싸토리우스 실험실 초정밀 여과기

싸토리우스는 폴리에테르설폰(PES), 재생 셀룰로오스(RC), 셀룰로오스 아세테이트(CA/CTA) 멤브레인 소재의 한외여과기를 제공합니다.

대부분의 한외여과 및 투석여과 애플리케이션에서 PES와 RC는 모두 좋은 선택입니다. PES는 음전하 분자에 대해 더 높은 회수율을 제공할 수 있는 반면, RC는 일반적으로 올리고뉴클레오티드와 펩타이드를 포함한 선형 분자에 대해 더 높은 회수율을 지원합니다. 새로운 타겟의 경우, 싸토리우스는 일상적인 공정 최적화의 일환으로 두 재료를 모두 테스트할 것을 권장합니다.

한편, CTA는 한외여과액(투과액)이 주요 관심사인 애플리케이션에 권장됩니다.

초미세 필터는 고분자 농축 및 농축, 정제 및 입자 제거, 샘플 부피 감소와 같은 한외여과 응용 분야에 사용할 수 있는 다목적 소모품입니다. 또한 겔 여과 및 투석에 대한 효율적인 대안인 투석여과에도 사용할 수 있습니다. 투석여과는 분자 안정성을 평가하기 위한 연마, 결합 연구 및 버퍼 스크리닝에도 사용될 수 있습니다.

다양한 작동 방법, 멤브레인 재료 및 분획 분자량 범위 덕분에 싸토리우스 초미세 필터는 단백질, 바이러스, 핵산, 세포외 소포체(EVs), 입자(EPs) 등 거의 모든 유형의 분자에 사용할 수 있습니다.

핵산 및 기타 선형 분자의 경우, 싸토리우스의 Hydrosart^® RC 멤브레인과 옵션을 사용하는 것을 권장합니다. 수평 멤브레인과 옵션은 DNA 시퀀싱 전 범죄 현장 샘플 농축과 같은 중요한 응용 분야에서 특히 오염 없이 걱정 없는 처리를 제공합니다.

pDNA를 농축하고, mRNA를 정제하며, 대량의 샘플을 다룰 때 다른 핵산을 처리하는 데 이상적입니다.

많은 바이러스는 단백질과 유사한 방식으로 처리할 수 있지만, 일반적으로 분자량 차단 한계(MWCO)가 100 kDa 이상인 경우가 많습니다. 엔벨로프 바이러스와 지질 나노입자(LNPs), 세포외 소포체(EVs) 및 입자(EPs)와 같은 지질막을 가진 유사한 분자의 경우, 원심분리력이나 펌프 유량을 낮춰 샘플에 가해지는 작동 압력과 전단 응력을 줄이면 회수율을 개선할 수 있습니다.

네, 가능합니다. 싸토리우스는 최대 100 mL 샘플 처리에 이상적이며, 다음 세대 Vivaflow^® SU를 포함한 싸토리우스 TFF 카세트는 크로스플로우 기술과 관련된 복잡성 없이 100 mL 이상의 샘플에 대한 한외여과 및 투석여과에 적합합니다.

단백질은 일반적으로 한외여과를 통해 농축됩니다. 실험실용 한외여과 장치의 제품 설계는 원심분리, 양압, 용매 흡착 및 접선 흐름 분리 방법을 통한 농축을 가능하게 하는 특수 하우징 내에 배치된 한외여과 멤브레인으로 구성됩니다. 이러한 방법들은 제어된 힘을 사용하여 용질과 비목표 분자를 반투과성 한외여과 멤브레인을 통과시켜 투과액으로 보내고, 동시에 관심 있는 더 큰 분자는 농축액에 보존합니다.

동일한 멤브레인 재질, 분획분자량(MWCO), 공급 흐름 방향 및 작동 방법이 모든 시료에 이상적이지는 않을 수 있습니다. 따라서 각 타겟 분자에 대한 한외여과 및 투석여과 공정을 최적화하는 것이 우선순위여야 합니다. 보존할 분자 크기의 1/3 또는 1/2까지의 MWCO를 선택하는 것부터 시작하세요. 가능하다면, 다른 멤브레인 재질과 작동 방법을 테스트하는 것도 권장됩니다. 마지막으로, 예를 들어 차등 압력 감소, 멤브레인 불활성화 또는 농축액 수집 후 버퍼 린스를 사용하여 공정을 개선하면 타겟 회수율을 높일 수 있습니다.

