Incucyte^® 생세포 분석용 증식 검사

세포 증식이란 무엇인가?

세포 증식은 정상적인 조직 발달, 재생 및 회복에 필수적인 메커니즘입니다. 그러나 세포 증식의 이상은 악성 변형 및 암 발병으로 이어질 수 있습니다. 세포 증식의 변화와 자극에 대한 세포 분열 능력을 파악하는 것은 종양학 및 줄기세포 연구뿐만 아니라 약물 효능 및 안전성 시험에도 매우 중요합니다.

다양한 유형의 생화학적 세포 증식 분석법이 있지만, 확장 가능하고 정확한 정량화를 위한 몇 가지 어려움이 존재합니다.

지루하고 번거로운 수동 시료 준비
측정값을 단일 시점으로 제한하는 최종점 분석법
동일 세포 내에서 여러 치료법의 효과를 모니터링할 수 없음
처리량 부족으로 인해 연구 대상 치료법에 제약이 있음
대부분은 간접적인 방법이며, 형태학적 변화로 쉽게 확인할 수 없는 인공적인 요인에 영향을 받습니다.

Incucyte^® 생세포 분석 시스템은 시간에 따른 동일 샘플 측정을 위한 다양한 전략을 활용하여 이러한 단점을 극복합니다. 통합된 강력한 소프트웨어 도구와 인공지능(AI)을 사용하거나, 라벨이 없는 접근 방식에 비파괴 시약을 결합하여 마이크로플레이트 수준에서 세포 증식을 정량화하는 것이 그 어느 때보다 쉬워졌습니다.

Incucyte^®의 생세포 분석 솔루션은 다음과 같습니다.

면적(밀집도) 또는 세포 수(개수) 지표를 기반으로 하는 비침습적 영상 측정 방식으로 세포 성장을 측정하고, 이미지와 동영상을 통해 시각적으로 검증합니다.
특정 과학적 질문과 연구 대상 세포 모델에 따라 무표지 분석법 또는 형광 분석법을 선택합니다.
부착성 세포와 비부착성 세포 모두에 대한 연속 생세포 분석법으로, 세포는 표준 조직 배양기 내에서 정지 상태를 유지하는 동안 Incucyte^® 광학 장치가 움직입니다.
동일한 세포 집단 내의 세포들은 환경 제어를 유지하면서 동일한 배양웰을 반복적으로 조사함으로써 시간에 따라 지속적으로 추적된다.
실시간 데이터는 약물 또는 치료 효과의 시간적 차이를 구분하고 실험이 진행되는 동안 의사 결정을 내릴 수 있도록 해줍니다.

Incucyte^® 증식 분석 개념

라벨링 유무에 관계없이 실시간 세포 타임랩스 이미징을 사용하여 세포 증식을 측정하고, 기존의 세포 밀집도 분석 또는 새로운 AI 세포 밀집도 분석 기능을 활용합니다.
장기적인 성장 및 성장 억제 곡선을 손쉽게 생성하고 형태를 모니터링할 수 있습니다.
Incucyte^® Nuclight 시약을 사용하여 살아있는 세포를 표지하고 시간에 따른 실제 세포 수(핵 수) 변화를 직접 측정하십시오. 성장 곡선을 자동으로 분석하고 배가 시간을 외삽하십시오.
Incucyte^® Nuclight 렌티바이러스 시약을 사용하여 녹색, 빨간색, 주황색 또는 NIR을 이용한 공동 배양을 탐색해 보세요.
Incucyte^® Caspase-3/7, Incucyte^® Annexin V 또는 Incucyte^® Cytotox Dyes와 결합하여 세포 증식 판독과 세포 사멸 또는 세포 독성 측정을 동시에 수행할 수 있습니다.

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생세포 분석 핸드북: 6판

라벨 없는 생세포 이미징 및 분석을 위한 인공지능의 힘이 어떻게 연구를 발전시키고 더 심층적인 발견을 이끌어내는지 알아보세요...

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Incucyte^® 증식 분석

Incucyte^® 생세포 분석 시스템은 조직 배양기 내에서 세포 증식 분석을 실시간으로 자동 정량화할 수 있도록 해줍니다.

(1) 라벨 없는, 컨플루언스

세포 밀집도는 이제 두 가지 다른 방식으로 측정할 수 있으며, 두 가지 모두 에 포함되어 있습니다. 첫 번째 방법인 클래식 밀집도는 기존 분할 알고리즘으로, 사용자가 개별 세포 유형 및 실험 조건에 맞게 위상 분할 매개변수를 조정할 수 있습니다. 두 번째 분할 방법인 새로운 AI 밀집도 알고리즘은 다양한 세포 유형과 형태에 적응하도록 설계된 강력한 AI 기반 분석으로, 사용자 입력을 최소화합니다.

Incucyte^® 기본 분석 소프트웨어와 AI 세포 밀집도 분할 기능을 사용하여 세포 밀집도 이미지 마스크(노란색)로 SKOV3 세포의 증식을 실시간으로 모니터링합니다.

