Incucyte® 증식 분석을 통한 생세포 분석

세포 증식이란 무엇인가?

증식은 정상 조직의 발달, 재생 및 갱신을 위한 필수적인 메커니즘입니다. 그러나 세포 증식의 이상은 악성 전환과 암 병리학을 야기할 수 있습니다. 증식의 변화와 자극에 대한 세포의 분열 능력을 감지하는 것은 종양학, 줄기세포 연구 및 약물 효능과 안전성 테스트에서 매우 중요합니다.

다양한 생화학적 세포 증식 분석 방법이 있지만, 견고한 정량화를 위한 확장 가능한 방법을 제한하는 과제들이 존재합니다:

지루하고 수동적인 샘플 준비
단일 시점으로 측정을 제한하는 종말점 분석
동일한 세포 내에서 다중 처리 효과를 모니터링할 수 없는 한계
처리량 부족으로 인한 연구 가능한 처리의 제한
대부분은 간접적이며 형태학적 변화로 쉽게 확인할 수 없는 인공물의 영향을 받습니다.

Incucyte^® 생세포 분석 시스템은 동일한 샘플을 시간에 따라 측정하는 여러 전략을 사용하여 이러한 단점을 완화합니다. 통합된 강력한 소프트웨어 도구와 인공지능(AI)을 사용하거나, 이 라벨 프리 접근법을 비방해성 시약과 결합하여 마이크로플레이트 수준에서 세포 증식을 정량화하는 것이 그 어느 때보다 쉬워졌습니다.

Incucyte^® 생세포 분석 솔루션에는 다음이 포함됩니다:

영역(밀집도) 또는 세포 수(개수) 지표를 기반으로 한 비침습적이고 이미지 기반의 세포 성장 측정으로, 이미지와 동영상을 통해 시각적으로 검증됩니다
특정 과학적 질문과 연구 중인 세포 모델에 따라 라벨 없는 또는 형광 분석법 선택
표준 조직 배양 배양기 내부에서 세포가 정지된 상태로 유지되는 부착성 및 비부착성 세포 모두에 대한 연속적인 생세포 분석
동일한 집단 내 세포를 환경 제어 손실 없이 동일한 웰을 반복적으로 조사하여 지속적으로 추적
실시간 데이터로 약물 또는 처리 효과의 시간적 차이를 구분하고 실험 진행 중 의사결정 가능

인큐사이트^® 증식 분석 개념

라이브 셀 타임랩스 이미징을 사용하여 레이블 유무와 관계없이 클래식 컨플루언스 분석 또는 새로운 AI 컨플루언스 분석으로 세포 증식 측정
장기 성장 및 성장 억제 곡선을 쉽게 생성하고 형태 모니터링
인큐사이트^® 핵광 시약을 사용하여 라이브 셀 레이블링으로 실제 세포 수(핵 수)의 변화를 직접 측정. 자동으로 성장 곡선 분석 및 배가 시간 추정
녹색, 빨간색, 주황색 또는 NIR Incucyte^® Nuclight 렌티바이러스 시약을 사용하여 공동 배양 탐색
Incucyte^® Caspase-3/7, Incucyte^® Annexin V 또는 Incucyte^® Cytotox 염료와 결합하여 세포자멸사 또는 세포독성 측정을 통한 다중 증식 판독

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인공지능의 힘으로 라벨 없는 라이브 세포 이미징 및 분석이 연구를 앞으로 나아가게 하고 더 깊은 발견을 이끌어내는 방법을 알아보세요...

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Incucyte^® 증식 분석

Incucyte^® 생세포 분석 시스템은 조직 배양 배양기 내에서 세포 증식 분석을 실시간으로 자동 정량화할 수 있게 해줍니다:

(1) 레이블 없음, 컨플루언스

컨플루언스는 이제 두 가지 다른 방법으로 측정할 수 있으며, 두 방법 모두 포함되어 있습니다. 첫 번째 방법인 클래식 컨플루언스는 기존의 분할 알고리즘으로, 사용자가 개별 세포 유형 및 실험 조건에 맞게 위상 분할 매개변수를 조정할 수 있습니다. 두 번째 분할 방법인 새로운 AI 컨플루언스 알고리즘은 사용자 입력을 줄이면서 다양한 세포 유형 및 형태에 적응하도록 설계된 강력한 AI 기반 분석입니다.

Incucyte^® 기본 분석 소프트웨어의 AI 컨플루언스 분할을 사용하여 황색(Yellow) 컨플루언스 이미지 마스크로 SKOV3 세포의 실시간 증식을 모니터링합니다.