대부분의 싸토리우스 초여과기는 건조로 인한 시료 손실을 방지하기 위해 데드 스톱 또는 최소 재순환 볼륨을 가지고 있습니다. 이는 초여과 과정이 자동으로 중단되기 전 시료가 도달할 수 있는 최소 볼륨에 해당합니다.

특정 농도 이상에서 응집되기 쉬운 분자의 경우, 과도한 농축을 방지하기 위해 데드 스톱을 증가시킬 수 있습니다. 초여과를 시작하기 전에 투과액 튜브를 물이나 버퍼로 미리 채우는 것만으로도 초여과를 조기에 중단시킬 수 있습니다. 이 기술은 고정된 회전 시간으로 단일 실행에서 여러 시료를 동일한 최종 부피로 농축해야 할 때 유용합니다.

초미필터 멤브레인의 성능은 반복 사용으로 저하되므로, 대부분의 초미필터는 일회용으로 설계되었습니다. 이는 작업 시간을 줄이고, 실험실 안전을 개선하며, 교차 오염의 위험을 제거하는 데 도움을 줍니다.

하지만 싸토리우스 초미필터의 경우 세척 및 보관 절차가 제공되어 여러 번 사용할 수 있습니다.

싸토리우스 초여과기는 다양한 응용 분야에서 사용될 수 있으며, 이 중 많은 제품들이 일반 실험실 사용(GLU)으로 분류됩니다. 이러한 제품들은 진단 샘플 준비에 사용될 수 있지만, 진단용으로 특별히 개발되지 않았기 때문에 체외진단(IVD) 의료기기 규정(규정 (EU) 2017/746)에 따라 IVD 의료기기로 분류될 필요가 없습니다.

유럽과 영국의 임상 과학자들은 진단 샘플 준비를 위해 GLU 초미세 여과기를 계속 검증하고 사용할 수 있습니다. 예를 들어, GLU 초미세 여과기는 반정량 또는 정량 분석 전에 체액 샘플에서 질병 마커의 농도를 높이는 유용한 도구가 될 수 있습니다. GLU 제품은 진단 결과를 제공하지 않습니다.

생체분자 정제 워크플로우는 일반적으로 세포 수확 또는 용해 후 시작되며, 관심 분자(MOI)의 순도를 높이고 분리하기 위한 일련의 단계를 사용합니다.

먼저, 동적 바디 피드 여과를 통해 세포와 세포 파편을 제거하여 명확한 샘플을 생성할 수 있습니다. 이 샘플은 일반적으로 후속 크로마토그래피 단계에서 MOI 캡처를 위한 최적 조건을 보장하기 위해 버퍼를 다시 조정합니다. 투석을 버퍼 교환에 사용할 수 있지만, 투과여과는 더 빠른 대안을 제공하며 버퍼 소비를 줄이고, 필요한 경우 샘플을 동시에 농축하기 위해 한외여과와 결합할 수 있습니다. 다음으로, 이온 교환(IEX) 또는 친화성 크로마토그래피(AC)는 다양한 MOI에 적용할 수 있는 일반적인 정제 방법입니다. 이러한 기술은 숙주 세포 단백질 및 DNA와 같은 오염 물질을 샘플에서 제거하여 샘플 순도를 높입니다. 마지막으로, 샘플은 추가 버퍼 교환 및/또는 농축 과정을 거치고 미세여과를 통해 멸균되어 다양한 구조 및 기능 연구에 사용할 준비가 됩니다.

연마 크로마토그래피는 정제 워크플로우의 최종 크로마토그래피 단계로, 관심 분자(MOI)의 가능한 최고 순도를 달성하기 위해 설계되었습니다.

이온 교환 크로마토그래피는 단백질 정제에서 연마에 일반적으로 사용되며, 캡처 또는 흐름 모드 중 하나로 적용될 수 있습니다. 캡처 연마에서는 고정상에서 MOI의 결합을 촉진하도록 버퍼 조건을 선택합니다. 이를 통해 MOI를 선택적으로 유지한 후 세척(추가 불순물 제거)과 용출 - 소위 결합, 세척, 용출 과정을 수행할 수 있습니다.

반대로, 흐름 연마는 MOI가 결합되지 않고 흐르는 동안 불순물이 고정상에 결합되도록 하는 버퍼 조건을 사용합니다. 흐름 연마의 주요 장점은 그 단순성 - 샘플 로딩 중에 MOI를 수집할 수 있어 세척 및 용출 단계가 필요 없습니다. 이를 통해 공정 시간, 버퍼 소비, 취급 복잡성을 줄일 수 있습니다.