3D 종양 스페로이드의 면역 세포 사멸을 위한 96웰 생세포 분석법

면역관문 억제제, CART, 면역 표적 항체와 같은 면역 치료법은 암 치료에 큰 가능성을 제시합니다. 이러한 치료법을 최적화하기 위해서는 임상 적용을 위한 세포 기반 분석법이 필요합니다.

본 연구에서는 새로운 면역 조절제의 효능을 평가하기 위해 3D 종양 스페로이드를 이용한 영상 기반 면역 세포 사멸 분석법을 개발했습니다. RFP를 발현하는 인간 종양 세포주를 사용하여 96웰 ULA 플레이트에서 스페로이드를 형성했습니다. 그런 다음 면역 세포를 첨가하고 활성화시켜 스페로이드를 사멸시켰습니다. Incucyte^® 생세포 분석법을 이용하여 RFP 형광 감소를 측정함으로써 스페로이드의 생존력을 시간 경과에 따라 (최대 10일) 평가했습니다.

이 방법은 다양한 면역 세포 유형(PBMC, T세포, NK세포)과 항-CD3 및 IL-2를 포함한 활성제를 사용하여 예시되었습니다. ADCC 분석에서 허셉틴은 Her-2를 발현하는 종양 세포를 농도 의존적으로 특이적으로 사멸시켰습니다. 3D ADCC 분석에서는 2D 분석보다 더 높은 농도의 허셉틴이 필요했습니다. 이러한 데이터는 면역 세포 사멸 및 ADCC 분석을 기존의 2D 단일 배양에서 3D 스페로이드 분석으로 확장할 수 있음을 보여주며, 임상 적용 가능성을 높일 수 있는 잠재력을 제시합니다. 이러한 분석법은 새로운 면역 조절제를 찾는 데 매우 유용할 것입니다.