고처리량 선별 검사(HTS)를 이용한 부착성 세포 분석

전통적으로 많은 세포 기반 유세포 분석법은 부착성 세포에 최적화되지 않고 부유 세포에서만 사용되어 왔습니다. 이는 주로 유세포 분석에 적합한 단일 세포 부유액을 생성하기 위해 부착성 세포를 들어올리고 분리해야 하는 추가 단계 때문입니다. 유세포 분석에서 부착성 세포를 무시하면 많은 분석법의 잠재적 응용을 크게 제한합니다. 특히 유방암이나 폐암과 같은 면역종양 분야에서 부착성 세포에서 발견되는 수용체를 대상으로 하는 치료제가 많기 때문입니다. 따라서 유세포 분석에서 최대 성과를 달성하기 위해서는 분석법 개발 중에 부착성 세포 유형을 조사할 수 있는 능력을 포함하는 것이 필수적이며, 다음과 같은 기존 기술의 단점을 피해야 합니다.

  • 세포 마커 발현이나 사이토카인 방출에 대한 심층 조사 없이 대량 측정(예: 이미징)을 제공
  • 다른 매개변수를 정량화하기 위해 여러 워크플로우가 필요하며, 종종 여러 다른 기기를 요구함
  • 생리학적 관련성 부족
  • 최적화, 고정 및 반복적인 세척 단계와 같은 긴 시간이 소요되는 워크플로우 포함

본 논문에서는 iQue® 고처리량 스크리닝(HTS) 세포 분석 플랫폼을 위한 부착성 세포 분석 포트폴리오를 제시하며, 세포 탈리 및 분리를 위한 따라하기 쉬운 프로토콜과 검증된 시약 키트 및 분석 템플릿을 소개합니다. 부착성 종양 세포 제거 후 면역 세포 표현형 및 기능 분석(2D 및 3D 모델 모두), ADCP 및 NK ADCC 분석 맥락에서의 약물 작용 메커니즘(MoA) 특성화, 부착성 세포 유형으로의 치료용 항체 내재화 평가 등 다양한 연구 영역의 분석을 설명합니다.


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응용

iQue® 부착 세포 애플리케이션

- T 세포 활성화, 살해, 피로 및 기억 키트를 사용하여 부착 세포 모델에서 종양 세포 살해 중 면역 세포 표현형 및 기능 식별


- 확립된 워크플로우 및 시약 키트를 사용하여 고형 종양 표적에 대한 항체로 세포독성 유도 메커니즘 프로파일링


- 생존 부착 세포 유형과 표적 치료용 항체의 상호작용 평가


- 고급 구상체 모델을 사용하여 고형 종양에 대한 면역 반응 평가

2D 단일층으로 배양된 부착성 세포 들어올리기 워크플로

부착성 세포 단층을 HTS 세포학 분석을 위해 부드럽게 들어올리는 쉬운 프로토콜

3D 단일 구상체 모델에서 면역 세포 분석을 위한 워크플로우

종양 침윤 림프구(TILs)와 면역 세포 살해(ICK)의 분석 프로토콜을 개요로 하는 모식도, iQue® 를 사용한 3D 고급 고형 종양 모델

주요 장점

  • 간단한 프로토콜 따르기 - 간단한 세포 준비 프로토콜을 혼합 및 판독 시약 키트와 결합하여 원활하고 따라하기 쉬운 워크플로우 생성
  • 고처리량 분석 수행 - iQue® 는 단 15분 만에 전체 96웰 플레이트를 획득할 수 있어 부착성 세포 스크리닝을 현실화
  • 샘플 사용 최대화 - 부드러운 해리 프로토콜을 활용하여 세포 사멸을 최소화하고 표면 마커 무결성을 유지하면서 단일 세포 현탁액으로 세포 손실 감소
  • 데이터 수집 및 분석 간소화 - 복잡한 데이터를 빠르게 수집하고 분석하여 신속한 의사결정 지원

리소스

문헌 및 문서

제품 프로토콜

부착 세포 리프팅 프로토콜

iQue®️ Reagent Kits brochure cover
브로셔

iQue® 시약의 완전한 제품 목록

동일한 시점에 동일한 세포로부터 세포, 비드 및 분비된 단백질의 포괄적이고 다중 분석 수행

브로셔

iQue® 고처리량 스크리닝(HTS) 세포측정 플랫폼 브로슈어

관련 제품 및 응용 분야

T-Cell

T 세포 특성 분석

T 세포 활성화

T 세포 제거

T-Cell

T 세포 기억

T 세포 탈진

Incucyte 및 iQue ICK 워크플로우 결합

항체 내재화

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