바이러스 벡터 유전자 전달을 위한 실험 도구

바이러스 벡터를 이용한 유전자 전달은 표적 세포에 외부 유전 물질을 삽입하는 가장 널리 사용되는 방법 중 하나입니다. 키메라 항원 수용체(CAR) T세포 치료에서 렌티바이러스 벡터는 높은 효율성, 안정성 및 다양한 유전자 전달 방식을 제공하기 때문에 선호되는 방법입니다.

하지만 이 과정에는 해결해야 할 과제들이 있는데, 예를 들어 형질전환 효율 최적화, 벡터의 정제 및 핵심 품질 특성 분석 등이 있습니다.

싸토리우스는 렌티바이러스 벡터의 연구 개발 및 실험실 규모 생산을 간소화하기 위한 직교 기술을 제공합니다.

  • 감염 역가 측정을 위한 새롭고 신속한 이미지 기반 분석법
  • 렌티바이러스 벡터의 신속하고 간편한 수확 및 정제
  • 렌티바이러스 생산을 위한 패키징 세포주 개발

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incucyte neural activitity

Incucyte® 생세포 분석 플랫폼

연속 실시간 세포 이미징 및 분석 플랫폼은 배양기에서 세포를 꺼내거나 배양액을 방해하지 않고 분석을 수행합니다.

  • 세포의 유형별 및 시간 의존적 생물학적 활성 프로필
  • 세포 이미지와 동영상을 통해 결과를 시각화하고 검증합니다.
  • 세포 이미지가 자동으로 획득 및 분석되므로 편리하게 자리를 비울 수 있습니다.

렌티바이러스 감염 역가의 신속하고 정확한 측정

바이러스 벡터 샘플의 기능적 감염 역가 측정은 매우 중요하며, 벡터 품질 관리는 바이러스 벡터 공정 개발 및 생산에 있어 중요한 병목 현상입니다.

우리는 Incucyte® 생세포 분석 시스템을 사용하여 항-CD19 CAR 렌티바이러스 벡터의 감염 역가를 정량화하는 새로운 실시간 영상 기반 접근 방식을 개발했습니다.

관련 응용 노트:

생세포 분석 장비 살펴보기


사르토클리어 ® 다이내믹스 연구소

고밀도 포유류 세포 배양을 얻기 위한 단일 단계 방법. 규조토(DE)를 이용한 막 여과 방식을 사용하여 CAR-T 워크플로우의 다음과 같은 문제점을 해결합니다.

  • 빠른 여과
  • 안전한 취급
  • 바이러스 활동의 보존

실험실 규모의 렌티바이러스 벡터 수확 및 정제

CAR-T 치료 과정에서 중요한 벡터 활성을 유지하면서 주요 오염 물질을 제거하고 용액의 탁도를 낮추는 효율적인 렌티바이러스 수확 방법입니다. 이 방법은 렌티바이러스 입자 회수율과 감염 역가를 극대화합니다.

렌티바이러스 벡터는 HEK293T/17 SF 부유 세포에 일시적 형질전환을 통해 생산되었으며, Sartolab® RF50 및 Sartoclear Dynamics® Lab V50을 사용하여 정제되었습니다.

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vivapure purification

바이러스 정제 및 플라스미드 DNA 분리용 키트 및 이온교환 장치

렌티바이러스 및 아데노바이러스 정제 키트는 20~1,000mL 세포 배양액에서 빠르고 안전하게 바이러스를 정제하기 위해 막 크로마토그래피를 사용합니다. 높은 수율과 낮은 내독소 함량은 세포 기반 분석과 같은 후속 응용 분야에 이상적입니다.

  • 정제에 필요한 완충액과 소모품이 포함된 즉시 사용 가능한 키트
  • 단 몇 시간 만에 바이러스 벡터를 정제하고 농축합니다.
  • 시간이 많이 소요되는 초원심분리가 필요 없습니다.

숙주 세포 단백질, RNA 및 염색체 DNA로부터 플라스미드를 분리 및 정제하는 데 사용됩니다.

이 막 크로마토그래피 장치의 이온 교환은 플라스미드 DNA를 제한 효소 소화 및 시퀀싱에 충분한 순도로 신속하게 분리할 수 있게 해줍니다.

막 크로마토그래피를 살펴보세요

Cell Selection and Retrieval instrument

CellCelector 자동화 세포 선택 및 회수 플랫폼

단일 세포, 세포군, 구형체, 오가노이드뿐만 아니라 단일 세포 클론 및 부착성 콜로니의 검출, 선택 및 분리를 위해 개발된 완전 자동화된 세포 이미징 및 선별 시스템입니다.

렌티바이러스 패키징 및 생산 세포주 개발을 위한 단일 세포 클로닝 및 세포주 개발(단일 클론성 검증 통합).

CellCelector는 반고체 배지 선택 모듈을 통해 세균 콜로니를 자동적으로 선별 및 분리하는 데 이상적인 솔루션입니다. 이 모듈은 반액체 배지(예: 메틸셀룰로오스) 및 고체 배지(예: 한천)에서 세포 콜로니를 선별하도록 개발되었습니다.

