포괄적인 세포 배양 배지, 세포주 및 완충액 솔루션

일차 세포주는 조직에서 분리된 단일 세포 유형을 최적의 통제된 조건에서 배양하여 생성된다.

세포 배지 성분에는 영양분(유기 및 무기), 비타민, 염, O₂ 및 CO₂ 가스 상, 단백질(정의된 또는 정의되지 않은 출처), 탄수화물, 사이토카인, 성장 인자, 보조 인자가 포함된다.

배지는 2~3일마다 교체해야 합니다. 그러나 세포 밀도가 건강한 수준에 도달했을 때 배지를 교체하는 것이 가장 좋으므로, 이는 세포 배양의 성장 속도에 따라 달라집니다. 대부분의 배지에는 pH가 떨어지면 노란색으로 변하는 pH 지시약이 포함되어 있어, 이는 영양분 고갈과 폐기물 축적의 신호입니다.

1. 혈청 함유 배지 - 혈청 또는 세포 추출물과 같은 정의되지 않은 생물학적 물질로 보충된 기본 배지.
2. 혈청 무첨가, 동물 성분 포함 배지 - 정의된 단백질, 성장 인자, 동물 유래 사이토카인이 보충된 기본 배지
3. 혈청 무첨가, 이종 무첨가 배지 - 오직 인간 유래의 정의된 단백질, 성장 인자, 사이토카인이 보충된 기본 배지
4. 동물 성분 무첨가, 화학적으로 정의된 배지 - 화학적으로 정의된 원료로 구성된 기본 배지

세포 배양 배지는 세포 증식에 필요한 영양분과 성장 인자를 제공합니다. 일반적인 기본 세포 배양 배지는 아미노산, 탄수화물, 비타민, 무기염, 포도당, 미량 원소 및 안정적인 pH를 유지하는 완충 시스템으로 구성됩니다. 전통적으로 동물 유래 혈청이 기본 배지를 보충하여 성장 인자의 원천을 제공하는 데 사용되었습니다. 현재는 무혈청, 화학적으로 정의된 배지가 매우 선호됩니다.

무혈청 배지는 동물 유래 혈청 없이 세포를 배양하도록 설계된 배지입니다. 무혈청 배지에는 어떤 동물 성분이나 가수분해물도 없는 화학적으로 정의된 배지가 포함됩니다.

혈청 무첨가 배지는 정의된 조건에서 세포 배양을 가능하게 하여 배치 간 변동성을 제한합니다. 또한 정제 및 다운스트림 공정을 단순화합니다.

제노는 그리스어 단어 '크세노스'에서 유래되었으며 '외국인'을 의미합니다. 제노-프리 배지는 소나 돼지와 같은 다른 종이 아닌 오직 인간 유래 성분만 포함하는 배양 배지입니다.

혈청 무첨가 배지는 모든 동물 종의 혈청이 없지만 다른 동물 성분(예: HSA 및 BSA)을 포함할 수 있으며, 제노 프리 배지는 비인간 동물 종의 성분이 없지만 인간 혈청을 포함할 수 있습니다.

각 배지는 제조업체의 프로토콜 및 권장 사항에 따라 보관해야 합니다. 대부분의 기본 배지는 2-10°C에서 빛으로부터 보호된 상태로 보관해야 하며, 구성 요소의 분해와 오염을 방지해야 합니다. 무균 조건에서 추가 구성 요소와 함께 개봉된 후에는 일반적으로 배지를 2-8°C에서 빛으로부터 보호하여 1-4주 동안 보관할 수 있습니다.

각 배지는 제조사의 프로토콜 및 권장사항에 따라 보관해야 합니다. 일반적인 유효기간은 제조 후 12-18개월 이내입니다. 무균 조건에서 다른 구성 요소와 함께 개봉한 경우, 배지는 일반적으로 2-8°C에서 1-4주 동안 보관할 수 있으며 빛으로부터 보호해야 합니다. 혈청 항생제가 첨가된 기본 배지는 4°C에서 최대 4주 동안 보관할 수 있으며, 혈청이 없는 배지는 최대 2주 동안 보관할 수 있습니다.

폐기 전 존재할 수 있는 미생물을 처리하기 위해 사용하지 않은 배지에 최종 농도 ≥10%로 표백제를 추가해야 합니다.