항 SARS-CoV-2 항체의 다중 분석

세포 계측법을 이용한 고처리량 스크리닝(HTS)으로 항 SARS-CoV-2 IgG, IgM 및 IgA 항체 검출

다중 고처리량 혈청학적 분석법을 사용하여 SARS-CoV-2에 대한 항체 프로필을 종합적으로 확보함으로써 COVID-19 연구를 발전시키십시오.

중증급성호흡기증후군 코로나바이러스 2(SARS-CoV-2)는 지속적인 변이와 회피로 인해 계속해서 존재합니다. 이 바이러스에 대한 체액성 면역 반응의 발달은 보호에 매우 중요하기 때문에, SARS-CoV-2에 대한 항체 반응, 특히 SARS-CoV-2 스파이크 단백질 수용체 결합 도메인(RBD)을 표적으로 하는 항체 반응의 양과 지속 기간을 정확하게 평가하는 것이 지속적으로 요구됩니다. SARS-CoV-2 스파이크 RBD는 안지오텐신 전환 효소 2(ACE2)에 결합하여 바이러스가 인체 세포로 침입하는 것을 매개하며, 현재 사용되는 많은 COVID-19 백신의 주요 표적입니다. SARS-CoV-2 스파이크 RBD에 대한 항체는 일반적으로 강력한 바이러스 중화 활성을 가지며 바이러스에 대한 보호 면역과 상관관계가 있습니다. SARS-CoV-2 스파이크 RBD에 특이적인 항체의 세 가지 주요 동형(IgG, IgM 및 IgA)을 정량화하는 혈청학적 검사는 COVID-19 환자와 백신 접종자 모두에서 항체 반응의 특성 파악 및 지속 기간 모니터링, 무증상 감염 탐지, 그리고 인구 집단 내 과거 감염 유병률 조사에 활용될 수 있습니다.

SARS-CoV-2 스파이크 RBD IgG, IgM 또는 IgA 항체를 검출하는 방법에는 전통적인 효소면역측정법(ELISA), 유동면역분석법 및 유세포분석법 등 여러 가지가 있습니다. 그러나 이러한 방법에는 다음과 같은 한계가 있습니다.

iQue^® SARS-CoV-2(IgG, IgM 및 IgA) 키트는 96웰 또는 384웰 플레이트의 단일 웰에서 IgG, IgM 및 IgA 항-SARS-CoV-2 스파이크 RBD 항체를 측정하는 신속하고 견고하며 민감한 혈청학적 분석법을 제공하며, 항체 검출 수준은 pg/mL 범위입니다. 세 가지 항체 동위형을 모두 동시에 검출함으로써 시간과 귀중한 환자 검체를 절약하고, SARS-CoV-2 자연 감염 또는 COVID-19 백신 접종 후 시간에 따른 체액성 면역 반응의 역동적이고 포괄적인 프로파일을 제공합니다. 이 키트는 다음과 같은 기존 검사법의 문제점을 해결합니다.

정성적인 결과만 제공하십시오.
낮은 민감도와 특이도
노동 집약적일 수 있으며 고처리량 애플리케이션에는 적합하지 않을 수 있습니다.
IgG, IgM 및 IgA 항체의 다중 분석을 허용하지 마십시오.
많은 양의 시약이 필요합니다

애플리케이션

분석 개념

iQue^® SARS-CoV-2(IgG, IgM 및 IgA) 키트는 바이러스 감염 또는 백신 접종에 대한 면역 체계의 반응으로 생성되는 SARS-CoV-2 스파이크 단백질 RBD에 특이적인 인체 IgG, IgM 및 IgA 항체를 동시에 검출하도록 설계된 비드 기반 면역 분석법입니다.

iQue^® SARS-CoV-2(IgG, IgM 및 IgA) 키트는 VBR 구성의 iQue^® HTS 플랫폼에서 강력한 다중 분석에 최적화되어 있습니다. 간소화된 워크플로우와 사용 편의성을 고려한 사전 설정된 템플릿을 통해 인체 혈액 샘플(혈청 및 혈장)에서 항 SARS-CoV-2 스파이크 RBD 항체의 정성 및 정량 분석을 수행할 수 있습니다.

기본 워크플로우:

미리 희석한 환자 검체를 96웰 또는 384웰 플레이트에 넣으세요.
SARS-CoV-2 스파이크 RBD 결합 비드를 추가하여 항-SARS-CoV-2 스파이크 RBD 항체를 포획합니다.
형광 표지된 항인간 IgG, IgM 및 IgA 항체가 포함된 SARS-CoV-2 항체 검출 칵테일을 추가하십시오.
iQue^® HTS 플랫폼(VBR 구성)에서 플레이트를 분석합니다.

주요 장점

- 자연 감염 또는 백신 접종에 의해 유도된 항 SARS-CoV-2 스파이크 RBD IgG, IgM 및 IgA 항체를 민감하고 동시에 측정합니다.
- 다중 분석법을 통해 SARS-CoV-2 스파이크 RBD에 특이적인 항체의 세 가지 주요 동형(IgG, IgM 및 IgA)을 단일 웰에서 대량 분석하여 체액성 면역 반응을 종합적으로 분석할 수 있습니다.
- 간소화된 워크플로우로 귀중한 샘플을 절약할 수 있습니다. 최소 100배 희석한 10µL 샘플 하나만 필요합니다.

면역 반응에 대한 정확한 평가를 얻으십시오.