관련 논문: Broussau, S., Lytvyn V., Simoneau M. 외: 쿠메이트 및 쿠머마이신 유전자 유도 시스템과 나노웰 단일 세포 클로닝을 이용하여 생성된 렌티바이러스 벡터용 패키징 세포. 분자 치료: 방법 및 임상 개발, 제29권, 2023년 6월, 57쪽

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세균 군집 분리 탐구

CAR-Vector 준비 및 테스트의 이점

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수동 작업 단계를 줄이세요

Sartoclear Dynamics® Lab V50 and Sartolab® RF50 filtration units enable clarification of lentivirus-producing HEK293T cultures in a single step, eliminating the centrifugation step and reducing processing time. This method also achieved the best results in lentiviral particle recovery at 87%.

빠르고 정확한 프로토콜

Incucyte® 생세포 분석 시스템은 항-CD19 CAR 렌티바이러스 벡터의 감염 역가를 신속하고 비침습적이며 간편하게 정량 분석할 수 있는 방법을 제공합니다. 실시간 동적 판독 및 통합 소프트웨어를 통해 시간에 따른 형질전환 세포의 생존 여부를 추적하고 최적의 판독 시점을 결정할 수 있습니다.

편리한 애플리케이션

Sartoclear Dynamics® Lab mammalian cell culture clarification and Vivapure® membrane chromatography plasmid DNA - as well as lentivirus purification and concentration kits - offer researchers fast, safe and easy to use solution. Select the most convenient kit for your sample volumes!

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포스터

렌티바이러스 벡터 정제를 위한 입체 배제 크로마토그래피

LV 입자 회수율 86% 및 감염성 물질 회수율 88%를 달성하기 위한 최적화된 정제 프로토콜을 알아보세요.

Label-Free, Real-Time Live-Cell Analysis of Lentiviral Titer Determination
애플리케이션 노트

렌티바이러스 역가 측정의 실시간 생세포 분석

Incucyte® 라이브셀 분석 시스템을 사용하여 항-CD19 CAR 렌티바이러스 벡터의 감염 역가를 정량화하는 실시간 이미지 기반 방법을 알아보세요.

애플리케이션 노트

실험실 규모의 렌티바이러스 벡터 수확 및 정제

SartolabRF50, Sartoclear Dynamics® Lab V50 및 기타 제조업체의 필터를 사용하여 렌티바이러스 벡터의 투명도를 평가했습니다.

전자책

렌티바이러스 벡터 응용 프로그램 eBook

이 전자책은 렌티바이러스 벡터의 상류 생산, 하류 공정, 품질 관리 검사 및 분석에 대한 장으로 구성되어 있습니다.

자주 묻는 질문 (FAQ)

Incucyte® 역가 분석법의 유용성은 다양한 물리적 조건이 바이러스 감염성에 미치는 영향을 조사한 안정성 연구를 통해 입증되었습니다. LV 역가는 4회의 동결-해동 주기 동안 유지되었으며, 이를 통해 DSP 단계 사이에 LV를 -80ºC에서 보관하여 향후 분석 테스트를 수행할 수 있었습니다. 어떤 공정 변수가 감염성 역가에 영향을 미치는지 조사하는 것은 바이러스 벡터의 감염 잠재력을 유지하는 데 중요합니다.

Sartoclear Dynamics ® Lab V50을 사용하면 원심분리 단계가 필요 없어 처리 시간이 단축되고 신속한 처리가 가능합니다. 또한 Sartolab ® RF50은 우수한 필터 장치 설계로 바이러스 물질 유출 위험을 최소화하고 넓은 필터 면적을 제공하여 안전한 처리를 보장합니다. MultiStation과 함께 여러 대를 병렬로 사용할 수 있으며, 렌티바이러스 입자 회수율 87%라는 최상의 결과를 제공합니다.

렌티바이러스 정제 및 농축 키트는 시험관 내 형질전환을 위해 최대 4~5 × 10⁶/mL의 정제된 재조합 렌티바이러스 입자를 회수해야 하는 연구자들에게 빠르고 안전하며 사용하기 쉬운 솔루션을 제공합니다.

VSV-G 슈도타입 렌티바이러스의 정제 및 농축을 위한 키트는 40mL, 500mL 또는 최대 1L의 세포 배양액에서 사용할 수 있도록 세 가지 크기로 제공되며, 8 × 10 ~ 1 × 10의 높은 역가의 감염성 입자를 얻을 수 있습니다.

세균 세포주 개발에서 높은 처리량과 최적의 수율을 달성하기 위해서는 생산 공정 자동화가 매우 중요합니다. 반고체 배지 선별 모듈을 갖춘 셀셀렉터(CellCelector)는 반액체 배지(예: 메틸셀룰로오스) 및 고체 배지(예: 한천)에서 세포 콜로니를 선별하도록 개발되었으며, 이를 통해 양성 세균 콜로니를 자동적으로 선별 및 분리하여 평가 및 후속 공정을 진행할 수 있습니다.

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