SARS-CoV-2 항체의 다중 분석

세포 분석을 통한 고처리량 스크리닝(HTS)을 이용한 항-SARS-CoV-2 IgG, IgM 및 IgA 검출

다중 및 고처리량 혈청학적 검사를 사용하여 SARS-CoV-2에 대한 항체의 포괄적인 프로필을 얻어 COVID-19 연구를 발전시키세요.

중증급성호흡기증후군 코로나바이러스 2(SARS-CoV-2)는 지속적인 돌연변이와 회피로 인해 계속 존재하고 있습니다. 이 바이러스에 대한 체액성 면역 반응 개발이 보호에 중요하기 때문에, SARS-CoV-2 스파이크 단백질 수용체 결합 도메인(RBD)을 특히 대상으로 하는 항체의 양과 지속 기간을 정확하게 평가할 지속적인 필요성이 있습니다. SARS-CoV-2 스파이크 RBD는 안지오텐신 전환 효소 2(ACE2)에 결합하여 인간 세포로 바이러스 진입을 매개하고, 현재 사용 중인 많은 COVID-19 백신의 주요 표적입니다. SARS-CoV-2 스파이크 RBD에 대한 항체는 일반적으로 강력한 바이러스 중화 활성을 가지며 바이러스에 대한 보호성 면역과 상관관계가 있습니다. SARS-CoV-2 스파이크 RBD에 특이적인 3가지 주요 면역글로불린 이소타입(IgG, IgM 및 IgA)의 항체를 정량하는 혈청학적 검사는 COVID-19 환자와 백신 접종자의 항체 반응을 특성화하고 모니터링하며, 무증상 감염을 감지하고 인구 내 과거 감염 유병률을 조사하는 데 사용될 수 있습니다.

항-SARS-CoV-2 스파이크 RBD IgG, IgM 또는 IgA 항체를 검출하는 여러 방법이 있으며, 여기에는 전통적인 효소결합면역흡착검사(ELISA), 측면유동 면역검사 및 유세포 분석법이 포함됩니다. 그러나 이러한 방법에는 한계가 있습니다:

iQue^® SARS-CoV-2(IgG, IgM 및 IgA) 키트는 96 또는 384웰 플레이트의 단일 웰에서 pg/mL 범위의 항체 검출 수준으로 IgG, IgM 및 IgA 항-SARS-CoV-2 스파이크 RBD 항체를 측정하기 위한 신속하고 강력하며 민감한 혈청학적 검사를 제공합니다. 3가지 항체 이소타입의 복합 검출은 시간과 귀중한 환자 샘플을 절약하고 SARS-CoV-2 자연 감염 또는 COVID-19 백신 접종 후 시간에 따른 체액성 면역 반응의 동적이고 포괄적인 프로필을 제공합니다. 이 키트는 다음과 같은 기존의 문제들을 극복합니다:

정성적 결과만 제공
낮은 민감도와 특이성
노동 집약적일 수 있으며 고처리량 애플리케이션을 지원하지 않을 수 있음
IgG, IgM 및 IgA 항체의 다중 분석을 허용하지 않음
대량의 시약이 필요함

신청

분석 개념

iQue^® SARS-CoV-2 (IgG, IgM 및 IgA) 키트는 바이러스 감염 또는 백신 접종에 대한 면역 시스템의 반응으로 생성된 SARS-CoV-2 스파이크 단백질 RBD에 특이적인 인간 IgG, IgM 및 IgA 항체를 동시에 검출하도록 설계된 비드 기반 면역 분석법입니다.

iQue^® SARS-CoV-2 (IgG, IgM 및 IgA) 키트는 VBR 구성의 iQue^® HTS 플랫폼에서 강력하고 다중 분석을 위해 최적화되었습니다. 인간 혈액 샘플(혈청 및 혈장)의 항-SARS-CoV-2 스파이크 RBD 항체에 대한 정성 및 정량 분석은 간편한 사용을 위한 간소화된 워크플로우와 사전 설정된 템플릿으로 수행됩니다.

기본 워크플로:

희석된 환자 샘플을 96 또는 384-웰 플레이트에 추가
SARS-CoV-2 스파이크 RBD 결합 비드를 추가하여 항-SARS-CoV-2 스파이크 RBD 항체 포집
형광 표지된 항-인간 IgG, IgM 및 IgA 항체를 포함하는 SARS-CoV-2 항체 검출 칵테일 추가
iQue^® HTS 플랫폼(VBR 구성)에서 플레이트 분석

주요 장점

- SARS-CoV-2 스파이크 RBD에 대한 IgG, IgM 및 IgA 항체의 민감하고 동시적인 측정 (자연 감염 또는 백신 접종에 대한 반응)
- 다중 분석법을 통해 단일 웰에서 SARS-CoV-2 스파이크 RBD에 특이적인 세 가지 주요 이소타입(IgG, IgM 및 IgA) 항체의 고처리량 분석을 가능하게 하여 체액성 면역 반응을 종합적으로 분석
- 효율적인 워크플로우로 귀중한 샘플 보존 - 최소 100배 희석된 단 10 µL의 샘플만 필요합니다.

면역 반응의 정확한 평가 획득

자연 감염 또는 백신 접종에 대한 응답으로 유도된 항-SARS-CoV-2 스파이크 RBD IgG, IgM 및 IgA 항체의 민감하고 동시적인 측정.

