Application Note: Label-Free, Real-Time Live-Cell Assays for 3D Organoids Embedded in Matrigel^®

오가노이드 기술은 인간 발달 및 질병 모델로서 점점 더 많이 활용되고 있습니다. 이는 오가노이드가 병태생리를 재현하는 구조적, 형태발생적, 기능적 특성을 나타내기 때문입니다. 다양한 연구 분야 및 응용 분야에서 이러한 모델을 성공적으로 활용하기 위해서는 변동성을 줄이는 접근법과 복잡한 세포 모델을 영상화하고 정량화하는 기술적 파이프라인이 필요합니다.

현재 이러한 모델을 안정적으로 특성화하고 시각화하는 기술은 세포 표지(형광 기반 정량화)를 요구하는 등 몇 가지 접근 방식에 의해 제한될 수 있습니다. 이는 어려울 수 있으며 다양한 세포 유형에 적용하기 어려울 수 있습니다.

본 응용 노트에서는 Incucyte^® 생세포 분석 시스템과 Incucyte^® 오가노이드 분석 소프트웨어 모듈을 결합하여 통합된 실시간 무표지 측정법을 통해 오가노이드의 성장 또는 사멸을 시간 경과에 따라 간편하고 효율적으로 평가하는 방법을 제시합니다. 자동화된 소프트웨어는 생리학적으로 적합한 환경에서 내장된 오가노이드를 지속적으로 찾아 분석합니다.

주요 특징:

• 다양한 세포 유형에 걸쳐 Matrigel^®에 내장된 개별 객체를 분할하고, 서로 다른 오가노이드 형태를 운동학적으로 시각화 및 정량화하는 능력이 입증되었습니다.
• 이 글에서는 낭포성 섬유증 막횡단 전도 조절기(CFTR) 기능의 시각화 및 정량화를 위한 이러한 접근 방식의 예를 제시하여, 이를 통해 낭포성 섬유증을 표지자 없이 평가할 수 있도록 합니다.
• 본 연구에서는 96웰 플레이트 형식을 이용하여 약물에 의한 세포 변화를 평가하고 작용 메커니즘을 규명하기 위한 통합적이고 실시간적인 무표지 측정법의 활용을 보여준다.

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