바이러스 벡터 유전자 전달을 위한 실험실 도구

바이러스 벡터 유전자 전달은 외래 유전 물질을 표적 세포에 삽입하는 가장 널리 사용되는 방법 중 하나입니다. 키메라 항원 수용체(CAR) T-세포 치료에서 렌티바이러스 벡터는 높은 효율성, 안정성 및 유전자 전달의 다양성을 제공하기 때문에 선호되는 방법입니다.

그러나 전달 효율성 최적화, 벡터의 중요한 품질 속성 정제 및 특성 분석과 같은 해결해야 할 과정상의 과제들이 있습니다.

Sartorius는 렌티바이러스 벡터의 R&D 및 실험실 규모 생산을 간소화하기 위한 직교 기술을 제공합니다:

  • 감염성 역가 결정을 위한 신속한 이미지 기반 분석
  • 렌티바이러스 벡터의 신속한 일단계 수확 및 정제
  • 렌티바이러스 생산을 위한 패키징 세포주 개발

전자책 보기

incucyte neural activitity

인큐사이트 라이브-셀 분석 플랫폼

세포를 배양기에서 제거하거나 배양을 방해하지 않고 분석을 수행하는 연속적이고 실시간 라이브 세포 이미징 및 분석 플랫폼

  • 프로필 유형별 및 시간 의존적 세포 생물학적 활성
  • 세포 이미지 및 동영상으로 결과 시각화 및 검증
  • 세포 이미지가 자동으로 획득 및 분석되는 편리한 워크어웨이 기능

렌티바이러스 감염 역가의 신속하고 정확한 결정

바이러스 벡터 샘플의 기능적 감염성 역가 결정은 바이러스 벡터 공정 개발 및 생산에서 중요한 병목 현상인 벡터 품질 관리와 매우 중요하다.

우리는 Incucyte® 생세포 분석 시스템을 사용하여 항-CD19 CAR 렌티바이러스 벡터의 감염성 역가를 정량화하는 새로운 실시간 이미지 기반 접근법을 개발했다.

관련 응용 노트:

라이브 세포 분석 기기 탐색


Sartoclear ® 다이나믹스 랩

고밀도 포유류 세포 배양을 수확하기 위한 단일 단계 방법. 규조토(DE)를 사용한 막 여과를 활용하여 다음과 같은 CAR-T 워크플로우의 과제를 해결합니다:

  • 신속한 여과
  • 안전한 취급
  • 바이러스 활성 보존

렌티바이러스 벡터의 실험실 규모 수확 및 정제

CAR-T 워크플로우에서 중요한 벡터 활성을 유지하면서 주요 오염물질을 제거하고 용액의 탁도를 줄이는 효율적인 렌티바이러스 수확 방법. 이 방법은 LV 입자와 감염성 역가의 최고 회수율을 제공합니다.

렌티바이러스 벡터는 HEK293T/17 SF 부유 세포의 일시적 형질전환으로 생산되었으며, 정제는 Sartolab® RF50 및 Sartoclear Dynamics® Lab V50으로 수행되었습니다.

관련 응용 노트:

Sartoclear Dynamics Lab 탐색

vivapure purification

바이러스 정제 및 플라스미드 DNA 분리를 위한 키트 및 IEX 유닛

렌티바이러스 및 아데노바이러스 정제 키트는 20~1,000 mL 세포 배양액에서 빠르고 안전한 바이러스 정제를 위해 막 크로마토그래피를 활용합니다. 저내독소 수준의 높은 수율은 세포 기반 분석과 같은 다운스트림 응용에 이상적입니다.

  • 즉시 사용 가능한 정제에 필요한 버퍼 및 소모품이 포함된 키트
  • 몇 시간 내에 바이러스 벡터 정제 및 농축
  • 시간이 많이 소요되는 초원심분리 불필요

숙주 세포 단백질, RNA 및 염색체 DNA로부터 플라스미드 분리 및 정제용

이 멤브레인 크로마토그래피 유닛의 이온 교환은 제한 효소 절단 및 염기서열 분석에 충분한 순도의 플라스미드 DNA를 신속하게 분리할 수 있게 합니다

멤브레인 크로마토그래피 탐색

Cell Selection and Retrieval instrument

CellCelector 자동화 세포 선택 및 검색 플랫폼

단일 세포, 클러스터, 구상체, 오가노이드, 단일 세포 클론 및 부착성 군체의 검출, 선택 및 분리를 위해 개발된 완전 자동화된 세포 이미징 및 선택 시스템.

렌티바이러스 패키징 및 생산 세포주를 위한 단일 라운드 단일 세포 클로닝 및 세포주 개발, 단일클론성 증명 포함.

CellCelector는 반고체 배지(예: 메틸셀룰로스)와 고체 배지(예: 한천)에서 세포 군체를 선택하기 위해 개발된 반고체 배지 선택 모듈을 사용하여 박테리아 군체의 자동화된 선택 및 분리를 위한 이상적인 솔루션입니다.

