항체 스크리닝

항체 발견 프로그램은 표적 반응성 후보를 신속하게 식별하고 특성화해야 합니다. 이 사례 연구는 iQue® 고처리량 스크리닝(HTS) 세포 분석 플랫폼을 사용하여 표적 세포주 생성, 마우스 혈청 평가 및 하이브리도마 라이브러리 스크리닝을 수행할 수 있음을 보여줍니다.

항체 스크리닝 응용 프로그램

세포 표면 표적 항원으로 형질전환된 클론의 신속한 평가. 높은 수준의 표적 항원을 발현하는 건강한 클론을 선택하면 다운스트림 하이브리도마 스크리닝에서 최적의 성능을 보장할 수 있습니다.

생산성 향상

목표 항원의 높은 표면 발현을 위해 엔지니어링된 세포 클론 400개 스크리닝

1시간 내에 5 x 96 웰 플레이트 실행 및 분석

강력한, 다중 스크리닝 분석

다중 세포 기반 분석은 건강한 성장을 하고 높은 수준의 표면 항원을 발현하는 세포주를 단일 단계로 스크리닝할 수 있게 합니다.

결과의 빠르고 쉬운 시각화

타겟 항원을 고발현하고 높은 세포 수로 성장한 클론을 프로필 맵으로 시각화하세요.

타겟 세포주 생성의 스크린 결과 시각화

iQue Forecyt® 소프트웨어를 사용하여 스크린 결과를 시각화했습니다. 세포는 타겟 항원을 암호화하는 렌티바이러스로 형질전환되었고, 선택적 압력 하에서 배양되었으며, 96웰 플레이트로 분류되었습니다. 세포 성장 후, 세포 분취액을 분석 플레이트로 이동시키고 해당 항원에 특이적인 형광 표지된 항체를 사용하여 세포 표면 항원 발현을 테스트했습니다. iQue® 고처리량 스크리닝 세포측정 플랫폼을 사용했습니다. 세포 수는 세포 성장의 지표로 동시에 측정되었습니다.

프로필 맵은 높은 수의 세포와 세포 표면에 높은 수준의 타겟 항원을 발현하는 웰을 보여줍니다.

플레이트 뷰는 세포 표면의 타겟 항원 발현 수준에 대한 세부 정보를 보여줍니다. 양성 클론을 쉽게 시각화할 수 있도록 형질전환되지 않은 대조군 세포의 발현 데이터가 겹쳐져 있습니다.

대상 항원에 대해 높은 수준의 항체를 생성하는 면역 마우스를 식별하기 위한 대규모 세포 기반 실험. 수십 마리의 면역 마우스의 혈청을 동시에 테스트하면 최적의 항체 반응성을 가진 하이브리도마 생성 성공 가능성이 높아집니다.

생산성 향상

36마리의 면역 마우스 혈청을 세포 표면 대상 항원에 대한 결합력 테스트

마우스의 면역 전후 혈청을 8배 희석하여 중복 검사했습니다.

강력한, 다중 스크리닝 분석

다중 세포 기반 분석법은 다른 항원이 아닌 표적 항원에 결합하는 혈청을 단일 단계로 스크리닝할 수 있게 합니다.

결과의 빠르고 쉬운 시각화

마우스 혈청의 높은 역가 항체를 시각화하기 위해 열 지도를 사용하여, 대상 항원에는 결합하지만 다른 항원에는 결합하지 않는 항체를 시각화합니다.

마우스 혈청 평가를 위한 스크린 결과 시각화

iQue Forecyt® 소프트웨어의 열 지도 기능을 사용하여 테스트 결과를 시각화했습니다. 3개의 세포주를 형광 세포 인코딩 염료로 색상 코딩하고, 함께 혼합한 후 384 웰 플레이트의 웰에 분주했습니다. 각 웰에 혈청 샘플을 추가한 후 형광 검출 항체를 더하고, 플레이트를 iQue® 고처리량 스크리닝(HTS) 세포 분석 플랫폼으로 분석했습니다. 대상 항원으로 면역 처리 전후의 36마리 마우스의 혈청을 8배 희석하여 2회 반복 테스트했습니다.

항체 결합에 대한 히트맵은 대조군 세포, 표적 항원 발현 세포, 관련되지만 무관한 항원을 발현하는 세포의 결과를 보여줍니다.

