알칼리 용해 및 Vivapure® IEX 막 흡착제를 이용한 플라스미드 DNA 정제 프로토콜

개요

이 프로토콜은 재조합 클로닝 워크플로우에서 플라스미드 DNA를 분리 및 정제하는 간단한 방법을 설명합니다. 먼저, 전통적인 알칼리 용해법을 사용하여 대장균에서 플라스미드를 분리합니다. 분리된 플라스미드는 Vivapure® IEX 스핀 컬럼에 적용되며, 혁신적인 Sartobind® Lab 멤브레인 흡착 매트릭스에 플라스미드가 신속하게 포획됩니다. 이후 세척 및 용출 단계를 통해 단백질 발현을 위한 원핵세포 또는 진핵세포로의 형질전환 또는 형질주입, 또는 제한효소 소화와 같은 후속 공정에 필요한 충분한 순도를 확보합니다.

3분 2023년 4월 구조 및 기능 분석을 위해 단백질 발현 및 정제 기술을 사용하는 연구실 연구원들 클로닝, 알칼리 용해, 플라스미드 DNA 정제, 재조합 단백질 발현

이 프로토콜에는 다음 내용이 포함되어 있습니다.

  1. 알칼리 분해 및 정제에 필요한 재료 목록
  2. 알칼리 용해 및 막 크로마토그래피 수행 시 고려해야 할 일반적인 지침
  3. 알칼리 분해 및 정제 과정에 대한 시각적 개요와 단계별 지침
  4. 설명된 방법에 의해 분리 및 정제된 샘플을 보여주는 대표적인 아가로스 겔.
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