물리화학적 특성

분자량 측정은 단백질의 분자량을 결정하는 과정입니다. 측정된 질량을 기본 서열로부터 예상되는 질량과 비교함으로써 아미노산 조성에 대한 예비적인 확인을 얻을 수 있습니다. 또한, 분자량 분석은 주요 단백질 당형태 및 기타 주요 변형에 대한 정보도 제공합니다.

LC/MS 분석 전에 IgG를 전처리하면 N-글리코실화와 관련된 이질성이 제거됩니다. 이 방법은 글리칸이 부착되지 않은 단백질 골격의 질량을 측정하는 데 사용됩니다. 이 방법은 완전한 질량 데이터와 함께 단백질의 1차 구조를 간접적으로 검증하는 데 활용됩니다.

LC/MS 분석은 개별 경쇄와 중쇄의 분자량을 확인하는 데 사용됩니다. 완전한 형태와 탈당화된 형태의 질량 데이터를 확인하는 것 외에도, 더 작은 단백질 조각에 대한 분석은 이 방법이 미미한 변형에도 더 민감하다는 것을 의미합니다.

저희 팀은 CE-SDS 및 SEC를 사용하여 크기 변이체에 대한 보완적인 분석도 제공할 수 있습니다. 이러한 기술은 분자량 및 크기 이성질체 평가에 대한 상호보완적인 접근 방식을 제공합니다.

자동화, 정량 분석, 빠른 속도 및 높은 효율성 덕분에 CE-SDS 기술은 수동 슬랩 겔 전기영동을 효과적으로 대체하게 되었습니다. 싸토리우스의 CE-SDS 기술은 단백질의 크기 변이체에 대한 정보를 제공합니다. 이 기술은 낮은 분산도와 높은 해상도를 가진 크로마토그래피 방법을 사용하여 단일클론 항체의 고분자량 및 저분자량 변이체를 식별하고 결합 및 기능적 활성에 미치는 영향을 평가합니다. 또한 ICH Q6b에서 요구하는 동일성, 균질성 및 순도에 대한 크로마토그래피 패턴 정보도 제공합니다.

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이 방법은 낮은 분산도와 높은 해상도를 가진 크로마토그래피 기법을 사용하여 단일클론 항체의 고분자량 및 저분자량 변이체를 식별하고, 결합 및 기능적 활성에 미치는 영향을 평가합니다. 또한, 이 방법은 ICH Q6b에서 요구하는 항체의 동일성, 균질성 및 순도에 대한 크로마토그래피 패턴 정보도 제공합니다.

크로마토그래피 방법을 이용하면 등전점(pI)을 기준으로 단백질의 전체 순전하에 따라 단백질을 분리할 수 있습니다. 이온 교환 크로마토그래피(IEX)는 순전하에 미미한 차이가 있는 분자들을 구별하는 데 매우 효과적인 기술입니다. 여러 아미노산 측쇄의 양쪽성 특성 때문에, 이러한 특성은 생물학적 물질의 이질성을 이해하는 데 필수적입니다.

역상 크로마토그래피(RP 크로마토그래피)는 제품 순도에 대한 중요한 정보를 제공함으로써 단클론 항체의 특성 분석을 지원합니다. 분리는 소수성을 기반으로 하므로, RP 크로마토그래피는 크기 배제 크로마토그래피 및 이온 교환 크로마토그래피와 같은 다른 기술과 직교 선택성을 제공합니다. 이는 특히 서로 다른 이황화 결합 구조로 인해 구조적으로 구별되는 형태를 가질 수 있는 IgG2에 적합합니다.

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_{Example electropherogram for NIST mAb standard} 

자동화, 정량, 속도 및 높은 효율성 덕분에 수동 슬랩 겔 전기영동을 효과적으로 대체하는 기술이 되었습니다. Sartorius의 CE-SDS 기술은 단백질의 크기 변이체에 대한 정보를 제공합니다. 이 기술은 등전점(pI)을 기준으로 전하 변이체를 분리하는 2단계 기술입니다. pI 값은 알려진 pI 값을 가진 단백질 표준을 통해 결정할 수 있습니다. cIEF는 이온 교환 크로마토그래피(IEX)와 함께 수행되는 직교 기술이며 SCIEX 800 시스템을 사용하여 실행됩니다.

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크로마토그래피 방법을 이용하면 등전점(pI)을 기준으로 단백질의 전체 순전하에 따라 단백질을 분리할 수 있습니다. 이온 교환 크로마토그래피(IEX)는 순전하에 미미한 차이가 있는 분자들을 구별하는 데 매우 효과적인 기술입니다. 여러 아미노산 측쇄의 양쪽성 특성 때문에, 이러한 특성은 생물학적 물질의 이질성을 이해하는 데 필수적입니다.

cIEF는 등전점(pI)을 기준으로 전하 변이체를 분리하는 2단계 기술입니다. pI 값은 알려진 pI 값을 가진 단백질 표준을 통해 결정할 수 있습니다. cIEF는 이온 교환 크로마토그래피(IEX)와 함께 수행되는 직교 기술이며, SCIEX 800 시스템을 사용하여 실행됩니다.

IgG2 동형 단백질에 대한 역상 LC/MS 프로파일링

고해상도 질량 분석기(MS)와 결합된 역상 액체 크로마토그래피(LC)는 단일클론항체(mAb) 치료제의 특성 분석에 강력한 분석 방법입니다. 고성능 분리와 정확한 질량 정보의 조합은 항체의 이질성과 안정성에 대한 상세한 정보를 제공할 수 있습니다. 그러나 현재까지 완전 단백질의 최고 해상도 크로마토그래피 분리는 이온 쌍 시약에 의존해 왔는데, 이는 MS 감도를 저하시킬 수 있습니다. Sartorius는 IgG2 항체의 특성 분석을 용이하게 하기 위해 고해상도 완전 단백질 분리와 높은 MS 감도를 결합한 방법을 개발했습니다. 최근 컬럼 기술의 발전을 활용하여 이 방법은 다양한 IgG2 동형 단백질을 탁월하게 분리해냈으며, 여러 추가적인 단백질 종을 검출했습니다. 또한, 새로운 이온 쌍 시약의 사용은 MS 감도를 향상시켜 각 단백질 종에 대해 고품질 질량 스펙트럼을 얻을 수 있도록 합니다.

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_{Example electropherogram for NIST mAb standard}