대조군 항원이 아닌 표적 항원에 대한 결합을 동시에 검사하는 고처리량, 다중 스크리닝. 전체 스크리닝과 데이터 분석은 하루 만에 완료되었습니다.

생산성 향상

2마리의 면역 마우스로부터 스크리닝된 9,600개의 하이브리도마 클론

1일 내에 실행 및 분석된 25 x 384 웰 플레이트

강력한, 다중 스크리닝 분석

다중 세포 기반 분석법은 다른 항원이 아닌 표적 항원에 결합하는 항체를 단일 단계로 스크리닝할 수 있게 합니다.

결과의 빠르고 쉬운 시각화

28,800개의 데이터 포인트를 즉시 결합하고 구속력 있는 지표로 처리했습니다.

타겟 항원에는 결합하지만 대조군 항원에는 결합하지 않는 53개의 히트를 시각화했습니다.

하이브리도마 라이브러리 스크리닝 결과의 시각화

iQue Forecyt® 소프트웨어의 파노라마 기능을 사용하여 전체 스크리닝 결과를 시각화했습니다. 3개의 세포주를 형광 셀 인코더 염료로 색상 코딩하여 혼합하고 384 웰 플레이트의 웰에 분주했습니다. 각 웰에 하이브리도마 상층액을 추가한 후 형광 검출 항체를 추가했습니다. 대상 항원을 발현하는 세포로 면역된 2마리의 마우스로부터 9,600개의 하이브리도마를 테스트했으며, 전체 스크리닝은 1일 만에 완료되었습니다.

대조군 세포, 대상 항원 발현 세포, 관련되지만 무관한 항원 발현 세포에 대한 항체 결합 결과를 보여주는 히트맵(빨간색)

3가지 세포 유형에 대한 결합 결과를 결합한 프로필 맵(파란색)으로, 무관한 항원이나 음성 대조군 세포가 아닌 대상 항원 발현 세포에 결합하는 항체를 보여줍니다.

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약물 발견 및 개발 과정에서 생체분자 결합 상호작용을 완전히 이해하기 위해서는 결합 메커니즘과 안정성에 대한 심층적인 이해가 필수적이다.

선도 물질 선택에서 친화력 상수(KD)와 결합 및 해리 속도(ka, kd)를 평가하는 것이 중요합니다. 유사한 친화력을 가진 약물도 다양한 결합 메커니즘과 동역학을 보일 수 있기 때문입니다. Octet® 라벨 프리 분석법은 생체분자의 친화력과 동역학을 실시간으로 특성화하는 데 귀중한 도구입니다.

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리드 선택 및 정제 과정은 특정 요구 사항을 충족하고 개발 워크플로의 다음 단계로 진행될 수 있는 분자를 식별하는 데 중요한 역할을 합니다. 바이오의약품의 경우, 리드 선택은 원하는 기능적 및 생물리학적 특성을 가진 생물학적 분자를 선별하는 것을 포함하며, 최적화는 이러한 특성을 향상시키는 데 도움을 줍니다.

라벨 프리 분석법은 이러한 프로세스의 속도와 효율성을 개선합니다. 바이오센서 분석법은 고처리량이며 친화력 순위 지정, 대규모 항체 풀의 에피토프 빈닝, Fc-수용체 결합, 당화 스크리닝, 항체-항원 특이성, 결합 특성화, 역가 분석 등 다양한 응용 분야에 쉽게 개발될 수 있습니다.

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Octet® BLI 플랫폼은 바이오의약품 개발의 효율성과 품질을 개선할 수 있는 다양한 분석 기능을 제공합니다. 이러한 기능에는 세포주 개발 중 샘플 스크리닝, 생물반응기의 제품 역가 모니터링, 친화성 수지의 동적 결합 용량 결정, 정제된 제품 특성 분석 등이 포함됩니다. 또한 Octet® BLI 플랫폼은 기존의 효소 결합 면역흡착 측정법(ELISA)보다 더 정확하고 견고하게 숙주 세포 단백질(HCP)과 잔류 단백질 A(RPA)와 같은 공정 유래 잠재적 오염 물질을 신속하게 감지하고 모니터링할 수 있습니다.

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