역방향 피펫팅 기법: 정의와 사용 시기

순방향 피펫팅은 표준 기술로 간주되며 대부분의 수용액에 이상적입니다. 순방향 피펫팅에서는 목표 부피를 흡입하고 분주하며, 플런저를 두 번째 정지 위치까지 눌러 팁을 완전히 비우는 별도의 블로아웃 단계를 사용합니다.

역 피펫팅 기술에서는 피펫이 선택된 용량에 추가 용량을 흡입합니다. 분주 후, 초과 용량은 팁에 남아 있다가 폐기됩니다.

공기 변위 피펫은 증류수로 보정되지만, 실험실 작업은 증류수와 완전히 다른 특성을 가진 액체로 가득 차 있습니다. 일부 액체 특성은 피펫으로 측정된 부피의 정확성에 영향을 줄 수 있습니다. 전달된 부피에 영향을 줄 수 있는 주요 특성에는 휘발성 액체 또는 용매, 고점도 액체, 따뜻하거나 차가운 액체 온도, 거품이 생기는 액체 및 계면활성제가 포함된 액체(표면 장력이 낮은 액체)가 있습니다. 역 피펫팅은 다음과 같은 까다로운 액체를 다룰 때 선택할 수 있는 방법입니다:

• – 에탄올과 아세톤과 같은 액체 및 용매는 높은 증기압으로 인해 떨어짐이 발생하기 쉽습니다. 휘발성 액체의 역 피펫팅은 총 목표 부피를 분주할 때 남아있는 증발의 영향을 제거함으로써 떨어짐을 줄입니다. 추가로 증발하는 액체는 초과분에서 빠져나가 피펫팅 성능에 영향을 주지 않습니다.
• – 글리세롤 및 기타 점성이 높은 액체는 느린 이동 특성과 팁 표면에 대한 부착성으로 인해 피펫팅이 까다로울 수 있습니다. 이는 정확성과 반복성을 방해할 수 있습니다. 리버스 피펫팅은 팁에 있는 과도한 양에서 부착된 양을 줄이고 전체 목표 용량을 분주하기 때문에 정확성이 향상됩니다.
• - 오일은 플라스틱에 필름을 형성하기 때문에 정방향 피펫팅과 비교하여 리버스 피펫팅이 오일을 더 정확하고 재현 가능하게 분주합니다. 오일의 부착은 정방향 피펫팅의 정확성을 감소시킵니다. 리버스 피펫팅에서는 플라스틱에 부착된 오일이 과도한 용량에서 빠져나와 정확성을 향상시킵니다.
• – 단백질 또는 세제를 포함하는 용매 및 액체는 쉽게 거품이 생기기 쉽습니다. 거품이 생기는 액체를 다룰 때 포워드 피펫팅은 권장되지 않습니다. 이는 거품 형성에 기여할 수 있기 때문입니다. 리버스 피펫팅을 사용하면 원하는 용량을 정확하게 분주할 수 있으며 거품 생성을 방지할 수 있습니다.

실험실에서 해당 도구들이 사용되는 한, 까다로운 액체와 용매가 작업 정확성, 반복성 및 효율성을 위협할 필요는 없습니다. Sartorius는 액체 취급 과정을 간단하고 오류 없게 만들기 위해 피펫팅 가이드부터 Sartorius 피펫팅 아카데미까지 풍부한 리소스를 제공합니다.