관련 출판물__PH_0__, S., Lytvyn V., Simoneau M. 등: 큐메이트 및 쿠머마이신 유전자 유도 시스템과 나노웰 단일 세포 클로닝을 사용하여 생성된 렌티바이러스 벡터용 포장 세포. 분자 치료: 방법 및 임상 개발 제29권 2023년 6월 57

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박테리아 군집의 분리 탐구

CAR-벡터 준비 및 테스트를 위한 이점

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수동 단계 감소

Sartoclear Dynamics® 랩 V50 및 Sartolab® RF50 여과 장치를 통해 렌티바이러스 생성 HEK293T 배양의 정제를 단일 단계로 수행하여 원심분리 단계를 제거하고 처리 시간을 단축합니다. 이 방법은 또한 렌티바이러스 입자 회수율 87%로 최상의 결과를 달성했습니다.

빠르고 정확한 프로토콜

Incucyte® 생세포 분석 시스템은 항-CD19 CAR 렌티바이러스 벡터의 감염성 역가를 고처리량으로 신속하고, 비침습적이며, 간소화된 방식으로 기능적 정량화를 제공합니다. 실시간 동역학적 판독 및 통합 소프트웨어를 통해 시간에 따른 생존 형질전환 세포를 추적하고 최적의 판독 시점을 결정할 수 있습니다.

편리한 응용 분야

Sartoclear Dynamics® 포유류 세포 배양 정제 및 Vivapure® 막 크로마토그래피 플라스미드 DNA - 렌티바이러스 정제 및 농축 키트를 포함하여 - 연구자들에게 빠르고, 안전하며 사용하기 쉬운 솔루션을 제공합니다. 샘플 볼륨에 가장 적합한 키트를 선택하세요!

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CAR-Vector 준비 및 테스트를 위한 리소스

포스터

렌티바이러스 벡터 정제를 위한 입체 배제 크로마토그래피

86%의 LV 입자 회수율과 88%의 감염성 회수율을 달성하는 최적화된 정제 프로토콜 학습하기

Label-Free, Real-Time Live-Cell Analysis of Lentiviral Titer Determination
애플리케이션 노트

렌티바이러스 역가 결정의 실시간 생세포 분석

항-CD19 CAR 렌티바이러스 벡터의 감염성 역가를 Incucyte® 생세포 분석 시스템을 사용하여 실시간, 이미지 기반 방법으로 정량화하는 방법 학습

애플리케이션 노트

렌티바이러스 벡터의 실험실 규모 수확 및 정제

렌티바이러스 벡터의 정제를 위해 Sartolab®️ RF50, Sartoclear Dynamics®️ Lab V50 및 기타 제조업체의 필터를 평가했습니다.

전자책

렌티바이러스 벡터 응용 전자책

이 전자책은 렌티바이러스 벡터의 상류 생산, 하류 공정, 품질 관리 검사 및 분석에 대한 장을 다룹니다.

자주 묻는 질문

Incucyte® 역가 분석 키트의 유용성은 바이러스 감염성에 영향을 미치는 다양한 물리적 조건을 검토하는 안정성 연구에서 입증되었습니다. LV 역가는 4회의 동결-해동 주기 동안 유지되어 향후 분석 테스트를 위해 -80°C에서 DSP 단계 사이에 LV를 저장할 수 있었습니다. 어떤 공정 매개변수가 감염성 역가에 영향을 미치는지 조사하는 것은 바이러스 벡터의 감염 잠재력을 유지하는 데 중요합니다.

Sartoclear Dynamics® Lab V50을 사용하면 원심분리 단계가 불필요해져 처리 시간이 단축되고 빠른 처리가 가능합니다. 또한 Sartolab® RF50은 바이러스 물질 유출 위험을 최소화하여 안전한 취급을 가능하게 하는 우수한 필터 장치 설계와 넓은 필터 면적을 특징으로 합니다. MultiStation과 함께 다중 병렬 사용이 가능하며 87%의 최상의 렌티바이러스 입자 회수율을 제공합니다.

렌티바이러스 정제 및 농축 키트는 체외 형질주입을 위해 최대 4 – 5 × 109/mL의 정제된 재조합 렌티바이러스 입자를 회수해야 하는 연구자들에게 빠르고 안전하며 사용하기 쉬운 솔루션을 제공합니다.

VSV-G 유사 렌티바이러스의 정제 및 농축을 위한 세 가지 키트 크기가 제공되며, 40 mL, 500 mL 또는 최대 1 L 세포 배양에서 8 × 108에서 1 × 1010 감염성 입자의 높은 역가를 얻을 수 있습니다.

박테리아 세포주 개발에서 생산 공정의 자동화를 통해 높은 처리량과 최적의 수율을 달성하는 것이 매우 중요합니다. 세미솔리드 매체 피킹 모듈이 장착된 CellCelector는 세미 액체 배지(예: 메틸셀룰로스)와 고체 배지(예: 한천)에서 세포 군체를 선택하고 분리할 수 있어 긍정적인 박테리아 군체를 자동으로 선택하고 평가 및 후속 처리를 가능하게 합니다.

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