어플리케이션 노트: Incucyte^® 세포독성 분석을 이용한 세포독성 정량화

세포 사멸은 동적 과정이며, 세포독성 모니터링은 종양학과 같은 많은 치료 영역에서 중요합니다. 세포를 세포독성 자극에 노출시키면 대사 활동을 저해하고, 세포 성장을 억제하거나 궁극적으로 괴사 또는 세포자멸사와 같은 복잡한 생물학적 경로를 통해 세포 사멸을 초래할 수 있습니다.

메커니즘과 무관하게, 세포독성 화합물은 종종 세포막 무결성을 손상시키며, 세포가 한번 세포막 무결성을 돌이킬 수 없게 상실하면 죽음을 피할 수 없습니다.

세포독성을 측정하기 위해 설계된 분석법은 조직 특이적 독성을 예측하거나 항암 치료를 위한 선도 물질을 식별하고 분류하는 데 사용됩니다. 다중화된 고처리량 스크리닝(HTS) 세포독성 분석법은 초기 약물 개발 중 화합물의 세포독성을 평가하기 위해 다양한 판독값을 측정하고 있습니다.

막 무결성 측정과 관련된 여러 다중 세포독성 분석법이 있지만, 세포독성의 여러 지표를 동시에 측정할 수 있음에도 불구하고, 일반적으로 단일 시점을 평가하고 시간에 따른 생물학적 활성을 평가할 수 없습니다.

세포막 무결성을 동역학적으로 측정하기 위해 생세포 분석 방법이 개발되었습니다. 그러나 유연하고 정확한 평가를 위해서는 최적화된 기술과 시약이 필요합니다. Incucyte^® 생세포 분석 시스템과 Incucyte^® 세포독성 염료를 함께 사용하여 세포독성을 측정하는 생세포 동역학 분석은 세포 사멸의 특징인 세포 투과성의 정량적이고 재현 가능한 검출을 보여줍니다.

이 접근법은 생리학적으로 관련된 조건에서 정량화와 동시에 형태학적 변화를 모니터링할 수 있는 능력도 제공합니다. Incucyte^® 세포독성 염료를 Incucyte^® Nuclight 시약 또는 세포주와 결합하면 증식과 세포독성의 다중 측정이 가능해집니다.

또한, Incucyte^® 세포별 분석 소프트웨어는 형광을 기반으로 개별 세포 분할 및 분류를 제공하여, 세포독성 또는 세포사멸 지수와 같은 추가 매개변수를 계산할 수 있으며 세포 집단에 대한 약물 작용 메커니즘 평가를 용이하게 합니다.

본 애플리케이션 노트에서는 세척이 필요 없고 혼합 및 판독이 가능한 시약과 세포독성의 동역학적 정량화를 가능하게 하는 통합 이미지 기반 분석 도구를 포함하는 Incucyte^® 세포독성 분석의 유용성을 설명합니다.

본 애플리케이션 노트에서 강조된 검증 데이터는 다음과 같습니다:

• 세포독성 정량화
• 단일 화합물의 다중 암세포 유형 프로파일링
• 증식 및 세포독성의 다중 측정
• 세포독성 및 정지 처리 효과의 하위 집단 분석

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