미토콘드리아 막 전위 분석

Incucyte^® 미토콘드리아 막 전위 분석

미토콘드리아 막 전위(MMP 또는 ΔΨm)는 전자 전달 사슬을 통해 ATP를 합성하는 데 필요한 수소 이온의 전기화학적 전위를 유지하는 필수 구성 요소이며, 미토콘드리아 건강의 중요한 요인으로 입증되었습니다. 정상적인 생리 활동에서 MMP는 비교적 안정적으로 유지됩니다. 그러나 장기간의 교란은 세포 건강과 생존에 유해한 영향을 미치며 다양한 병태생리학적 상태로 이어질 수 있습니다. MMP 모니터링은 미토콘드리아 무결성의 민감하고 조기의 지표를 제공하며, 당뇨병, 암, 신경퇴행성 질환과 같은 병리학적 질병과 관련된 미토콘드리아 기능 장애를 식별하는 데 중요합니다.

MMP를 평가하는 일반적인 분석법은 종종 형태학적 변화로 쉽게 확인할 수 없는 간접적이고 연결된 최종 지점 측정에 의존합니다. Incucyte^® 미토콘드리아 막 전위 분석은 생세포에서 MMP의 일시적이고 장기적인 변화를 실시간으로 감지할 수 있으며, 세포 건강의 추가 측정을 위해 세포 표지, 세포자멸사 또는 세포독성 시약과 다중화할 수 있습니다. 세포 항상성과 질병의 복잡성을 밝히기 위해 MMP의 변화를 지속적으로 추적하세요.

응용

Incucyte^® 미토콘드리아 막 전위 분석 소개

세포 배양 배양기 내에서 실시간으로 MMP의 변화를 자동으로 시각화하고 정량화하는 통합 솔루션입니다. TMRE 및 TMRM 분석과 유사하게, 세포 투과성 Incucyte^® MMP 오렌지 시약은 미토콘드리아 막을 가로지르는 전기화학 경사도에 의해 생성된 ΔΨm에 비례하여 활성 미토콘드리아에 축적됩니다. MMP의 감소는 미토콘드리아 기능 및/또는 무결성의 파괴를 나타내며 세포 사멸의 초기 지표로도 사용될 수 있습니다.

이 분석 키트는 두 가지 대조 화합물을 사용합니다: FCCP는 H+ 이온을 미토콘드리아 막을 가로질러 운반하여 탈분극을 유발하는 언커플링제(형광 감소로 나타남), 그리고 올리고마이신 A는 ATP 합성효소를 억제하여 과분극을 유발하는 억제제(형광 증가로 나타남)입니다.

주요 장점

- 간단한 혼합 및 판독 프로토콜로 미토콘드리아 스트레스의 동역학적 측정
- 라이브 세포 내에서 자동화되고 정량적이며 재현 가능한 MMP 측정 생성 - 세포 배양 인큐베이터 내에서 모두 수행
- 세포 건강과 관련된 대사 변화를 평가하기 위해 세포 사멸 또는 세포 독성 판독값과 함께 시간에 따른 형태학적 변화 시각화

미토콘드리아 스트레스 평가

Incucyte® MMP 오렌지 시약 키트를 활용하여 간단한 믹스 앤 리드 프로토콜로 MMP의 변화를 신속하게 시각화하고 정량화하세요.

라이브 세포의 MMP 변화 측정

라이브 세포에서 자동화된, 정량적이고 재현 가능한 MMP 측정을 생성하세요. 시간에 따른 형광 강도를 측정하여 MMP의 변화를 정량화하세요.

