미토콘드리아 막 전위 측정

Incucyte® 미토콘드리아 막 전위 측정

미토콘드리아 막 전위(MMP 또는 ΔΨm)는 전자 전달 사슬을 통해 ATP를 합성하는 데 필요한 수소 이온의 전기화학적 전위를 유지하는 데 필수적인 요소이며, 미토콘드리아 건강에 중요한 요인으로 알려져 있습니다. 정상적인 생리 활동 하에서 MMP는 비교적 안정적으로 유지됩니다. 그러나 장기간의 교란은 세포 건강과 생존력에 악영향을 미치고 다양한 병리적 질환을 유발합니다. MMP 모니터링은 미토콘드리아의 완전성을 민감하고 조기에 평가할 수 있는 지표이며, 당뇨병, 암, 신경퇴행성 질환과 같은 병리적 질환과 관련된 미토콘드리아 기능 장애를 진단하는 데 매우 중요합니다.

미토콘드리아 막 전위(MMP)를 평가하는 데 사용되는 일반적인 분석법은 형태학적 변화를 통해 쉽게 검증할 수 없는 간접적이고 연속적인 최종 측정값에 의존하는 경우가 많습니다. Incucyte® 미토콘드리아 막 전위 분석법은 살아있는 세포에서 MMP의 일시적 및 장기적 변화를 실시간으로 감지할 수 있으며, 세포 표지, 세포사멸 또는 세포독성 시약과 함께 사용하여 세포 건강 상태를 추가적으로 측정할 수 있습니다. MMP 변화를 지속적으로 추적하여 세포 항상성 및 질병의 복잡성을 규명하십시오.

애플리케이션

Incucyte® 미토콘드리아 막 전위 측정법을 소개합니다

세포 배양기 내에서 실시간으로 미토콘드리아 막 전위(MMP) 변화를 자동으로 시각화하고 정량화하는 통합 솔루션입니다. TMRE 및 TMRM 분석법과 유사하게, 세포 투과성 Incucyte® MMP 오렌지 시약은 미토콘드리아 막을 가로지르는 전기화학적 기울기에 의해 생성된 막 전위(ΔΨm)에 비례하여 활성 미토콘드리아에 축적됩니다. MMP의 감소는 미토콘드리아 기능 및/또는 완전성의 손상을 나타내며, 세포 사멸의 초기 지표로도 사용될 수 있습니다.

이 분석 키트는 두 가지 대조 화합물을 사용합니다. 하나는 미토콘드리아 막을 통해 H+ 이온을 수송하여 탈분극(형광 감소로 나타남)을 유발하는 탈공역제인 FCCP이고, 다른 하나는 ATP 합성효소 억제제로 과분극(형광 증가로 나타남)을 유발하는 올리고마이신 A입니다.

주요 장점

  • - 간단한 혼합 및 판독 프로토콜을 사용하여 미토콘드리아 스트레스의 동역학적 측정을 수행하십시오.
  • - 세포 배양기 내에서 살아있는 세포의 MMP를 자동화되고 정량적이며 재현 가능한 방식으로 측정합니다.
  • - 세포 형태 변화를 시간에 따라 시각화하고, 세포 사멸 또는 세포 독성 측정 결과와 함께 분석하여 대사 변화와 관련된 세포 건강 변화를 평가합니다.


미토콘드리아 스트레스를 평가합니다.

Incucyte® MMP 오렌지 시약 키트를 사용하면 간단한 혼합 및 판독 프로토콜을 통해 MMP 변화를 신속하게 시각화하고 정량화할 수 있습니다.

생세포에서 MMP의 변화를 측정합니다.

살아있는 세포에서 자동화되고 정량적이며 재현 가능한 MMP 측정값을 생성합니다. 시간에 따른 형광 강도 측정을 통해 MMP 변화를 정량화합니다.

HeLa 세포에 Incucyte® MMP 오렌지 염료 존재 하에 Vehicle, Camptothecin, FCCP 또는 Oligomycin을 처리하여 시간에 따른 미토콘드리아 막 전위에 대한 화합물의 효과를 모니터링했습니다(A). 0시간 및 40시간에서의 대조군 및 약물 처리군의 평균 형광 강도 히스토그램은 화합물에 의해 유도된 미토콘드리아 분극 변화를 보여줍니다(B). Incucyte® 세포별 분석 소프트웨어를 사용하여 라벨 없는 세포 계수를 수행했습니다(C). 6시간(Vehicle, FCCP, Oligomycin) 또는 40시간(Camptothecin) 후 획득한 HD 위상/형광 이미지(D).

세포 건강 시약을 사용하여 형태학적 변화를 모니터링하고 다중 분석을 수행하십시오.

Incucyte® MMP 오렌지 시약 키트는 Incucyte® 카스파제 3/7, 안넥신 V 또는 사이토톡스 염료와 함께 사용하여 세포 형태 변화를 시간에 따라 시각화하는 것 외에도 세포 사멸 또는 세포 독성을 정량화할 수 있습니다.

HeLa 세포에 단백질 키나아제 억제제인 스타우로스포린(SSP)을 Incucyte® MMP 오렌지 및 Cytotox NIR 염료와 함께 처리하여 미토콘드리아 막 전위 및 세포 독성에 대한 화합물의 효과를 동시에 평가했습니다(A). MMP 및 Cytotox NIR 분석에 대한 농도-반응 곡선을 보여줍니다(24시간 데이터, B). 대조군, 0.3 µM SSP 및 3 µM SSP 처리군의 대표적인 HD 위상 + 형광 이미지(24시간 시점, C).

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제품 안내서 – Incucyte® MMP 오렌지 시약 키트

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자주 묻는 질문 (FAQ)

TMRE 및 TMRM 분석법과 마찬가지로, 세포 투과성 Incucyte® MMP 오렌지 시약은 미토콘드리아 막을 가로지르는 전기화학적 기울기에 의해 생성된 ΔΨm에 따라 활성 미토콘드리아에 축적됩니다. MMP의 감소는 미토콘드리아 기능 장애 또는 손상을 나타내며, 세포 사멸의 초기 징후로도 활용될 수 있습니다.

미토콘드리아 기능의 조절 장애는 당뇨병, 암, 신경퇴행성 질환과 같은 질병과 연관되어 있으므로, 미토콘드리아의 완전성을 평가하는 것은 이러한 다양한 병태생리를 이해하는 데 매우 중요할 수 있습니다.

네, Incucyte® MMP 오렌지 키트는 Incucyte® 카스파제, 3/7, 안넥신 V 또는 사이톡스 염료와 같은 다른 세포 건강 시약과 함께 사용하여 세포 사멸 및 세포 독성을 평가하고 시간에 따른 세포 형태 변화를 시각화할 수 있습니다.

이 키트에는 Incucyte® MMP 오렌지 염료와 두 가지 대조 물질이 포함되어 있습니다. 하나는 미토콘드리아 막을 통해 H+ 이온을 이동시켜 탈분극(형광 감소로 나타남)을 유발하는 탈공역제인 FCCP이고, 다른 하나는 과분극(형광 증가로 나타남)을 유발하는 ATP 합성효소 억제제인 올리고마이신 A입니다.

아니요. 두 검사의 데이터 획득 방식(이중 여기/단일 방출을 이용한 대사 측정)이 다르고, Incucyte® MMP와 Incucyte® CytoATP 모두 주황색 채널에서 판독되기 때문에 이 두 검사를 동시에 수행할 수 없습니다.