(2) 라벨 없는 직접 세포 계수

이 방법을 사용하면 시간에 따른 위상 객체 수를 세어 세포 증식을 정량화할 수 있습니다. 개별 세포를 식별함으로써 배양액이 밀집될 때까지 라벨 없이 세포 수를 셀 수 있습니다. 또한 크기, 모양 및 형광 강도와 같은 특성을 기반으로 세포를 하위 집단으로 분류할 수 있습니다.

이 기능은 부착 세포 집단의 동역학적 변화를 객관적으로 추적할 수 있도록 해주는 추가 기능으로 제공됩니다.

Incucyte^® 세포별 분석 소프트웨어 모듈(노란색으로 표시된 마스크)을 사용하여 NALM6 세포의 증식을 실시간으로 모니터링합니다.

(3) 형광 표지, 직접 세포 계수

세포 증식은 시간에 따른 형광 핵의 수를 세어 정량화함으로써 실제 세포 성장률을 구합니다. 세포에는 핵에만 특이적으로 결합하는 비파괴적인 형광 표지자(예: Incucyte^® Nuclight Green Lentivirus)를 사용합니다. 공동 배양에서는 서로 다른 표지자를 조합하여 최대 세 가지 세포 유형의 증식을 동시에 측정할 수 있습니다.

Incucyte^® Nuclight Green, Nuclight Orange 또는 Nuclight NIR 렌티바이러스를 안정적으로 발현하는 HT-1080 세포의 증식을 Incucyte^® 세포별 분석 소프트웨어 모듈을 사용하여 실시간으로 모니터링하십시오.

Incucyte^® 증식 분석의 주요 장점

라벨링 없이 AI 기반 알고리즘을 사용하여 융합 정도를 측정하고, 직관적인 소프트웨어 분석을 통해 증식 변화를 정량화하세요.
고처리량 화합물 테스트를 위해 – 세포 건강 및 증식에 대한 실시간 측정은 약물, 배양 조건 또는 유전자 변형이 세포 성장 또는 생존력에 미치는 영향을 연구하는 데 필수적입니다.
– Incucyte^® 증식 분석 키트와 Incucyte^® 세포 건강 시약을 단일 배양 또는 공동 배양에서 실시간 동역학 측정을 사용하여 결합하십시오.

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Incucyte 증식 관련 논문 보기^®

AI 기반 알고리즘을 사용하여 세포 밀도를 측정하고, 라벨 없이 세포를 식별 및 분할합니다.

라벨링이 필요 없는 직관적인 소프트웨어 분석을 통해 세포 증식 변화를 정량화하세요.

이 소프트웨어에는 세포 밀집도를 측정하는 두 가지 도구, 즉 AI 세포 밀집도 분석과 기존 세포 밀집도 분석이 포함되어 있습니다. 또한 Incucyte^® 기본 분석 소프트웨어의 기존 세포 밀집도 분석 정의를 사용하면 형광 이미지 획득 및 세포 건강 또는 생존력 분석도 가능합니다.

AI 컨플루언스 분석은 다양한 세포 유형으로 학습된 신경망을 기반으로 하며, 위상차 현미경 이미지에서 세포를 매우 정확하게 분할하기 위한 간단하고 객관적이며 반복 가능한 워크플로우를 최소한의 사용자 입력으로 제공합니다.

클래식 컨플루언스 분석을 통해 사용자는 개별 세포 유형 및 실험 조건에 맞춰 위상 분할 매개변수를 세밀하게 조정하여 배경과 정확하게 구분할 수 있습니다.

AI 기반 컨플루언스 분석은 효율적이고 객관적인 분석을 제공합니다(A 워크플로). 기존 컨플루언스 분석은 실험 조건에 기반한 사용자 정의 세분화를 활용합니다(B 워크플로).

A549, MDA-MB-231, SKOV3 및 HT-1080 세포를 96웰 플레이트에 다양한 밀도(0.5~10,000개 세포/웰)로 접종했습니다. 고해상도(HD) 위상차 현미경 이미지를 2시간 간격으로 촬영하고 4일 동안 세포 증식을 측정했습니다. 노란색 윤곽선은 AI 컨플루언스 분할 영역을 나타내며, 플레이트 보기에서는 4일 동안의 컨플루언스 비율(%)을 보여줍니다.

고처리량 화합물 테스트를 위한 세포 계수/증식 측정 수행

약물, 배양 조건 또는 유전자 변형이 세포 성장이나 생존력에 미치는 영향을 연구하려면 세포 건강 및 증식에 대한 실시간 측정이 필수적입니다. Incucyte^® 세포별 분석 소프트웨어 모듈의 형태학적 분석 기능을 사용하면 부착성 세포와 비부착성 세포 모두에서 개별 세포를 식별하고 라벨 없이 정확한 세포 수를 계산할 수 있습니다.

