신경세포 활동을 측정해야 하는 이유

신경세포 네트워크의 생성과 성숙은 신경발생의 필수적인 특성으로, 적절한 신경세포 기능에 필요한 세포 과정이 개발되었음을 확인해줍니다. 최근 인간 유도만능줄기세포(hiPSC) 유래 신경세포의 발전은 인간 신경계의 기본 메커니즘과 복잡한 질환 연구를 위한 강력한 시험관 내 모델 전략으로서 희망을 제공합니다. 분자 및 발달 신경과학, 약물 개발, 신경독성학을 포함한 광범위한 연구 분야에서 hiPSC 유래 세포 모델을 활용하여 관련 신경세포 네트워크와 질병 상태에 대한 기능적 통찰을 얻고 있습니다. 그러나 이러한 모델이 분화되고, 성숙하며, 기능적으로 활성화되는 과정의 특성화와 최적화는 현재 기술에 의해 제한되고 있습니다.

활동을 측정하는 전통적인 기술은 종종 다음과 같은 한계가 있습니다:

  • 제한된 수의 세포로부터 활동 측정을 도출하여 진정한 네트워크의 맥락을 놓칩니다
  • 세포 형태, 공간 해상도를 확인하거나 기능적 연결성을 평가할 수 없습니다
  • 반복적이고 운동학적인 평가가 아닌 단일 엔드포인트 분석
  • 세포 분석을 위해 배양 플레이트를 배양기에서 장비로 옮겨야 하므로 민감한 세포를 손상시키거나 신경세포 기능을 변화시킬 가능성 증가
  • 생리학적으로 관련된 환경 조건을 통합하지 않아 종단 연구를 더욱 제한

Incucyte 신경세포 활성 분석은 기기, 소프트웨어, 시약으로 구성된 종합 솔루션으로, 복잡한 신경세포 활성 측정에 대한 전례 없는 접근을 가능하게 하여 신경세포 모델에 대한 기능적 통찰력을 제공합니다. 새로운 발견의 시대가 기다리고 있습니다....

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어플리케이션

Incucyte 신경세포 활성 분석 소개

신경세포의 활성 여부, 활성 시점, 시간에 따른 활성 변화 확인

연속 이미징 및 분석을 통해 신경세포 네트워크의 활성 및 연결성에 대한 통찰력을 얻으세요. Incucyte 신경세포 활성 분석은 생리학적으로 관련된 조건에서 신경세포 모델의 특성을 파악하기 위해 시냅스 활성을 직접, 장기간 측정할 수 있게 합니다. Incucyte 실시간 세포 분석 시스템, Incucyte 신경세포 활성 분석 소프트웨어, Incucyte Neuroburst Orange 렌티바이러스를 사용하여 수주 또는 수개월 동안 자발적 신경세포 활성을 시각화하고 분석하세요.

주요 장점

Incucyte 신경세포 활성 분석의 주요 장점

  • - 다양한 신경세포 유형에서 Incucyte Neuroburst Orange 렌티바이러스를 사용하여 유전자 인코딩 형광 칼슘 센서 발현
  • - 세포 형태를 정성적으로 모니터링하면서 수천 개의 세포로부터 단기 칼슘 유동성 동역학을 자동으로 포착 및 분석
  • - 세포를 배양기 내부에 그대로 두고 96웰 플레이트의 모든 웰 내 모든 활성 객체의 종단적 변화 정량화
  • - 실험실 검증된 생세포 시약, 확립된 프로토콜, 전용 소프트웨어를 사용하여 전례 없는 표현형 정보 획득 - 초보 사용자도 쉽게 사용 가능

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혁신적이고 비방해성 시약

다양한 신경세포 유형(iPSC 유래 모델 포함)에서 Incucyte Neuroburst 오렌지 렌티바이러스를 발현하여 칼슘 진동 측정을 통한 활동의 동적 변화 파악

CNS.4U iPSC 유래 신경세포(Ncardia)를 96웰 마이크로플레이트에 20,000세포/웰로 파종하고 Incucyte Neuroburst 오렌지 시약으로 감염시켜 시간에 따른 신경세포 활동을 모니터링했습니다. 15일과 44일에 캡처된 영화(3분 지속)는 자발적인 신경세포 활동(칼슘 진동) 발달을 보여주며, 위상 이미지는 세포 형태의 정성적 검사를 가능하게 합니다. 45일 동안 매 24시간마다 3분간 촬영한 영화는 Incucyte Neuroburst 오렌지 시약의 지속적인 발현을 보여줍니다. 오렌지 형광 신호 동역학 정량화 결과, 실험 과정에서 활성 객체 수의 증가와 후기 시점에서의 평균 상관관계(연결성) 증가를 보여 기능적이고 성숙한 네트워크의 발달을 나타냅니다.


수천 개의 세포 분석

Incucyte Stare Mode Movie 획득을 사용하여 96웰 플레이트의 각 웰 내 모든 활성 세포에 대한 단기 칼슘 유동 동역학을 자동으로 캡처 및 분석합니다. 네트워크 연결 정도를 드러내는 상관관계 지표를 쉽게 생성할 수 있습니다.

