종합적인 세포 배양 배지, 세포주 및 완충 용액

일차 세포주는 조직에서 분리한 단일 세포 유형을 최적의 통제된 조건에서 배양하여 얻은 세포주입니다.

세포 배양액의 성분에는 영양소(유기 및 무기), 비타민, 염류, 산소 및 이산화탄소 기체, 단백질(출처가 특정되거나 특정되지 않은 단백질), 탄수화물, 사이토카인, 성장 인자 및 보조 인자가 포함됩니다.

배양액은 2~3일마다 교체해야 합니다. 하지만 세포 밀도가 적정 수준에 도달했을 때 교체하는 것이 가장 좋으므로, 이는 세포 배양의 성장 속도에 따라 달라질 수 있습니다. 대부분의 배양액에는 pH가 낮아지면 노란색으로 변하는 pH 지시약이 포함되어 있는데, 이는 영양분 고갈 및 노폐물 축적의 징후입니다.

1. 혈청 함유 배지 - 혈청 또는 세포 추출물과 같은 정의되지 않은 생물학적 물질을 첨가한 기본 배지.
2. 무혈청, 동물성 성분 함유 배지 - 기본 배지에 동물 유래의 특정 단백질, 성장 인자 및 사이토카인을 첨가한 배지;
3. 무혈청, 무이종 배지 - 기본 배지에 인체 유래 단백질, 성장 인자 및 사이토카인만 첨가한 배지.
4. 동물성 성분이 없는 화학적으로 정의된 배지 - 화학적으로 정의된 원료로 구성된 기본 배지.

세포 배양 배지는 세포 증식에 필요한 영양분과 성장 인자를 제공합니다. 일반적인 기본 세포 배양 배지는 아미노산, 탄수화물, 비타민, 무기염, 포도당, 미량 원소 및 안정적인 pH를 유지하는 완충 용액으로 구성됩니다. 전통적으로는 성장 인자 공급원으로 동물 유래 혈청을 기본 배지에 첨가하여 사용했습니다. 그러나 최근에는 혈청이 없는 화학적으로 정의된 배지 제형이 널리 사용되고 있습니다.

무혈청 배지는 동물 유래 혈청 없이 세포를 배양하도록 설계된 배지입니다. 무혈청 배지에는 동물성 성분이나 가수분해물이 전혀 포함되지 않은 화학적으로 정의된 배지가 포함됩니다.

무혈청 배지를 사용하면 세포 배양을 정해진 조건 하에서 수행할 수 있어 배치 간 변동성을 줄일 수 있습니다. 또한 정제 및 후처리 과정도 간소화됩니다.

제노(Xeno)는 그리스어 "제노스(xenos)"에서 유래했으며 "외국인"을 의미합니다. 제노프리 배지(xeno-free media)는 소나 돼지 등 다른 종의 유래 성분을 포함하지 않고 오직 인간 유래 성분만 함유하도록 조성된 배양 배지입니다.

무혈청 배지는 모든 동물 종의 혈청이 전혀 포함되지 않지만 HSA 및 BSA와 같은 다른 동물 성분은 포함될 수 있으며, 무이종 배지는 인간이 아닌 동물 종의 성분이 포함되지 않지만 인간 혈청은 포함될 수 있습니다.

각 배지는 제조사의 프로토콜 및 권장 사항에 따라 보관해야 합니다. 대부분의 기본 배지는 2~10°C의 온도와 빛을 차단한 상태로 보관하여 구성 성분의 변질 및 오염을 방지해야 합니다. 개봉 후 무균 상태에서 추가 성분을 첨가한 배지는 일반적으로 2~8°C의 온도와 빛을 차단한 상태에서 1~4주 동안 보관할 수 있습니다.

각 배지는 제조사에서 제공하는 프로토콜 및 권장 사항에 따라 보관해야 합니다. 일반적인 유효기간은 제조일로부터 12~18개월입니다. 개봉 후 무균 상태에서 다른 성분과 혼합한 배지는 일반적으로 2~8°C에서 빛을 차단한 상태로 1~4주 동안 보관할 수 있습니다. 혈청 항생제가 첨가된 일반 배지는 4°C에서 최대 4주 동안 보관 가능하며, 무혈청 배지는 최대 2주 동안 보관할 수 있습니다.

사용하지 않은 배지에는 폐기 전에 존재하는 미생물을 제거하기 위해 최종 농도가 10% 이상이 되도록 표백제를 첨가해야 합니다.