세포 배양 배지, 세포주 및 버퍼 솔루션의 종합적 접근

일차 세포주는 조직에서 분리된 단일 세포 유형을 최적화되고 통제된 조건에서 배양하여 생성된 세포주입니다.

세포 배지 성분에는 영양분(유기 및 무기), 비타민, 염류, O 및 CO 가스 상, 단백질(규명된 또는 규명되지 않은 공급원), 탄수화물, 사이토카인, 성장인자, 보조인자가 포함됩니다.

배지는 2~3일마다 교체해야 합니다. 그러나 배지는 세포 밀도가 건강한 수준에 도달했을 때 가장 잘 교체되므로, 이는 세포 배양의 성장 속도에 따라 달라집니다. 대부분의 배지에는 pH가 떨어지면 노란색으로 변하는 pH 지시약이 포함되어 있으며, 이는 영양분 고갈과 폐기물 축적의 신호입니다.

1. 혈청 포함 배지 - 혈청 또는 세포 추출물과 같은 정의되지 않은 생물학적 물질로 보충된 기초배지
2. 혈청 무첨가, 동물 구성성분 포함 배지 - 동물 유래 정의된 단백질, 성장인자 및 사이토카인으로 보충된 기초배지
3. 혈청 무첨가, 제노 프리 배지 - 오직 인간 유래 정의된 단백질, 성장인자 및 사이토카인으로 보충된 기초배지
4. 동물 성분 무첨가, 화학적으로 규명된 배지 - 화학적으로 규명된 원료로 구성된 기초배지

세포 배양 배지는 세포 증식에 필요한 영양분과 성장인자를 제공합니다. 일반적인 기초 세포 배양 배지는 아미노산, 탄수화물, 비타민, 무기염, 포도당, 미량원소 및 안정적인 pH를 유지하는 완충 시스템으로 구성됩니다. 전통적으로 성장인자의 공급원으로 동물 유래 혈청이 사용되었습니다. 현재는 무혈청, 화학적으로 규명된 배지 조성물이 매우 선호됩니다.

혈청 무첨가 배지는 동물 유래 혈청 없이 세포를 배양하도록 설계된 배지입니다. 혈청 무첨가 배지에는 어떤 동물 성분이나 가수분해물도 없는 화학적으로 규명된 배지가 포함됩니다.

혈청 무첨가 배지는 정의된 조건 하에서 세포 배양을 가능하게 하여 배치 간 변동성을 제한합니다. 또한 정제 및 다운스트림 공정을 단순화합니다.

크세노는 그리스어 'xenos'에서 유래되었으며 '외국인'을 의미합니다. 크세노-프리 배지는 오직 인간 유래 성분만 포함하고 소나 돼지와 같은 다른 종의 성분은 포함하지 않는 배양 배지입니다.

무혈청 배지는 모든 동물 종의 혈청이 없지만 다른 동물 성분(예: HSA 및 BSA)을 포함할 수 있는 반면, 크세노-프리는 비인간 동물 종의 성분이 없지만 인간 혈청을 포함할 수 있습니다.

각 배지는 제조사의 프로토콜 및 권장사항에 따라 보관해야 합니다. 대부분의 기초배지는 2-10°C에서 통제된 조건으로, 빛으로부터 보호되고, 구성 성분의 분해 및 오염을 방지하기 위해 안전하게 보관해야 합니다. 무균 조건에서 개봉하고 추가 성분을 보충한 후에는 일반적으로 배지를 2-8°C에서 1-4주 동안 빛으로부터 보호하여 보관할 수 있습니다.

각 배지는 제조사의 프로토콜 및 권장사항에 따라 보관해야 합니다. 일반적인 유효기간은 제조 후 12-18개월 이내입니다. 무균 조건에서 개봉하고 다른 성분을 보충한 후에는 배지를 일반적으로 2-8°C에서 1-4주 동안 빛으로부터 보호하여 보관할 수 있습니다. 혈청 항생제가 보충된 클래식 배지는 4°C에서 최대 4주까지 보관할 수 있으며, 혈청 미포함 배지는 최대 2주까지 보관할 수 있습니다.

사용하지 않은 배지에는 폐기 전 존재할 수 있는 모든 미생물을 처리하기 위해 최종 농도 ≥10%로 표백제를 추가해야 합니다.