Cell Function - Phagocytosis Bioparticles

Phagocytosis of Bioparticles® — Incucyte® Phagocytosis Assays

식세포작용이란 무엇인가?

식세포작용은 세포가 고형 물질을 삼켜 세포 내로 흡수하는 특정한 형태의 세포내섭취입니다. 대식세포, 호중구, 미성숙 수지상세포는 면역계의 주요 식세포이며, 이 과정에 특화되어 있습니다. 식세포작용은 미생물을 억제, 사멸시키고 항원 제시를 위해 처리하는 핵심 메커니즘이며, 병원체에 대한 선천 면역 반응의 중요한 측면입니다.

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애플리케이션

Incucyte® 식세포작용 분석법을 소개합니다

배양기 내에서 직접 살아있는 세포의 식균 작용을 시간에 따라 자동으로 정량화할 수 있는 간단한 혼합 및 판독 방식의 이미징 분석법입니다. 이 분석법은 pH에 민감한 접합 프로브를 사용하여 생체 입자의 세포 내 유입을 실시간으로 시각화하고 분석하며, 면역 세포에 의한 그람 양성균, 그람 음성균 또는 효모 유래 병원균의 식균 작용을 모니터링하는 데 이상적입니다.


동영상. Incucyte® 생세포 분석 시스템을 이용한 식세포 작용의 실시간 모니터링.Time-lapse movies acquired using Incucyte® live-cell imaging and analysis showing real-time visualization of pHrodo® Green E. coli Bioparticles® for Incucyte® engulfed by the mouse macrophage cell type J774A.1. The pHrodo® Bioparticles® are phagocytosed and, on entering the acidic environment of the phagosome, increase in fluorescence. Incucyte® integrated image analysis tools enable detection and measurement of the green fluorescent signal over the entire assay time-course and minimize the impact of background fluorescence. Note the dynamic activity of the macrophages and engulfment of bioparticles over time via the formation of phagocytic cups.

애플리케이션 노트

생세포 분석을 이용한 TCID50 가속 측정법

염색 과정이 필요 없는 바이러스 감염성 평가 방법으로 정확도를 높이고, 수동 작업을 줄이며, 배양 시간을 단축합니다.

브로셔

Incucyte® 시약, 소모품 및 소프트웨어

전자책

생세포 분석 핸드북: 6판

라벨 없는 생세포 이미징 및 분석을 위한 인공지능의 힘이 어떻게 연구를 발전시키고 더 심층적인 발견을 이끌어내는지 알아보세요...

cytokine app note

애플리케이션 노트

생세포 분석과 유세포 분석을 단일 워크플로우로 결합하여 면역 세포 사멸 메커니즘에 대한 추가적인 통찰력을 얻으십시오.

분석 개념

  • 대식세포(예: J774A.1 마우스 대식세포) 또는 기타 식세포를 96웰 또는 384웰 마이크로플레이트에 접종합니다.
  • 식세포작용은 Incucyte®용 혼합 및 판독 가능한 멸균 pHrodo® Bioparticles®를 첨가하여 실시간으로 측정됩니다.
  • 세포 형광의 증가는 pHrodo® 바이오입자®가 식세포 내로 유입되었음을 나타냅니다. Incucyte® 자동 이미지 분석을 통해 시간에 따른 식세포 작용의 정량화가 가능합니다.

주요 장점

타임랩스 이미징을 이용한 식세포작용 검증

J774A.1 마우스 대식세포가 pHrodo® Green Bioparticles® for Incucyte®를 4시간 동안 탐식하는 과정을 시간 경과에 따라 시각화한 이미지입니다. 이미지를 통해 세포질에는 형광 점상(식포) 표지 구조물이 존재하지만 핵에는 존재하지 않음을 확인할 수 있습니다.

자동 분석 및 정량화

Incucyte® 소프트웨어는 형광 이미지(분홍색 마스크)를 정확하게 분할하고 배경 형광의 영향을 최소화합니다.

혼합 후 바로 판독 가능한 96/384웰 포맷 - 정착, 냉각, 리프팅 과정 불필요

Incucyte® 식세포작용 분석 빠른 시작 가이드.

일반 프로토콜을 참조하십시오.

높은 감도, 낮은 배경 잡음, 적은 세포 수

반응의 크기는 세포 수와 Bioparticle® 수에 따라 달라집니다.

® J774A.1 마우스 대식세포가 Incucyte®용 pHrodo® 녹색 생체 입자®를 탐식하는 모습(96웰 형식). 웰당 3,000개의 세포만으로도 높은 신호 대 배경 비율을 나타내는 것을 확인할 수 있습니다.

pHrodo® Green Bioparticles® for Incucyte®의 J774A.1 세포에 의한 식세포작용의 시간 경과를 보여주는 플레이트뷰.

그림 6. 사이토칼라신 D, 라트루쿨린 A, 노코다졸에 의한 식세포작용 억제.J774A.1 murine macrophages phagocytosing pHrodo® Green 대장균 Bioparticles® for Incucyte® in the presence of inhibitors.

Incucyte® 식세포작용 분석법과 다른 일반적인 접근법 비교

식세포작용을 평가하는 데 사용되는 일반적인 방법은 종종 단일 지점 분석(예: 고함량 분석(HCA))을 사용하거나, 세포를 들어 올리는 과정(예: 유세포 분석)을 필요로 하거나, 표지된 병원체를 세척/소광하는 과정(예: 플루오레세인 표지)을 필요로 합니다.

Incucyte® 생세포 분석

번호판 판독기

유세포 분석

HCA

엘리사

실시간 세포 시각화

 

통합 분석

 

 

 

섞은 후 바로 읽으세요. 씻거나 담금질할 필요가 없습니다.

 

장기 동역학 측정

 

효과기 세포의 유연한 선택

 

 

 

 

 

고정/들어 올리지 않음

 

 

높은 감도/낮은 배경 잡음

 

 

 

세포 수/생체 입자 수가 적음

 

 

 


주문 정보

주문 정보

pHrodo® Bioparticles® for Incucyte® are fully validated for use with the Incucyte® Live-Cell Analysis System and are sterilized to enable long-term measurements of phagocytosis (0 to >48 hours).

 

 

자료

문헌 및 자료

브로셔

Incucyte® 시약, 소모품 및 소프트웨어

pHrodo® 바이오입자 ®(Incucyte® 제품 가이드)

생체 입자의 식세포작용 ® FAQ

ELRIG 2015 포스터

Incucyte® 화학주성 분석법: 방향성 이동 분석을 위한 새롭고 혁신적인 솔루션

CIMT 2016 포스터

면역요법을 위한 정량적 생세포 영상 분석법: 화학주성, 면역세포 사멸 및 식세포작용

관련 애플리케이션

면역 세포 살해

면역 세포 활성화 및 증식

화학주성 세포 이동 및 침입

관련 출판물

옥스퍼드 대학교 연구진은 Incucyte® 생세포 분석 시스템을 사용하여 기존 방법보다 더 높은 정확도와 민감도로 식세포 작용을 정량화했습니다. Incucyte®는 세포 집단이 드물거나 제한적인 경우에도 일차 식세포에 대한 상세한 시험관 내 연구를 가능하게 합니다. (Kapellos TS, Taylor L, Lee H, Cowley SA, James WS, Iqbal AJ, Greaves DR doi: 10.1016/j.bcp.2016.07.011)