HeLa 세포를 Incucyte^® MMP 오렌지 염료 존재 하에 Vehicle, 캄프토테신, FCCP, 또는 올리고마이신으로 처리하여 시간에 따른 미토콘드리아 막 전위에 대한 화합물의 영향을 모니터링했습니다 (A). 0시간과 40시간의 대조군 및 약물 처리된 웰의 평균 형광 강도 히스토그램은 미토콘드리아 분극의 화합물 유도 변화를 강조합니다 (B). Incucyte^® Cell-by-Cell 분석 소프트웨어를 사용하여 레이블 없는 세포 계수를 수행했습니다 (C). 6시간(Vehicle, FCCP, 올리고마이신) 또는 40시간(캄프토테신)에 획득한 HD 위상/형광 이미지 (D).

형태학적 변화 모니터링 및 세포 건강 시약과 다중 측정

Incucyte^® MMP 오렌지 시약 키트는 시간에 따른 세포 형태 변화를 시각화하는 것 외에도 Incucyte^® Caspase 3/7, Annexin V 또는 Cytotox 염료와 다중화하여 세포자멸사 또는 세포독성을 정량화할 수 있습니다.

HeLa 세포를 Incucyte^® MMP 오렌지 및 Cytotox NIR 염료 존재 하에 단백질 키나아제 억제제 스타우로스포린(SSP)으로 처리하여 미토콘드리아 막 전위와 세포독성을 동시에 평가했습니다 (A). 두 MMP 및 Cytotox NIR 분석의 농도-반응 곡선이 표시됩니다 (24시간 데이터, B). 대조군, 0.3 µM SSP 및 3 µM SSP 처리된 웰의 대표적인 HD 위상 + 형광 이미지 (24시간 시점, C).

주문 정보

제품	수량	카탈로그 번호
인큐사이트 MMP 오렌지 시약 키트	1 키트	4775
인큐사이트 세포별 분석 소프트웨어 모듈	1 모듈	9600-0031

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기술 자료

문헌 및 문서

제품 가이드 – Incucyte^® MMP 오렌지 시약 키트

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자주 묻는 질문

미토콘드리아 막 전위 분석은 어떻게 작동하나요?

TMRE 및 TMRM 분석과 마찬가지로, 세포 투과성 Incucyte^® MMP 오렌지 시약은 미토콘드리아 막을 가로지르는 전기화학 경사에 의해 생성된 ΔΨm에 기반하여 활성 미토콘드리아에 축적됩니다. MMP의 감소는 미토콘드리아 기능 장애 또는 손상을 나타내며, 세포 사멸의 초기 징후로 작용할 수 있습니다.

MMP를 평가하는 것이 왜 그렇게 중요한가?

미토콘드리아 기능의 조절 이상은 당뇨병, 암, 신경퇴행성 질환과 같은 질병과 연관되어 있어, 미토콘드리아의 무결성을 평가할 수 있는 능력은 다양한 병태생리를 이해하는 데 중요할 수 있습니다.

이 분석법을 다른 판독값과 다중화할 수 있는가?

예, Incucyte^® MMP 오렌지 키트는 세포 건강 시약(Incucyte^® Caspase, 3/7, Annexin V 또는 Cytoox 염료 등)과 함께 사용할 수 있으며, 세포 사멸과 세포독성을 평가하고 시간에 따른 세포 형태 변화를 시각화할 수 있습니다.

Incucyte^® MMP 오렌지 시약 키트에는 무엇이 포함되어 있나요?

이 키트에는 Incucyte^® MMP 오렌지 염료와 두 가지 대조 물질이 포함되어 있습니다: FCCP(탈공액제)는 H+ 이온을 미토콘드리아 막을 가로질러 이동시켜 탈분극(형광 감소로 나타남)을 유발하고, Oligomycin A는 ATP 합성효소 억제제로 과분극(형광 증가로 반영됨)을 초래합니다.

ATP 대사 애플리케이션과 MMP 애플리케이션을 단일 실험 분석에서 다중화할 수 있나요?

두 가지 획득 방법(이중 여기/단일 방출을 사용하는 대사)과 Incucyte^® MMP와 Incucyte^® CytoATP가 모두 주황색 채널에서 읽히기 때문에, 이 두 가지 분석을 다중화할 수 없습니다.

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