(2) 라벨 없는, 직접 세포 계수

해당 방법을 사용하면, 세포 증식을 시간에 따른 위상 객체 수를 계산하여 정량화할 수 있습니다. 개별 세포를 식별함으로써, 배양 상태가 밀집해질 때까지 라벨 없는 계수를 달성할 수 있습니다. 또한 크기, 형태, 형광 강도와 같은 특성을 기반으로 세포를 하위 집단으로 분류할 수 있습니다.

이 모듈은 부착성 세포 집단을 운동학적으로 객관적으로 추적할 수 있는 추가 기능으로 제공됩니다.

Incucyte^® 세포별 분석 소프트웨어 모듈을 사용하여 NALM6 세포의 증식을 실시간으로 모니터링합니다 (마스크는 노란색으로 표시됨).

(3) 형광 표지, 직접 세포 계수

세포 증식은 시간에 따른 형광 핵의 수를 계산하여 실제 세포 성장률을 제공합니다. 세포는 핵 제한적이고 방해하지 않는 형광 표지(예: Incucyte^® Nuclight Green 렌티바이러스)로 표지됩니다. 공동 배양에서는 서로 다른 표지를 조합하여 최대 3개 세포 유형의 증식을 동시에 측정할 수 있습니다.

Incucyte^® Cell-by-Cell 분석 소프트웨어 모듈을 사용하여 Incucyte^® Nuclight Green, Nuclight Orange 또는 Nuclight NIR 렌티바이러스를 안정적으로 발현하는 HT-1080 세포의 증식을 실시간으로 모니터링합니다.

Incucyte^® 증식 분석의 주요 장점

AI 기반 알고리즘을 사용한 라벨 프리 컨플루언스 측정 – 직관적인 소프트웨어 분석으로 증식 변화 정량화
고처리량 화합물 테스트를 위한 – 약물, 배양 조건 또는 유전적 변형이 세포 성장이나 생존에 미치는 영향을 연구하는 데 필수적인 실시간 세포 건강 및 증식 측정
– Incucyte^® 증식 분석과 Incucyte^® 세포 건강 시약을 실시간 동역학 측정을 사용하여 단일 또는 공동 배양에서 결합

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Incucyte 증식 논문 보기^®

AI 기반 알고리즘을 사용하여 라벨 없이 세포 식별 및 분할

라벨 없는, 직관적인 소프트웨어 분석을 통해 증식 변화 정량화

Incucyte^® 기본 분석 소프트웨어에는 컨플루언스를 측정하는 두 가지 다른 도구가 포함되어 있습니다: AI 컨플루언스 분석과 클래식 컨플루언스 분석. 형광 이미지 획득 및 세포 건강 또는 생존력 분석도 Incucyte^® 기본 분석 소프트웨어, 클래식 컨플루언스 분석 정의와 함께 사용 가능합니다.

AI 컨플루언스 분석은 다양한 세포 클래스에 대해 훈련된 신경망을 기반으로 하며, 위상차 이미지에서 세포를 고도로 정확하게 분할하기 위해 최소한의 사용자 입력으로 간단하고 객관적이며 반복 가능한 워크플로우를 제공합니다.

클래식 컨플루언스 분석은 사용자가 개별 세포 유형 및 실험 조건에 대한 위상 분절 매개변수를 세분화하여 배경을 정확하게 구분할 수 있도록 합니다.

AI 기반 컨플루언스 분석은 효율적이고 객관적인 분석을 제공합니다 (A 워크플로). 클래식 컨플루언스 분석은 실험 조건에 기반한 사용자 정의 분절을 통합합니다 (B 워크플로).

A549, MDA-MB-231, SKOV3 및 HT-1080 세포를 96웰 플레이트에 0.5 - 10K 세포/웰의 밀도 범위로 파종했습니다. 고화질(HD) 위상차 이미지를 2시간마다 획득하였고, 세포 증식을 4일 동안 측정했습니다. 노란색 윤곽은 AI 컨플루언스 분할을 나타내며, 플레이트 뷰 보고서는 4일 동안의 % 컨플루언스를 보여줍니다.

고성능 화합물 테스트를 위한 세포 계수/증식 수행

약물, 배양 조건 또는 유전적 변형이 세포 성장이나 생존력에 미치는 영향을 연구하기 위해서는 실시간 세포 건강 및 증식 측정이 필수적입니다. Incucyte^® 세포별 분석 소프트웨어 모듈의 형태학적 분석을 통해 부착성 또는 비부착성 세포 모듈에서 개별 세포를 식별하고 라벨 없는 정확한 세포 계수를 생성할 수 있습니다.