A. 팬데믹 이전에 수집된 두 개인의 혈청을 음성 대조군(Neg. 1-2)으로 포함했습니다. (B) BNT162b2(화이자-바이오엔텍) COVID-19 백신의 첫 번째(VA-1, VB-1) 및 두 번째(VA-2, VB-2) 접종 전후에 두 개인(VA 및 VB)으로부터 수집된 혈청 분석. 혈청 샘플은 희석제에 1:100으로 희석한 후 삼중 희석 곡선을 생성하기 위해 1:5로 연속 희석했습니다.

생산성 극대화

다중 분석 방법은 실시간 데이터 분석 및 새로운 시각화 도구를 통해 단일 웰에서 SARS-CoV-2 스파이크 RBD에 특이적인 3대 주요 이소타입(IgG, IgM 및 IgA) 항체의 포괄적인 체액성 면역 반응 분석을 가능하게 합니다.

. 혈청 샘플을 검정 희석액에 1:100으로 희석한 후 삼중 반복으로 1:3씩 연속 희석했습니다. COVID-19 음성 개인으로부터 수집된 혈청을 음성 대조군(Neg. Ctl)으로 포함했습니다. 각 색상은 플레이트의 다른 구획에서 반복된 삼중 희석 곡선을 나타냅니다. (A.) 플레이트 배치 (B) 각 웰당 항-SARS-CoV-2 스파이크 RBD IgG 농도의 열 지도 (ng/mL).

귀중한 샘플 보존

간소화된 워크플로우로 귀중한 샘플을 보존합니다.

따라하기 쉬운 단계와 적은 샘플 용량 필요 (혈장/혈청의 단일 10 µL를 최소 100배 희석하여 사용).

자주 묻는 질문

SARS-CoV-2 또는 혈액 병원체에 오염된 샘플을 사용할 때 유세포 분석기를 소독할 때 어떤 주의를 기울여야 합니까?

BSL-3 실험실에서 작업하지 않는 한, COVID-19 환자 샘플은 BSL-2 실험실에서 작업하기 전에 잠재적인 바이러스 오염을 비활성화하도록 처리해야 합니다. 문헌에 보고된 검증된 바이러스 비활성화 방법에는 56°C에서 1시간 동안 가열하거나 특정 화학 세제로 처리하는 것이 포함됩니다. 사용되는 모든 방법에 대해 효과적인 바이러스 비활성화를 확인해야 합니다. 우리의 분석에 사용된 샘플은 실온에서 4% Triton X-100으로 5-10분간 처리하여 비활성화되었습니다. 샘플 수집 후, iQue^® 고처리량 스크리닝(HTS) 세포 분석기는 기본적으로 각 실행 후와 종료 시 자동으로 자체를 청소합니다. 다른 세포 분석 시스템과 마찬가지로, 발생하는 폐기물은 적절한 제염 용액으로 처리한 후 폐기해야 하며, 폐기물 처리는 현지 규정에 따라 수행해야 합니다.

이 키트를 유세포 분석 기계와 함께 사용할 수 있습니까?

이 분석은 iQue^® 고처리량 스크리닝(HTS) 세포 분석 플랫폼과 함께 사용하도록 개발되었습니다 - 보상 조정 및 농도 반응 곡선을 자동 생성하는 사전 정의된 분석 템플릿을 포함합니다. 필요한 낮은 샘플 용량은 iQue^® 고처리량 스크리닝(HTS) 세포 분석 플랫폼에 고유합니다. 특히, 이 분석은 희석된 혈청 또는 혈장 10 µL만 필요하며 - 최종 세척 후 10 µL의 완충액만 추가하여 획득합니다 - iQue^® HTS 플랫폼에서 요구하는 낮은 샘플 용량 덕분입니다. 다른 시스템은 상당히 더 많은 샘플을 필요로 할 수 있습니다.

SARS-CoV-2 변이의 RBD 소스는 무엇입니까?

RBD는 SARS-CoV-2의 원본 / WT 균주로, 현재 백신에서 사용되는 것과 동일합니다.

어떤 농도 범위를 감지할 수 있습니까?

이 키트를 사용하면 사용자가 정성적 또는 정량적으로 분석을 수행할 수 있으며, 일반적으로 낮은 피코그램에서 높은 나노그램 농도까지 감지할 수 있습니다. 예를 들어, 정성적 분석은 많은 수의 샘플에 대한 초기 스크리닝 연구에 유용할 수 있습니다. 정성적 분석의 검출 수준은 30-60 pg/mL로 낮으며, 이는 실제로 COVID-19 음성 혈장 샘플을 기반으로 한 음성 임계값 절단값보다 훨씬 낮습니다. 정량적 분석의 경우, 정량 하한선(LLOQ)이 더 높으며 Ab 이소타입에 따라 약간 다릅니다. 예를 들어, IgG Ab의 정확한 정량을 위한 선형 범위는 키트에 포함된 Ab 표준을 사용하고 96웰 플레이트의 한 행 또는 384웰 플레이트의 한 열에 걸쳐 1:3 연속 희석 곡선을 준비할 때 약 50 ng/mL에서 300 pg/mL 사이입니다.