Incucytle Label-free-count-adherent-nonadherent-cells

부착성 Incucyte^® Nuclight Red A549 세포 또는 비부착성 Incucyte^® Nuclight Red Jurkat 세포를 Incucyte^® 세포별 분석 소프트웨어 모듈을 사용하여 시간에 따라 분석했습니다. Red Object Count를 사용하여 Incucyte^®의 라벨 없는 세포 계수 방법을 검증했습니다. 이미지는 세포별 분석을 사용한 개별 세포 마스킹을 보여줍니다. 다양한 세포 밀도에 따른 Phase Count 및 Nuclight Red Count의 시간 경과는 라벨 없는 데이터와 형광 데이터의 중첩을 보여줍니다. 이 검증은 다양한 세포 유형에 대해 반복되었습니다(데이터는 표시되지 않음). 표시된 값은 4개 웰에 대한 평균 ± 표준오차입니다.

Incucyte-Cell-Proliferation-Drugs-screening

다양한 약리학적 제제를 동시에 평가하기 위해 문헌상 표준 화합물 16종(표 1)을 384웰 플레이트 형식으로 HT-1080 세포에 적용하였다.

Incucyte^® Nuclight Green HT-1080 세포에 16가지 화합물을 처리하고, 11개 지점의 농도-반응 곡선을 각각 두 번씩 측정하였다(왼쪽에서 오른쪽으로 고농도에서 저농도 순으로 색상이 다름). 15번 열과 16번 열은 각각 용매(0.5% DMSO)와 CHX(3 μM) 대조군이다. 특정 화합물(예: J, M, O행)은 세포 증식을 농도 의존적으로 강력하게 억제하는 반면, 다른 화합물(예: A, P행)은 효과가 약하거나 활성이 없음을 알 수 있다. 가로축: 시간(0-72시간), 세로축: 웰당 형광체 개수(0-3800).

세포 증식을 정량화하고 다른 세포 건강 염색 시약과 함께 다중 분석을 수행합니다.

Incucyte^® 증식 분석법을 Incucyte^® 세포독성 분석법, Incucyte^® Annexin V 또는 Incucyte^® Caspase 3/7 염료와 결합하여 세포독성/세포사멸을 다중으로 측정하십시오. 세포독성 및 세포증식 억제 치료 효과를 쉽게 구분할 수 있습니다.

Incucytle Caspase3-7--Annexin-V-signals -en-L-Sartorius

Incucyte^® 생세포 분석 시스템에서 두 가지 지표(Caspase-3/7 및 Annexin V)를 통해 세포 사멸을 확인했습니다. 참고: 이 데이터는 예시로 제시된 것이며, 본 인터뷰에서 언급된 연구와는 관련이 없습니다.

세포 사멸의 시간 경과를 자동으로 측정하고, 라벨 없는 세포 밀집도 측정값과 상관관계를 분석하여 세포 집단 내 세포 사멸 비율(세포 사멸 지수)을 추정합니다.

주문 정보

Incucyte^® Nuclight 생세포 표지 시약은 Incucyte^® 생세포 분석 시스템과 함께 사용하도록 검증되었습니다. 이 시약은 Incucyte^® Caspase 3/7, Incucyte^® Annexin V 또는 Incucyte^® Cytotox 염료와 함께 사용하여 동일한 웰에서 세포 사멸 및 세포 독성을 다중으로 측정할 수 있습니다.

제품	수량	카탈로그 번호.
Incucyte^® 뉴클라이트 레드 렌티바이러스(puro) 2.0	0.6mL	BA-04887
Incucyte^® 뉴클라이트 그린 렌티바이러스(puro) 2.0	0.6mL	BA-04888
Incucyte^® Nuclight Red Lentivirus (bleo) 2.0	0.6mL	BA-04889
Incucyte^® 뉴클라이트 그린 렌티바이러스(bleo) 2.0	0.6mL	BA-04890
Incucyte^® 뉴클라이트 오렌지 렌티바이러스(puro) 2.0	0.6mL	BA-04891
Incucyte^® 뉴클라이트 래피드 그린 염료	50μg	BA-04902
Incucyte^® 뉴클라이트 래피드 레드 염료 2.0	50μg	BA-04903
Incucyte^® 뉴클라이트 래피드 오렌지 염료	50μg	BA-04904
	0.2 µL	4805
Incucyte^® 뉴클라이트 래피드 NIR 염료	50 µL	4804
IncucyteCaspase-3/7 녹색 염료^®	20 μL	4440
IncucyteCaspase-3/7 적색 염료^®	20μL	4704
Incucyte^® 카스파제-3/7 대사용 염료	20μL	4776
Incucyte^® Annexin V 녹색 염료	1 바이알	4642
Incucyte^® Annexin V 적색 염료	1 바이알	4641
Incucyte^® Annexin V 오렌지 염료	1 바이알	4759
Incucyte^® Annexin V NIR 염료	1 바이알	4768
Incucyte^® 사이토톡스 레드 염료	5μL x 5	4632
Incucyte^® 사이토톡스 그린 염료	5μL x 5	4633
Incucyte^® 사이토톡스 NIR 염료	100 μL	4846
Incucyte^® 세포별 분석 소프트웨어 모듈	1모듈	9600-0031
Incucyte^® 고급 라벨 없는 분류 분석 소프트웨어 모듈	1모듈	BA-04867