자연 감염 또는 백신 접종에 의해 유도된 항 SARS-CoV-2 스파이크 RBD IgG, IgM 및 IgA 항체를 민감하고 동시에 측정합니다.

(A) 팬데믹 이전에 채취한 두 명의 혈청을 음성 대조군(Neg. 1-2)으로 포함시켰습니다. (B) BNT162b2(화이자-바이오엔텍) COVID-19 백신 접종 전(VA-0, VB-0), 그리고 1차(VA-1, VB-1) 및 2차(VA-2, VB-2) 접종 후 채취한 두 명의 개인(VA 및 VB)의 혈청을 분석했습니다. 혈청 샘플은 분석 희석액에 1:100으로 희석한 후, 1:5로 3회 반복 희석하여 희석 곡선을 작성했습니다.

생산성을 극대화하세요

다중 분석법은 SARS-CoV-2 스파이크 RBD에 특이적인 항체의 세 가지 주요 동형(IgG, IgM 및 IgA)을 단일 웰에서 대량 분석할 수 있도록 하여 실시간 데이터 분석 및 새로운 시각화 도구를 통해 체액성 면역 반응을 종합적으로 분석할 수 있게 합니다.

혈청 샘플을 분석 희석액에 1:100으로 희석한 후, 1:3으로 3회 반복 희석했습니다. COVID-19 음성인 두 명의 혈청을 음성 대조군(Neg. Ctl)으로 포함했습니다. 각 색상은 플레이트의 서로 다른 사분면에서 반복된 3회 희석 곡선을 나타냅니다. (A) 플레이트 배치도 (B) 웰당 항-SARS-CoV-2 스파이크 RBD IgG 농도(ng/mL)의 히트맵.

소중한 샘플을 보관하세요

간소화된 워크플로우로 귀중한 샘플을 절약할 수 있습니다.

간단한 절차와 적은 양의 검체만 필요합니다(최소 100배 희석한 혈장/혈청 10µL만 필요).

자주 묻는 질문 (FAQ)

SARS-CoV-2 또는 혈액 병원균으로 오염된 검체를 사용할 때 유세포 분석기를 소독할 때 어떤 주의를 기울여야 할까요?

생물안전등급 3(BSL-3) 실험실이 아닌 이상, 코로나19 환자 검체는 생물안전등급 2(BSL-2) 실험실에서 사용하기 전에 잠재적인 바이러스 오염을 제거하기 위한 처리를 해야 합니다. 문헌에는 56°C에서 1시간 동안 가열하거나 특정 화학 세제로 처리하는 등 여러 가지 검증된 바이러스 불활성화 방법이 보고되어 있습니다. 어떤 방법을 사용하든 효과적인 바이러스 불활성화가 확인되어야 합니다. 본 연구에서 사용한 검체는 실온에서 4% Triton X-100 용액에 5~10분간 처리하여 불활성화시켰습니다. 검체 채취 후, iQue^® 고처리량 스크리닝(HTS) 유세포 분석기는 기본적으로 각 실행 후와 종료 시 자동으로 자체 세척됩니다. 다른 유세포 분석 시스템과 마찬가지로, 생성된 폐기물은 폐기 전에 적절한 소독액으로 처리해야 하며, 폐기물 처리는 현지 규정에 따라 수행해야 합니다.

이 키트는 유세포 분석기와 함께 사용할 수 있습니까?

이 분석법은 보정 조정 및 농도 반응 곡선을 자동으로 생성하는 사전 정의된 분석 템플릿을 포함하여 iQue^® 고처리량 스크리닝(HTS) 유세포 분석 플랫폼과 함께 사용하도록 개발되었습니다. 또한, 필요한 시료량이 적다는 점도 iQue^® 고처리량 스크리닝(HTS) 유세포 분석 플랫폼만의 특징입니다. 특히, 이 분석법은 희석된 혈청 또는 혈장 10µL만 필요하며, 최종 세척 후 분석 전에 완충액 10µL만 추가하면 됩니다. 이는 iQue^® HTS 플랫폼에서 요구되는 시료량이 적기 때문입니다. 다른 시스템에서는 훨씬 더 많은 양의 시료가 필요할 수 있습니다.

RBD의 원인은 어떤 SARS-CoV-2 변종인가요?

RBD는 현재 백신에 사용되는 것과 동일한 SARS-CoV-2의 원래/야생형 균주에서 유래했습니다.

어떤 농도 범위까지 검출할 수 있습니까?

이 키트를 사용하면 정성적 또는 정량적 분석을 수행할 수 있으며, 일반적으로 피코그램 단위의 낮은 농도부터 나노그램 단위의 높은 농도까지 검출할 수 있습니다. 예를 들어, 정성 분석은 많은 수의 샘플을 대상으로 하는 초기 스크리닝 연구에 유용할 수 있습니다. 정성 분석의 검출 한계는 30~60 pg/mL 정도로 매우 낮으며, 이는 COVID-19 음성 혈장 샘플을 기준으로 한 음성 판정 기준치보다 훨씬 낮은 값입니다. 정량 분석의 경우, 정량 하한치(LLOQ)는 더 높으며 항체 동위형에 따라 약간씩 다릅니다. 예를 들어, 키트에 포함된 항체 표준을 사용하여 96웰 플레이트의 한 행 또는 384웰 플레이트의 한 열에 걸쳐 1:3 연속 희석 곡선을 작성할 경우, IgG 항체의 정확한 정량을 위한 선형 범위는 약 50 ng/mL에서 300 pg/mL까지입니다.