준비 과정: 세포 계대 배양, 증식 및 배양액 오염 방지

세포 배양 배지 선택은 실험 설계에서 가장 중요한 요소 중 하나입니다. 배지 선택은 배양할 세포의 종류와 배양 목적에 따라 달라져야 합니다. 다양한 세포주와 세포 유형은 매우 특정한 성장 조건을 요구하며, 선택한 세포의 성장 조건을 충족하는 다양한 배지 조성물이 시중에 나와 있습니다. 기성 배지를 구입하거나 분말 형태의 배지를 실험실에서 직접 제조할 수 있습니다. 후자의 경우, 물은 세포 배양에 사용하는 배지, 완충액 및 첨가제의 주요 구성 요소이며, 물의 품질은 모든 세포 배양 실험에서 매우 중요한 역할을 합니다.

세포의 건강 상태를 유지하고 실험 간 일관된 반응을 보장하기 위해 오염 물질이 없는 고품질의 물을 사용하십시오.

육안으로 감지할 수 없는 화학 물질이나 기타 생물학적 물질(예: 엔도톡신, 무기 이온, 유기 화합물)로 인한 오염은 세포의 성장, 형태 및 행동에 영향을 미칠 수 있습니다. 일반적인 수돗물에는 1~10 IU/mL의 엔도톡신이 함유되어 있지만, 국제 표준<link>에서는 세포 배양수에 사용되는 물의 엔도톡신 오염 기준을 0.1 IU/mL 미만으로 규정하고 있습니다. 따라서 세포 배양에 사용하는 물에서 엔도톡신을 제거할 수 있는 정수 시스템이 필요합니다. 적절한 정수 시스템을 사용하면 건강한 세포를 배양하여 일관되고 재현 가능한 세포 배양 실험을 수행할 수 있습니다.

부착성 세포주든 부유성 세포주든, 배양된 세포는 정기적으로 계대배양해야 합니다. 하지만 계대배양 과정에서는 배양 플라스크를 열고 세포를 다루며 새로운 배지와 구성 요소를 첨가하기 때문에 오염 문제가 발생할 수 있습니다. 이러한 모든 단계에서 오염 물질이 유입될 가능성이 있습니다.

적절한 무균 기술을 준수하고, 신속하게 작업하며, 최상의 도구와 오염되지 않은 시약을 사용하면 세포 배양에 오염 물질이 유입될 가능성을 줄일 수 있습니다. 특히, 멸균 필터 피펫과 신속하고 효율적인 작업을 가능하게 하는 피펫 팁을 사용하는 적절한 무균 피펫팅 기술이 필수적입니다.

실험이 중단되기 전에 오염을 방지하세요. 세포 배양에서 가장 큰 어려움 중 하나는 오염 위험입니다. 오염은 박테리아, 효모, 곰팡이, 화학 물질, 기타 생물학적 제제, 세포주 간 교차 오염 또는 이들의 복합적인 영향 등 다양한 형태로 발생할 수 있습니다. 오염은 세포의 성장, 형태 및 행동에 영향을 미치고 궁극적으로 실험 결과를 손상시키거나 프로젝트 진행을 지연시킬 수 있습니다.