Incucyte rAstrocytes와 공배양 모델에서 15,000세포/웰로 파종된 Incucyte rCortical Neurons 1차 신경세포는 이후 Incucyte Neuroburst Orange 렌티바이러스에 감염되었습니다. Vessel View는 8일차에 영화 획득 중 96웰 플레이트의 각 웰에서 활성 객체(범위 이미지)의 요약을 표시하여 마이크로플레이트 전체의 활동 차이를 보여줍니다. 통합된 Incucyte 신경 활동 분석 소프트웨어 모듈을 사용하여 범위 이미지의 마스킹(보라색으로 표시)을 통해 각 활성 객체를 식별합니다. 특정 시점에서 획득된 영화의 96웰 요약 트레이스는 버스트 강도, 활성 객체 수(왼쪽 삽입 값) 및 평균 상관관계(오른쪽 삽입 값)의 전체 96웰 보기를 제공합니다.


활동의 만성 연구 수행

신경세포 모델의 특성화를 위해 생리학적으로 관련된 조건에서 활동의 종단적 변화를 정량화

iCell 글루타신경세포(Cellular Dynamics International)를 PEI/라미닌 코팅된 96웰 배양 플레이트에 래트 별아교세포(15K 세포/웰)와 공동 배양하여 30K 세포/웰로 파종했습니다. 신경세포는 DIV 2에 Incucyte Neuroburst Orange 렌티바이러스로 형질감염되었으며, 20일 동안 자발적 신경세포 활동을 분석했습니다. 종단적이고 동적인 변화의 동역학적 정량화(중앙 그래프)는 평균 버스트 속도와 시간에 따른 평균 상관관계를 보여주며, 신경세포 네트워크 성숙 중에 버스트 속도가 증가하여 5일째 정점에 도달함을 나타냅니다. 시간 경과 데이터는 또한 상관관계 증가로 나타나는 신경세포 시냅스 연결의 증가를 보여줍니다. 활성 객체 추적(모서리 추적)은 획득된 모든 영상에 대한 신경세포 활동 및 연결의 동적 변화에 대한 상세한 통찰을 제공하며, 영상 보기 도구로 정성적으로 확인됩니다.


모든 과학자를 위해 제작됨

종단 솔루션 – 시약, 프로토콜, 목적에 맞는 획득 및 분석 소프트웨어로 과학적 발견 지원

자동화된 획득 및 분석의 힘을 독창적인 시약과 실험실 검증 프로토콜과 결합하여 표현형 정보에 대한 전례 없는 접근성을 확보하세요. 안내된 인터페이스는 신속한 실험 설정 및 분석을 가능하게 하여 전체 연구팀이 데이터와 이미지에 쉽게 접근할 수 있게 합니다.


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신경세포 활성 분석 고객 추천

마이클 울러, 이학박사 | 생화학 교수
분자 및 행동 신경과학 연구소 연구 교수, 미시간 대학교

Incucyte 신경세포 활성 분석은 서로 다른 유전자형의 신경세포 배양체 네트워크 활성을 비교하는 데 특히 유용하며, 인간 줄기세포로부터 성숙한 신경세포를 생성하기 위한 배양 조건을 최적화하는 데 필수적임을 발견했습니다.

Krishna Vadodaria, PhD | 연구 associate
Rusty Gage 연구실, Salk 연구소

Incucyte 신경세포 활성 분석은 여러 신경세포주에 걸쳐 다양한 배양 조건을 테스트할 수 있게 해줍니다. 이 분석을 통해 이전에는 불가능했던 방식으로 반고처리량 규모에서 서로 다른 세포 유형 간 공동배양의 영향과 다양한 처리 조건을 평가할 수 있었습니다.

Louis Dang, MD, PhD | Clinical Lecturer
Jack Parent Lab, University of Michigan

“The Incucyte Neuronal Activity Assay allowed me to perform a longitudinal analysis of calcium transients in stem cell-derived neurons. The 96-well plate format allows multiple concurrent comparisons from different cell lines and growth conditions. The burst rate, burst duration, and network formation was highly reproducible with minimal well-to-well variability. The ability to concurrently view cell morphology with phase contrast was highly advantageous to eliminate outliers.”

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리소스

문헌 및 문서

Induced Pluripotent Stem Cells iPSC Cell Therapy
적용분야 노트

성장인자 및 사이토카인을 이용한 역분화줄기세포(iPSC) 배양 프로토콜 최적화

iPSC 배지에서 성장인자 및 사이토카인을 효과적으로 사용하여 다분화능 유지, 성장 지원 및 배양 간격 증가

적용분야 노트

성장인자 및 사이토카인을 이용한 SH-SY5Y 분화 최적화

인간 발달 및 질병 연구를 위한 번역 모델

브로슈어

Incucyte 시약, 소모품 및 소프트웨어

Incucyte Neuroburst 오렌지 렌티바이러스

생세포 내 신경 활동 검출용

적용분야 노트

장기 생세포 시각화 및 신경 활동 정량화

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Incucyte 신경 활동 분석

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포스터: SFN 2017

인간 유도만능줄기세포로부터 자발적 신경 활동 및 약리학적 반응의 장기 실시간 세포 시각화 및 정량화...

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신경돌기 성장

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