다양한 밀도의 부착성 Incucyte^® Nuclight Red A549 또는 비부착성 Incucyte^® Nuclight Red Jurkat 세포를 Incucyte^® 세포별 분석 소프트웨어 모듈로 시간에 따라 분석했습니다. Red Object Count를 사용하여 Incucyte^®의 라벨 없는 세포 계수 방법을 검증했습니다. 이미지는 세포별 분석을 사용한 개별 세포 마스킹을 보여줍니다. 밀도에 따른 위상 계수 및 Nuclight Red 계수의 시간 경과는 라벨 없는 데이터와 형광 데이터의 오버레이를 보여줍니다. 이 검증은 다양한 세포 유형에서 반복되었습니다(데이터 미표시). 표시된 값은 4개 웰의 평균 ± 표준 오차입니다.

많은 약리학적 작용제를 동시에 평가하기 위해 16개의 문헌 표준 화합물(표 1)을 HT-1080 세포에 384-웰 형식으로 적용했다.

Incucyte^® Nuclight Green HT-1080 세포를 16가지 화합물로 처리하고, 11점 농도-반응 곡선을 이중으로 수행했습니다(서로 다른 색상, 왼쪽에서 오른쪽으로 고농도에서 저농도). 15열과 16열은 각각 용매(0.5% DMSO)와 CHX(3 μM) 대조군입니다. 일부 화합물(예: J열, M열, O열)의 강력한 농도 의존적 세포 증식 억제와 다른 화합물(예: A열, P열)의 약한 효과/비활성을 참고하세요. 횡축: 시간(0-72시간), 종축: 웰당 형광 객체 수(0-3800).

증식 정량화 및 다른 세포 건강 염료와 다중화

Incucyte^® 증식 분석을 Incucyte^® 세포독성, Incucyte^® Annexin V 또는 Incucyte^® Caspase 3/7 염료와 결합하여 세포독성/세포사멸의 다중 측정을 수행할 수 있습니다. 세포독성 및 세포정지 처리 효과를 쉽게 구별할 수 있습니다.

세포자멸사 사멸의 Incucyte 생세포 분석 시스템에서 두 가지 판독값(Caspase-3/7 및 Annexin V)을 통한 확인. 참고: 데이터는 예시로 제시되었으며 이 인터뷰에서 언급된 연구와 관련이 없습니다.

세포자멸사 사멸의 시간 경과를 자동으로 결정하고 라벨 없는 밀집도 측정과 상관관계를 분석하여 세포 집단 내 세포자멸사 세포의 비율(세포자멸사 지수)을 추정합니다.

주문 정보

Incucyte^® Nuclight 시약은 생세포 표지에 대해 Incucyte^® 생세포 분석 시스템과 함께 사용하도록 검증되었습니다. 이들은 동일한 웰에서 세포자멸사와 세포독성의 다중 측정을 위해 Incucyte^® Caspase 3/7, Incucyte^® Annexin V 또는 Incucyte^® Cytotox 염료와 결합될 수 있습니다.

Product	Qty.	Catalog. No.
Incucyte^® Nuclight Red 렌티바이러스 (puro) 2.0	0.6 mL	BA-04887
Incucyte^® Nuclight 그린 렌티바이러스 (퓨로) 2.0	0.6 mL	BA-04888
Incucyte^® Nuclight 레드 렌티바이러스 (블레오) 2.0	0.6 mL	BA-04889
Incucyte^® 뉴클라이트 그린 렌티바이러스 (블레오) 2.0	0.6 mL	BA-04890
Incucyte^® 뉴클라이트 NIR 렌티바이러스 (퓨로)	0.2 µL	4805
Incucyte^® 핵광 래피드 레드 염료	50 µL	4717
Incucyte^® 핵광 래피드 NIR 염료	50 µL	4804
Incucyte^® 뉴클라이트 오렌지 렌티바이러스 (퓨로) 2.0	0.6 mL	BA-04891
Incucyte^® 카스파제-3/7 그린 염료	20 μL	4440
Incucyte^® 카스파아제-3/7 레드 염료	20 uL	4704
Incucyte^® 대사를 위한 카스파아제-3/7 염료	20 uL	4776
Incucyte^® 어넥신 V 그린 염료	1 vial	4642
Incucyte^® 어넥신 V 레드 염료	1 vial	4641
Incucyte^® 애녹신 V 오렌지 염료	1 vial	4759
Incucyte^® 애녹신 V NIR 염료	1 vial	4768
인큐사이트^® 사이토톡스 레드 염료	5 μL x 5	4632
인큐사이트^® 사이토톡스 그린 염료	5 μL x 5	4633
Incucyte^® NIR 세포독성 염료	100 μL	4846
Incucyte^® 세포별 분석 소프트웨어 모듈	1 module	9600-0031
Incucyte^® 고급 라벨 프리 분류 분석 소프트웨어 모듈	1 module	BA-04867