하이브리도마 & CHO 클론 채취

항체 생산을 위한 고발현 클론의 스크리닝 및 분리

항체 생산을 위한 새로운 세포주 개발의 기본 단계는 목표 단백질를 높고 일관되게 생산하는 단일 세포 유래 클론을 식별하는 것이다. 기존 기술의 시간이 많이 소요되고 노동 집약적인 단계와 비교하여, CellCelector를 이용한 생산성 스크리닝은 더욱 효율적인 방식으로 수행될 수 있다.

고생산 클론의 선별 및 분리

하이브리도마 클론의 항체 생성은 클론 간에 크게 다를 수 있다. 클론에 의해 생성되고 배지로 분비된 단백질은 형광 표지된 이차 항체로 가시화될 수 있다. 반고체 배지의 점성으로 인해 항체가 배지로 더 이상 확산되지 않기 때문에, 신호는 이를 생성한 세포 클론 주변의 형광 헤일로로 나타날 것이다. 특히 고생산 클론을 선별하기 위해 CellCelector 소프트웨어는 밝은 시야에서 보이는 세포 군체의 크기를 세포 군체를 둘러싼 형광 헤일로의 크기와 비교하고 각 클론의 항체 생산성 비율을 계산한다. 이를 통해 최고의 항체 생산을 위해 여러 소스 플레이트에 걸친 세포 클론의 순위를 매길 수 있다.

하이브리도마 클론(연한 파란색)의 개략도 및 형광 표지된 이차 항체(녹색에 노란 원)로 분비된 항체(진한 파란색) 검출 (A-C)

형광 표지된 이차 항체와 배양 후 하이브리도마 클론의 현미경 이미지 (밝은 시야와 형광 조명 오버레이) (D-F)

항체 생산 강도는 콜로니 주변 형광 헤일로의 직경과 상관관계가 있음: 항체를 생산하지 않는 콜로니 (A와 D), 중간 수준의 항체를 생산하는 콜로니 (B와 E), 많은 양의 항체를 생산하는 콜로니는 고생산 콜로니 (C와 F). 콜로니의 크기는 유사함 (밝은 시야 관찰의 확대 영역 D-F 참조)