싸토리우스 랩 울트라필터

싸토리우스는 폴리에테르설폰(PES), 재생 셀룰로오스(RC) 및 셀룰로오스 아세테이트(CA/CTA) 멤브레인 소재를 사용한 초여과기를 제공합니다.

대부분의 한외여과 및 투석여과 공정에서 PES와 RC는 모두 좋은 선택입니다. PES는 음전하를 띤 분자에 대해 더 높은 회수율을 제공할 수 있으며, RC는 올리고뉴클레오티드 및 펩타이드를 포함한 선형 분자에 대해 일반적으로 더 높은 회수율을 지원합니다. 새로운 목표물의 경우, Sartorius는 일상적인 공정 최적화 과정의 일환으로 두 가지 재료를 모두 테스트할 것을 권장합니다.

한편, CTA는 초여과액(투과액)이 주요 관심사인 응용 분야에 권장됩니다.

초여과기는 고분자 농축 및 정제, 입자 제거 및 정화, 시료 부피 감소 등 다양한 초여과 응용 분야에 사용될 수 있는 다용도 소모품입니다. 또한, 겔 여과 및 투석을 대체하는 효율적인 방법인 투석여과에도 사용될 수 있으며, 탈염에도 효과적입니다. 투석여과는 정제, 결합 연구, 분자 안정성 평가를 위한 완충액 스크리닝에도 활용됩니다.

싸토리우스 초미세여과는 다양한 작동 방식, 멤브레인 재질 및 분자량 차단 한계(MWCO) 덕분에 단백질, 바이러스, 핵산, 세포외 소포(EV) 및 입자(EP) 등 사실상 모든 유형의 분자를 여과하는 데 사용할 수 있습니다.

핵산 및 기타 선형 분자의 경우, Hydrosart^® RC 멤브레인과 옵션을 사용하는 것을 권장합니다. 이 멤브레인은 특히 DNA 시퀀싱 전 범죄 현장 시료 농축과 같은 중요한 응용 분야에서 오염 없는 안전한 처리를 보장합니다.

대용량 시료를 처리할 때 pDNA 농축, mRNA 정제 및 기타 핵산 처리 작업에 이상적입니다.

많은 바이러스는 단백질과 유사한 방식으로 처리될 수 있지만, 일반적으로 분자량 차단 한계(MWCO)는 100kDa 이상입니다. 외피 바이러스 및 지질 나노입자(LNP), 세포외 소포(EV) 및 입자(EP)와 같은 지질막을 가진 유사 분자의 경우, 원심력이나 펌프 유속을 낮춰 작동 압력과 시료에 가해지는 전단 응력을 줄이면 회수율이 향상될 수 있습니다.

네, 가능합니다. 는 최대 100mL의 시료 처리에 적합하며, 차세대 Vivaflow^® SU를 포함한 TFF 카세트는 일반적으로 크로스플로우 기술과 관련된 복잡성 없이 100mL 이상의 시료에 대한 초여과 및 투석여과를 위해 설계되었습니다.

단백질은 일반적으로 초여과법을 이용하여 농축됩니다. 실험실용 초여과 장치의 제품 설계는 원심분리, 양압, 용매 흡착 및 접선 유동 분리 방법을 통해 농축이 가능하도록 특수 설계된 하우징 내에 초여과막을 배치하는 것으로 구성됩니다. 이러한 방법들은 제어된 힘을 이용하여 용질과 비표적 분자들을 반투과성 초여과막을 통해 투과액으로 통과시키고, 관심 있는 큰 분자들은 잔류액에 남겨둡니다.

동일한 막 재질, 분자량 차단 한계(MWCO), 공급액 흐름 방향 및 작동 방식이 모든 시료에 이상적인 것은 아닙니다. 따라서 각 목표 분자에 맞게 한외여과 및 투석여과 공정을 최적화하는 것이 최우선 과제입니다. 먼저, 포집하려는 분자 크기의 1/3 또는 1/2에 해당하는 분자량 차단 한계를 선택하십시오. 가능하다면 다양한 막 재질과 작동 방식을 테스트하는 것도 권장됩니다. 마지막으로, 차압 감소, 막 패시베이션 처리 또는 잔류물 수집 후 완충액 세척과 같은 방법을 사용하여 공정을 개선하면 목표 물질 회수율을 극대화할 수 있습니다.

대부분의 싸토리우스(Sartorius) 초여과기는 시료의 건조로 인한 손실을 방지하기 위해 데드 스톱(dead stop) 또는 최소 재순환 용량을 갖추고 있습니다. 이는 초여과 공정이 자동으로 중단되기 전에 시료가 도달할 수 있는 최소 용량을 의미합니다.

