활성화된 T-세포의 세포 확대 및 형태학적 변화를 기반으로 하위 집단 분류. PBMCs를 항-CD3 및 IL-2 또는 대조군으로 처리하고 Incucyte® 생세포 분석 시스템으로 시간에 따라 모니터링했습니다. (A-D) 활성화로 인해 평균 세포 면적과 편심률이 시간 의존적으로 증가합니다. 편심률 변화가 면적 증가에 앞서 발생함을 참고하세요. 세포별 면적 분포(E)와 밀도 플롯(F-H)은 활성화 후 시간에 따른 증가된 이질성과 높은 편심률을 가진 큰 세포 집단의 출현을 강조합니다. 표시된 값은 12개 웰의 평균 ± 표준오차입니다.

(A-C) 세포별 밀도 플롯은 활성화된 T 세포에서 시간과 세포 면적(위상)에 따른 CD71 형광 증가를 보여줍니다. (D) CD71+ 세포의 비율은 활성화에 따라 동적으로 변화하지만, CD4+ 세포는 그렇지 않습니다. (E) 부분 분석은 대형 세포(>100 mm²)와 소형 세포(<110 mm²⁾) 사이에서 CD71 발현의 선호적 상향 조절을 보여줍니다. 이러한 데이터는 활성화 유도 시간 의존적 CD71 발현 증가와 세포 크기와 CD71 사이의 강한 연관성을 입증하며, 활성화 4일 후 대형 세포의 90% 이상이 CD71을 발현합니다.

세 공여자로부터 신선하게 분리된 PBMCs는 유세포 분석법 또는 FabFluor-488 표지 항체를 사용하여 6개의 CD 마커와 IgG 대조군에 대해 특성을 평가했습니다. 세 공여자의 평균값(A) 또는 각 공여자 개별적으로(B) 고려할 때 두 방법 사이에 강한 상관관계가 관찰되었습니다.

A549, SKOV-3 또는 SkBr3 세포는 FabFluor-488 표지 항체를 사용하여 HER2 발현을 특성화했습니다. 이미지(상단 행)와 형광 정량(하단 행)은 A549 세포에서 HER2 발현 부재, SKOV-3 세포에서 불균일한 발현, SkBr3 세포에서 균일하고 높은 발현을 보여주었습니다. 동형 대조군 반응은 음성 집단을 나타냅니다.

HT1080 섬유육종 세포에서 (삽입 링크)를 발현하는 세포의 세포 주기 위상 분포는 시스플라틴 또는 플루오로우라실(5FU) 처리 후 정량화되었습니다. 24시간 후 반응은 세포 이미지에 나타나 있습니다(윤곽선은 Incucyte Cell-by-Cell 분석 소프트웨어로 식별된 개별 세포를 보여줍니다) (A). 시스플라틴 처리 후, G1 위상(녹색 형광)의 세포 비율은 감소(B)하고 S/G2/M 위상(적색 형광)은 농도 및 시간에 따라 증가하며(C), 이는 유사분열을 방해하는 알려진 작용 메커니즘과 일치합니다. 5FU 처리 후, G1 위상의 세포 비율은 증가(E)하고 S/G2/M 위상은 감소(F)하여 5FU의 DNA 합성에 대한 알려진 영향과 일치합니다. 농도 반응 곡선(D&G)은 24시간에 검출 가능한 모든 세포 주기 위상에 대한 화합물의 영향을 보여줍니다.

세포 건강은 Incucyte^® NucLight Red(핵 생존 마커)와 비침습적 Incucyte^® 카스파제 3/7 Green 시약(세포사멸 지표)의 다중 판독으로 결정되었습니다. 세포 이미지는 관련 분류 마스킹과 함께 24시간 반응을 보여줍니다(A & E). 세포 하위 집단은 Incucyte 세포별 분석 소프트웨어 도구를 사용하여 적색 및 녹색 형광에 기반해 분류되었습니다(B & F). CPT 처리 후, 생존 세포 손실을 나타내는 적색 집단 감소, 초기 세포사멸을 나타내는 적색 및 녹색 형광 증가, 후기 세포사멸을 나타내는 녹색 형광 증가가 있었습니다(C). CHX 처리 후에는 세포사멸이 없었습니다(G). 초기 세포사멸 집단의 농도 반응 시간 경과가 표시되었습니다(총 세포 중 적색 및 녹색 형광을 보이는 세포의 비율, D & H). 표시된 값은 3개 웰의 평균 ± 표준오차입니다.