로마토그래피 시스템을 사용하는 경우, 선형 용출 기울기를 적용하십시오. 그런 다음 적절한 방법(예: SDS PAGE)을 사용하여 유출액과 용출액 분획을 분석하고 필요한 순도를 제공하는 조건을 확인해야 합니다.

Sartobind® 실험실용 장치는 적절한 재생 및 보관을 통해 여러 번 재사용할 수 있습니다. Sartobind® IDA 실험실용 장치의 결합 용량을 유지하려면 킬레이트화된 금속 이온을 정기적으로 제거하고 다시 채우는 것이 좋습니다.

오염 위험을 제거하기 위해 각 표적 생체 분자마다 별도의 Sartobind® 실험실 장치를 사용하는 것을 권장합니다.

Sartobind® Rapid A Lab은 이미 주기당 ≥17.5mg의 높은 동적 결합 용량을 보유하고 있습니다.

대량의 시료를 정제하려면 두 대의 장치를 직렬로 연결하여 사용할 수 있습니다. 또는 단일 장치의 높은 유속을 최대한 활용하여 여러 번에 걸쳐 소량씩 하나의 시료를 정제하는 방법도 있습니다.

네, 그렇습니다. Sartobind® Rapid A Lab은 다른 모든 Sartobind® Lab 장치와 마찬가지로 100% 재생 에너지원을 사용하여 제조될 뿐만 아니라 최대 100회까지 재사용할 수 있어 소모품 사용량을 줄이고 연구 폐기물을 감소시킬 수 있습니다. 또한, 다른 단백질 A 수지 컬럼 및 막 크로마토그래피 장치와 달리 Sartobind® Rapid A Lab은 상온에서 보관할 수 있어 에너지 집약적인 냉각의 필요성을 줄입니다.