특정 농도 이상에서 응집되기 쉬운 분자의 경우, 과농축을 방지하기 위해 데드 스톱 시간을 늘릴 수 있습니다. 초여과를 시작하기 전에 투과관에 물이나 완충액을 미리 채워두는 것만으로도 초여과를 더 일찍 멈출 수 있습니다. 이 기술은 고정된 원심분리 시간으로 한 번의 과정으로 여러 시료를 동일한 최종 부피로 농축해야 할 때도 유용합니다.

한외여과막의 성능은 반복 사용 시 저하되므로 대부분의 한외여과기는 일회용으로 설계되었습니다. 이는 작업 시간을 줄이고 실험실 안전성을 향상시키며 오염물질 오염 위험을 제거하는 데 도움이 됩니다.

하지만 초미세여과기의 세척 및 보관 절차가 제공되므로 여러 번 재사용할 수 있습니다.

싸토리우스 초미세여과는 광범위한 분야에 사용될 수 있으며, 따라서 많은 제품이 일반 실험실용(GLU)으로 분류됩니다. 진단용 시료 준비에 사용할 수 있지만, 이러한 제품은 체외진단(IVD)을 위해 특별히 개발된 것이 아니므로 진단 의료기기 규정(EU 2017/746)에 따라 IVD 의료기기로 분류될 필요는 없습니다.

유럽과 영국의 임상 과학자들은 진단 샘플 준비를 위해 GLU 초여과기를 계속해서 검증하고 사용할 수 있습니다. 예를 들어, GLU 또는 초여과기는 반정량적 또는 정량적 분석 전에 체액 샘플에서 질병 표지자의 농도를 높이는 데 유용한 도구가 될 수 있습니다. GLU 제품은 진단 결과를 제공하지 않습니다.

생체 분자 정제 워크플로는 일반적으로 세포 수확 또는 용해 후 시작되며, 일련의 단계를 통해 관심 분자(MOI)를 분리하고 순도를 높입니다.

먼저, 동적 체액 여과(dynamic body feed filtration)를 통해 세포와 세포 파편을 제거하여 투명한 시료를 얻습니다. 이 시료는 일반적으로 후속 크로마토그래피 단계에서 MOI(다항원 특이적 미생물)를 포획하기 위한 최적의 조건을 확보하기 위해 재완충 처리됩니다. 투석을 통해 완충액을 교환할 수 있지만, 투석여과(diafiltration)는 완충액 소모량을 줄이면서 더 빠른 결과를 제공하며, 필요한 경우 초여과(ultrafiltration)와 결합하여 시료를 동시에 농축할 수 있습니다. 다음으로, 이온 교환 크로마토그래피(IEX) 또는 친화성 크로마토그래피(AC)는 다양한 MOI에 적용할 수 있는 일반적인 정제 방법입니다. 이러한 기술은 숙주 세포 단백질 및 DNA와 같은 오염 물질을 시료에서 제거하여 시료의 순도를 높입니다. 마지막으로, 시료는 추가적인 완충액 교환 및/또는 농축 과정을 거치고 미세여과를 통해 멸균 처리되어 다양한 구조 및 기능 연구에 사용할 수 있도록 준비됩니다.

정제 크로마토그래피는 정제 워크플로우의 최종 크로마토그래피 단계로, 관심 분자(MOI)의 순도를 최대한 높이기 위해 설계되었습니다.

이온 교환 크로마토그래피는 단백질 정제에서 정제 과정의 마무리 단계에 흔히 사용되며, 포획 모드 또는 유동 모드 모두에서 적용할 수 있습니다. 포획 정제에서는 고정상에 표적 단백질(MOI)이 결합하도록 완충액 조건을 조절합니다. 이를 통해 MOI를 선택적으로 고정상에 유지한 후, 세척(추가 불순물 제거) 및 용출 과정을 거치는데, 이를 결합-세척-용출 과정이라고 합니다.

반면, 플로우스루 폴리싱은 고정상에 불순물이 결합되도록 하는 완충액 조건을 사용하며, MOI는 결합되지 않은 채로 통과합니다. 플로우스루 폴리싱의 핵심 장점은 간편성입니다. 시료 주입 중에 MOI를 회수할 수 있어 세척 및 용출 단계가 필요 없습니다. 따라서 공정 시간, 완충액 소모량 및 취급 복잡성을 줄일 수 있습니다.