애플리케이션 노트: 세포 사멸 정량을 위한 Incucyte^® 세포 사멸 분석

세포자멸사(아포토시스)는 신경퇴행, 자가면역질환 및 암을 포함한 여러 병리학적 상황에 관여하는 복잡하고 역동적인 과정입니다. 그 메커니즘에 대한 깊은 이해는 다양한 치료 영역에서 중요합니다.

카스파아제-3 또는 카스파아제-7의 활성화는 종종 세포의 비가역적인 세포자멸사 사망을 초래하며, 세포자멸사의 신뢰할 수 있는 표지자로 간주됩니다. 플라즈마 막 포스파티딜세린(PS)의 대칭성 조절된 상실 또한 세포자멸사의 고전적인 표지자입니다.

많은 전통적인 세포자멸사 분석법의 주요 단점은 단일 임의의 사용자 정의 종료 지점 측정을 제공하며, 이는 서로 다른 세포 유형과 서로 다른 화합물 처리 조건에 따라 상당히 달라질 수 있다는 것입니다. 이러한 분석법은 여러 세척 단계 또는 세포 분리가 필요하며, 이로 인해 죽어가는 세포의 손실 또는 PS 비대칭성 손실을 초래할 수 있습니다. 또한, 이러한 전통적인 분석법은 시간에 따른 배경 신호 증가로 인해 장기 측정에 적합하지 않습니다.

생세포 이미징 및 분석 방법이 개발되었지만, 세포 사멸을 유연하고 정확하게 평가하기 위해서는 최적화된 기술과 시약이 필요합니다. 이 응용 노트에서는 세척이 필요 없는 믹스-앤-리드 시약과 세포자멸사의 동역학적 정량화에 최적화된 통합 이미지 기반 분석 도구를 포함하는 Incucyte^® 세포자멸사 분석법의 가치를 설명합니다.

Incucyte® 케스파제-3/7 또는 아넥신 V 염료를 실시간 이미지 분석 시스템과 결합하여 생리학적으로 관련된 조건에서 사용하면 세포 사멸 신호 경로의 동역학과 타이밍에 대한 통찰력을 제공합니다. 이러한 분석은 단일 최적 종료 지점 측정을 결정할 필요성을 제거합니다.

이 접근 방식은 획득된 이미지를 사용하여 데이터를 검증하고 세포 사멸과 관련된 형태학적 변화를 평가할 수 있게 합니다. 증식 측정과 함께 세포 사멸 판독값을 다중화함으로써 추가적인 통찰력을 얻을 수 있으며, Incucyte® 세포별 분석과 결합하면 개별 세포 하위 집단의 세포 건강을 추적할 수 있는 추가적인 이점이 있습니다.

이러한 분석은 신약 발견과 기초 세포 생물학 연구를 위한 새롭고 유연한 방법을 제공합니다.

이 애플리케이션 노트에서 강조된 검증된 데이터는 다음과 같습니다:

• 세포 사멸의 정량화
• 세포 사멸의 약리학적, 동역학적 분석
• 증식 및 세포 사멸의 다중 측정
• 세포 하위 집단의 세포 건강 평가

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